OCI-Ly19細(xì)胞操作步驟

OCI-LY19是一種人B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系，源自彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤（DLBCL）患者的外周血單核細(xì)胞。 該細(xì)胞系常用于研究B細(xì)胞惡性腫瘤的分子機(jī)制、藥物敏感性及耐藥性，廣泛應(yīng)用于癌癥生物學(xué)、免疫治療和靶向藥物開發(fā)等領(lǐng)域的研究。 1987年從一個(gè)患有B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）（彌漫性大細(xì)胞淋巴瘤，DLCL，4B期，復(fù)發(fā)時(shí)）的27歲女性的骨髓中建立。

OCI-Ly19細(xì)胞出庫圖：

隨貨提供STR鑒定報(bào)告、支原體陰性檢測報(bào)告以及說明書等
懸浮細(xì)胞接收注意事項(xiàng) ：1.懸浮細(xì)胞經(jīng)過快遞運(yùn)輸，會出現(xiàn)細(xì)胞皺縮和死細(xì)胞碎片等情況，收到時(shí)先放培養(yǎng)箱靜置4小時(shí)以上，2.將瓶內(nèi)全部培養(yǎng)基吸至離心管內(nèi)離心收集，3.使用5-6ml新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞沉淀后接種T25培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

接種后把培養(yǎng)瓶平放顯微鏡下靜置10分鐘后觀察密度和狀態(tài)，拍照反饋到銷售，根據(jù)圖片可以給出接下來的處理建議（傳代或者換液）

懸浮細(xì)胞傳代：
如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。                                        方法一：將細(xì)胞懸液收集到離心管中1000rpm，離心5min，棄去上清，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)液后重懸混勻按1：2的比例分到 新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力。                                                                                 方法二：1) 半換液處理，豎著培養(yǎng)瓶靜置 10-20min 左右，肉眼可見大部分細(xì)胞沉在底部；                                                                                                                              2) 輕輕吸掉 3ml 左右培養(yǎng)基，將剩余細(xì)胞懸起混勻；                                                   3) 將細(xì)胞懸液按 1:2 到 1:3 的比例分到新的含 6-8 mL 培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中或者培養(yǎng)瓶中，一般這樣傳代 3 次左右可以離心傳代一次。                                                                                            注意：使用試劑需要提前37度復(fù)溫，避免細(xì)胞遇冷受刺激皺縮。

后續(xù)處理建議：懸浮細(xì)胞狀態(tài)在無碎片無黑點(diǎn)的情況下無需換液，觀察培養(yǎng)基偏黃及時(shí)進(jìn)行補(bǔ)液2ml左右，當(dāng)細(xì)胞出現(xiàn)分泌物可以使用半換液法處理。