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當(dāng)前位置:西安禾洋生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>NUGC-4人胃癌細(xì)胞:印戒細(xì)胞癌研究的理想模型
產(chǎn)品編號:HY-A001 | 英文名稱:NUGC-4 | 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
一、產(chǎn)品簡介
CellFactory NUGC-4人胃癌細(xì)胞(貨號:HY-A001)源自人胃印戒細(xì)胞癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶,是胃癌研究領(lǐng)域的經(jīng)典體外模型。印戒細(xì)胞癌(Signet ring cell carcinoma, SRCC)是上皮組織的惡性腫瘤,組織學(xué)外觀特點(diǎn)是可以見到印戒細(xì)胞,因癌細(xì)胞看起來像印章戒指一樣,所以被叫做"印戒細(xì)胞癌"。
| 項(xiàng)目 | 內(nèi)容 |
| 種屬來源 | 人(Homo sapiens) |
| 組織來源 | 胃淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶 |
| 疾病類型 | 低分化腺癌(含印戒細(xì)胞成分) |
| 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
| 生長特性 | 貼壁生長 |
| 細(xì)胞含量 | >1×10?個/mL |
| 規(guī)格 | 1 mL凍存管包裝 |
細(xì)胞特征
NUGC-4細(xì)胞具有獨(dú)特的IL-1α非表達(dá)特征,這是彌漫型胃癌的標(biāo)志性分子表型之一。該細(xì)胞系同時存在E-鈣粘蛋白(E-cadherin)基因啟動子區(qū)甲基化修飾,導(dǎo)致細(xì)胞間粘附能力下降,與其高侵襲性表型密切相關(guān)。
二、CellFactory NUGC-4細(xì)胞培養(yǎng)方法
1. 培養(yǎng)前準(zhǔn)備
| 項(xiàng)目 | 推薦條件 |
| 培養(yǎng)器具 | 25cm2培養(yǎng)瓶或60mm培養(yǎng)皿(或更小 |
| 培養(yǎng)基 | RPMI 1640 + 10% FBS + 1% P/S |
| 建議用量 | 5 mL(或更少) |
2. 2. 2. 細(xì)胞解凍
將包裝中的凍存管取出后立即放在不高于37℃的水中,并在2分鐘內(nèi)搖晃解凍。
3. 細(xì)胞復(fù)蘇
CellFactory標(biāo)準(zhǔn)復(fù)蘇流程:
(1)取10mL培養(yǎng)基置于離心管中,用70%酒精消毒凍存管外壁
(2)擰開管蓋后,將細(xì)胞懸浮液轉(zhuǎn)移到離心管中
(3)1000 rpm離心3分鐘,棄掉上清液
(4)將細(xì)胞重新懸浮在5mL培養(yǎng)基中(不清洗細(xì)胞)
(5)在25cm2的培養(yǎng)瓶或60mm的培養(yǎng)皿中進(jìn)行培養(yǎng)
注意:請勿直接復(fù)蘇到T75cm2瓶或10cm的皿。
4. 細(xì)胞傳代
在傳代之前,確保細(xì)胞增殖良好
細(xì)胞長至80%-90%匯合度即可傳代
過度稀釋可能導(dǎo)致細(xì)胞死亡,建議第一次按1:3比例傳代
5. 細(xì)胞凍存
待NUGC-4細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,盡早進(jìn)行細(xì)胞凍存
(1)凍存液:90% FBS + 10% DMSO
(2)細(xì)胞密度:1×10?-1×10?個細(xì)胞/mL
(3)程序降溫后轉(zhuǎn)移至液氮長期保存
三、CellFactory NUGC-4細(xì)胞應(yīng)用領(lǐng)域
1. 胃癌發(fā)病機(jī)制研究
(1)印戒細(xì)胞癌的分子病理機(jī)制
(2)IL-1α非依賴性炎癥信號通路
(3)E-鈣粘蛋白甲基化與腫瘤侵襲
2. 腫瘤轉(zhuǎn)移研究
(1)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移特性
(2)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)機(jī)制
(3)細(xì)胞間粘附與遷移能力
3. 藥物篩選
(1)化療藥物敏感性評價
(2)靶向藥物篩選
(3)抗轉(zhuǎn)移藥物開發(fā)
四、注意事項(xiàng)
1. 收到細(xì)胞后首先觀察凍存管是否完好,若有問題請及時和我們聯(lián)系
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清使用比例等細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)問題,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件正確
3. 請用相同條件的培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),保持實(shí)驗(yàn)條件一致性
4. 細(xì)胞培養(yǎng)過程中,注意保持無菌操作
5. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)
6. 由于實(shí)驗(yàn)所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,上述細(xì)胞培養(yǎng)方法僅供參考
7. 細(xì)胞僅供科研使用
五、產(chǎn)品儲存和運(yùn)輸
| 項(xiàng)目 | 條件 |
| 產(chǎn)品儲存 | 凍存細(xì)胞保存在液氮中,用凍存管進(jìn)行保存 |
| 短期保存 | 收到細(xì)胞后如無法立刻復(fù)蘇,可保存于-80℃(不超過24h) |
| 產(chǎn)品運(yùn)輸 | 于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸 |
| 運(yùn)輸條件 | 干冰運(yùn)輸,確保細(xì)胞活性 |
六、CellFactory質(zhì)量保證
| 質(zhì)控項(xiàng)目 | 檢測標(biāo)準(zhǔn) | 結(jié)果 |
| STR鑒定 | 與ATCC、DSMZ、JCRB數(shù)據(jù)庫比對 | 鑒定正確 |
| 支原體檢測 | PCR法 | 陰性 |
| 細(xì)胞活性 | 臺盼藍(lán)拒染法 | >90% |
| 無菌檢測 | 細(xì)菌/真菌培養(yǎng) | 陰性 |
| 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 符合標(biāo)準(zhǔn) |
七、技術(shù)支持
CellFactory(西安禾洋生物科技有限公司)提供完整培養(yǎng)方案、實(shí)驗(yàn)設(shè)計建議、STR鑒定報告
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