細(xì)胞莫名爆發(fā)支原體污染，優(yōu)先從 5 個(gè)渠道溯源，實(shí)驗(yàn)室 99% 支原體污染均出自以下場景，本文逐條拆解污染源細(xì)節(jié)。

一、細(xì)胞間交叉污染

引入外源細(xì)胞是高發(fā)污染源：引進(jìn)未檢測的外購細(xì)胞、保藏細(xì)胞，細(xì)胞自帶支原體，共用培養(yǎng)瓶、移液器、廢液盤時(shí)，支原體快速擴(kuò)散至實(shí)驗(yàn)室原有細(xì)胞株，是最常見的跨細(xì)胞污染誘因。

二、實(shí)驗(yàn)操作人員

實(shí)驗(yàn)人員口腔、皮膚是口腔支原體、人型支原體天然宿主，感冒咳嗽、未規(guī)范佩戴口罩手套操作時(shí)，飛沫、手部皮屑掉落培養(yǎng)體系，直接造成細(xì)胞污染，也是日常隱性污染主要來源。

三、實(shí)驗(yàn)耗材與超凈臺(tái)環(huán)境污染

支原體可在超凈臺(tái)臺(tái)面、移液器槍頭盒、細(xì)胞計(jì)數(shù)板、廢液盤長期存活，污染細(xì)胞后的操作臺(tái)，放置新培養(yǎng)瓶極易二次污染；超凈臺(tái)雜物堆放過多，氣流紊亂、過濾效率下降，提升環(huán)境染菌概率。

四、培養(yǎng)基、血清、胰酶等原料污染

l 胎牛 / 新生牛血清攜帶精氨酸支原體、萊氏無膽甾支原體（牛源）；

l 豬源胰酶原材料易混入豬鼻支原體； 未做原料抽檢直接配制培養(yǎng)液，會(huì)造成整批次培養(yǎng)基帶菌。

五、滅菌操作不當(dāng)導(dǎo)致耗材帶菌

高壓滅菌失誤：滅菌鍋內(nèi)耗材堆積過密、受熱不均，部分培養(yǎng)瓶、離心管滅菌不徹-底；滅菌程序時(shí)間設(shè)置太短，耗材殘留活支原體，投入使用后污染細(xì)胞。

總結(jié)

支原體污染防控優(yōu)先管控：新細(xì)胞、新試劑入庫抽檢 + 人員規(guī)范無菌操作 + 定期環(huán)境消殺，從源頭切斷五大污染路徑。

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