豬流感病毒 (H1     亞 型 ) ELISA 抗體檢測(cè)試劑盒說明書

【獸藥名稱】

通 用 名  豬流感病毒 (H1  亞 型 )ELISA 抗體檢測(cè)試劑盒

商 品 名 無

英 文 名  ELISA  Kit  for  Swine  Influenza  Virus(HI  Subtype)Antibody  Detection 漢語拼音  Zhuliuganbingdu(H1 Yaxing)ELISA Kangtijiance Shijihe

【主要成分與含量】

【作用與用途】  用于檢測(cè) H1  亞型豬流感病毒血清抗體。

【注意事項(xiàng)】

(1)實(shí)驗(yàn)前，將試劑盒所有組分取出置溫箱(25℃±3)回溫至少30分鐘，實(shí)驗(yàn)完成 后放回2～8℃保存。

(2)若試劑盒陰陽性對(duì)照、酶標(biāo)記物出現(xiàn)少量懸浮物，屬正?，F(xiàn)象。 3請(qǐng)?jiān)谠噭┖幸?guī)定的有效期內(nèi)使用；禁止非同批試劑盒混用。

4)沒有用完的抗原包被板應(yīng)貯存在密封塑料袋內(nèi)，于2～8℃存放。

(5)避免底物液暴露于強(qiáng)光，避免接觸氧化劑。

(6)先使用血清稀釋板稀釋完所有的待檢血清，再將稀釋好的血清轉(zhuǎn)移到抗原包被板 上，使反應(yīng)時(shí)間一致。

(7)濃縮洗滌液用蒸餾水或純水稀釋，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶加熱使其溶解后再使用。

(8)嚴(yán)格按照操作程序，仔細(xì)的吸液、計(jì)時(shí)，充分洗滌，對(duì)于獲得精確的結(jié)果是非常 必要的。

【用法與判定】

1  用 法

1.1     樣品準(zhǔn)備  取動(dòng)物全血，待血液凝固后，以4000r/min  離心10分鐘，收集血清； 或待血液凝固后自然析出血清。血清應(yīng)清亮，無溶血。

1.2  洗滌液配制  使用前，將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水或純水作20倍稀釋(例如：

10ml  的濃縮洗滌液加上190ml 純水),混勻。置2～8℃保存，可保存7日。

1.3  待檢血清和對(duì)照的稀釋

1.3.1     待檢血清的稀釋   將待檢血清在血清稀釋板中按1:40稀釋(例如：195 μl 樣 品 稀釋液中加5 μl 待檢血清)

1.3.2 對(duì)照的稀釋  陽性和陰性對(duì)照無需稀釋。

1.4 操作步驟

14.1   取抗原包被板(根據(jù)樣品多少，可拆開分次使用),每孔加入稀釋好的洗滌液 300μì,無需靜置，甩掉板孔中的洗滌液，洗滌1次，在吸水材料上拍干。

1.4.2  將稀釋好的待檢血清和陰、陽性對(duì)照各取100 μl加入到抗原包被板孔中，待檢血 清設(shè)1孔，陰性對(duì)照、陽性對(duì)照各設(shè)2孔，置37℃溫育30分鐘。

1.4.3     甩掉板孔中的液體，每孔加入稀釋好的洗滌液300μl,   無需靜置，甩掉板孔中的

洗滌液，共計(jì)洗滌5次，最后一次在吸水材料上拍干。

1.4.4  每孔加入酶標(biāo)記物100μl, 置37℃溫育30分鐘。

1.4.5 洗滌5次，方法同1.4.3。

1.4.6  每孔加入底物顯色液100μ,置室溫(20～25℃)避光顯色10分鐘。

1.4.7     每孔加入終止液50μl,10     分鐘內(nèi)在酶標(biāo)儀上測(cè)定各孔OD630mm值 。

2  判 定

2.1    成 立 條 件 陽 性 對(duì) 照OD630nm平均值應(yīng)≥0.6;陰性對(duì)照OD?30nm平均值應(yīng)<0:3。

2.2    判 定 標(biāo) 準(zhǔn)S    為 樣 品OD630mm值 ，P 為陽性對(duì)照OD?30mm平均值，計(jì)算S/P   值。

如果S/P≥0.25,        判為陽性；如果S/P<0.25,       則判為陰性。

【規(guī)格】   96 孔/盒或192 孔/盒或480 孔/盒

【貯藏與有效期】2～8℃保存，有效期為12個(gè)月 

僅供科研使用