全長層粘連蛋白521（LN521）在hPSC培養(yǎng)中的應(yīng)用特性與實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

摘要：全長層粘連蛋白521（LN521）無動(dòng)物源、批次穩(wěn)定，可高效、便捷培養(yǎng) hPSC，相關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)支撐其科研應(yīng)用價(jià)值。

關(guān)鍵詞：LN521,層粘連蛋白,全長層粘連蛋白521,hPSC,人多能干細(xì)胞培養(yǎng),細(xì)胞外基質(zhì),Biolaminin 521

在人多能干細(xì)胞（hPSC）體外培養(yǎng)中，基質(zhì)的選擇直接影響細(xì)胞生長效率、培養(yǎng)穩(wěn)定性及成本控制。全長層粘連蛋白521（Biolaminin 521，簡(jiǎn)稱LN521）是瑞典BioLamina 公司研發(fā)的人源重組基質(zhì)，作為細(xì)胞外基質(zhì)的天然組分，其基于基質(zhì)生物學(xué)研究背景開發(fā)，為hPSC提供生物相關(guān)性高的培養(yǎng)環(huán)境，相關(guān)應(yīng)用價(jià)值已通過實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)充分驗(yàn)證，以下結(jié)合核心實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行討論。

一、LN521的核心特性

1. 無動(dòng)物源、無異種成分，采用重組技術(shù)制備，批次間一致性高，可保障實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化與可重復(fù)性；

2. 為hPSC天然生長環(huán)境中存在的細(xì)胞外基質(zhì)成分，生物相關(guān)性強(qiáng)，能激活細(xì)胞真實(shí)信號(hào)通路，促進(jìn)基因表達(dá)均勻性；

3. 培養(yǎng)體系兼容性強(qiáng)，支持單細(xì)胞傳代且無需添加ROCKi，可實(shí)現(xiàn)周末無需換液，簡(jiǎn)化操作流程；

4. 支持均一且遺傳穩(wěn)定的hPSC培養(yǎng)，無需手動(dòng)去除分化細(xì)胞，減少實(shí)驗(yàn)干預(yù)。

二、LN521用于hPSC培養(yǎng)的關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

（一）成本優(yōu)勢(shì)

1. 單位面積成本：?jiǎn)未蝹鞔?，LN521的基質(zhì)與培養(yǎng)基合計(jì)單位面積成本，低于截短/片段型層粘連蛋白，其涂層濃度僅需0.5微克/平方厘米，用量較低，可有效控制耗材支出；

圖1. LN521和其他包被基質(zhì)結(jié)合培養(yǎng)基在單位面積下平均的單次傳代hPSC培養(yǎng)成本匯算，包被基質(zhì)（深色）和培養(yǎng)基（淺色斜線）的配制成本均根據(jù)市售產(chǎn)品定價(jià)計(jì)算

2. 單位細(xì)胞成本：因細(xì)胞生長速率快、產(chǎn)量高，LN521培養(yǎng)體系的單次傳代單位細(xì)胞成本遠(yuǎn)低于其他對(duì)比基質(zhì)，且無需通過增加培養(yǎng)基用量提升產(chǎn)量，基質(zhì)與培養(yǎng)基成本分配更均衡。

圖2.不同包被基質(zhì)結(jié)合培養(yǎng)基在單次傳代的單位細(xì)胞hPSC的培養(yǎng)成本匯算

（二）擴(kuò)增效率

在HS181人胚胎干細(xì)胞系與iPSC3誘導(dǎo)多能干細(xì)胞系的對(duì)比實(shí)驗(yàn)中（基于5-6次傳代平均值）：

1. 單次傳代擴(kuò)增倍數(shù)明顯高于截短/片段型層粘連蛋白、EHS提取物及玻連蛋白；

圖3. LN521和其他包被基質(zhì)培養(yǎng)HS181和IPSC3單次傳代hPSC擴(kuò)增倍數(shù)統(tǒng)計(jì)

2. 對(duì)生長特性不同的細(xì)胞系適應(yīng)性良好，無論是生長較快的HS181還是生長較慢的iPSC3，均表現(xiàn)出穩(wěn)定的高增殖速率；

3. 接種密度為50,000個(gè)細(xì)胞/平方厘米時(shí)，無需特殊調(diào)整即可達(dá)到良好培養(yǎng)效果，相同時(shí)間內(nèi)可獲得更多細(xì)胞。

三、LN521培養(yǎng)hPSC的應(yīng)用總結(jié)

LN521憑借無動(dòng)物源、成分明確、批次穩(wěn)定的特性，在hPSC培養(yǎng)中實(shí)現(xiàn)了成本控制、擴(kuò)增效率與操作便捷性的均衡。其生物相關(guān)性強(qiáng)的優(yōu)勢(shì)，有助于hPSC適應(yīng)體外培養(yǎng)環(huán)境，維持遺傳穩(wěn)定性與分化潛能，相關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)為其在hPSC基礎(chǔ)研究、藥物篩選及臨床前應(yīng)用探索中的應(yīng)用提供了支撐。上海曼博生物作為BioLamina中國提供商，可為科研人員提供Biolaminin LN521產(chǎn)品支持，助力hPSC培養(yǎng)相關(guān)實(shí)驗(yàn)開展，可查看曼博生物網(wǎng)站咨詢Biolaminin LN521產(chǎn)品信息。

參考資料：Reliable and cost-effective hPSC expansion -Save time and money with the Biolaminin521 cell culture matrix（From BioLamina）

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