產品概述

本品為艾美捷Bethyl Laboratories推出的針對KIF20A（又稱RAB6KIFL、MKLP2）的兔多克隆抗體，貨號A300-879A。該抗體特異性識別人源KIF20A蛋白，適用于免疫沉淀（IP）和蛋白質印跡（WB）檢測?？贵w經抗原親和純化，濃度為1000 µg/ml，為有絲分裂調控及高爾基體運輸研究提供了高特異性的檢測工具。

核心規(guī)格參數(shù)

項目 | 詳細信息

靶點 | KIF20A / RAB6KIFL

反應性 | 人

應用 | IP, WB

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

形式 | 完整IgG

免疫原 | 第840位至C末端（第890位）區(qū)域

亞型 | IgG

偶聯(lián)物 | 非偶聯(lián)

純度 | 抗原親和純化

抗原物種 | 人

濃度 | 1000 µg/ml

保存條件 | 2 - 8 °C

有效期 | 收貨之日起1年

緩沖液 | Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液，pH 7-8，含0.09%疊d化鈉

應用方法與推薦稀釋度

蛋白質印跡（WB）

所有WB實驗使用含5%脫脂牛奶的TBST作為封閉液及抗體稀釋液。一抗孵育條件為過夜孵育。

細胞裂解液WB：使用山羊抗兔IgG重鏈和輕鏈抗體（貨號A120-101P）作為二抗。

免疫沉淀產物WB：使用抗兔IgG輕鏈HRP偶聯(lián)抗體，封閉液中需添加5%正常豬血清（貨號S100-020）以降低輕鏈非特異性信號。

推薦稀釋度：1:2000 - 1:10,000

免疫沉淀（IP）

推薦用量：6 µg 抗體 / mg 細胞裂解液

操作要點：

1. 將6 µg抗體與含1 mg蛋白的細胞裂解液混合

2. 4°C孵育1-2小時或過夜

3. 加入蛋白A/G瓊脂糖珠，繼續(xù)孵育1-2小時

4. 充分洗滌沉淀復合物（建議4-5次）

5. 使用SDS上樣緩沖液洗脫，煮沸變性后進行WB檢測

產品背景信息

驅動蛋白超家族概述

驅動蛋白超家族包含超過40種KIF馬達蛋白，其主要功能是沿微管進行細胞內運輸。驅動蛋白活性與多種細胞功能密切相關，包括：

囊泡運輸

有絲分裂紡錘體形成

染色體分離

染色體排列（congression）

胞質分裂

結構上，所有驅動蛋白均含有一個馬達結構域，該結構域具有微管結合位點和核苷酸結合位點，利用ATP水解產生的能量將貨物沿微管定向運輸。

KIF20A/RAB6KIFL的功能

KIF20A（又稱RAB6KIFL、MKLP2）在細胞內發(fā)揮雙重功能：

1. 高爾基體內運輸：通過與Rab6小GTP酶相互作用，參與高爾基體內的囊泡運輸。這一功能對于維持高爾基體的結構和分泌途徑的正常運作至關重要。

2. 有絲分裂與胞質分裂：在有絲分裂后期，KIF20A定位于紡錘體；在末期，其定位于卵裂溝（cleavage furrow）和中體（midbody）。研究表明，KIF20A在胞質分裂過程中發(fā)揮關鍵作用，參與中央紡錘體形成和收縮環(huán)的組裝。

臨床研究價值

KIF20A在多種人類癌癥中呈現(xiàn)過表達，包括胰腺癌、肝癌、乳腺癌和肺癌，其高表達通常與不良預后相關。因此，KIF20A被認為是潛在的腫瘤標志物和抗有絲分裂藥物靶點。高特異性的KIF20A抗體對于以下研究至關重要：

有絲分裂和胞質分裂的分子機制解析

高爾基體運輸與細胞周期調控的交叉對話研究

腫瘤組織中KIF20A表達水平的定量檢測

抗有絲分裂藥物（如紫杉醇）作用機制及耐藥性研究

儲存與穩(wěn)定性注意事項

1. 保存溫度：2-8°C，請勿冷凍。反復凍融會導致抗體變性及活性損失。

2. 有效期：收貨之日起1年內穩(wěn)定。

3. 防腐劑：緩沖液中含有0.09%疊d化鈉，使用時應遵守實驗室安全規(guī)范。

4. 分裝建議：由于抗體濃度為1000 µg/ml，可根據實驗頻率分裝成小份（如20-50 µl/管），仍保存于2-8°C，避免反復取用導致的污染風險。

功能性優(yōu)勢總結

1. 超高濃度（1000 µg/ml）：提供充足的抗體總量，適合大規(guī)?；蜷L期系列實驗；高濃度有利于IP實驗中高效捕獲低豐度或有絲分裂期特異性表達的KIF20A。

2. C末端靶向表位（840-890）：該區(qū)域為KIF20A特y的C端尾部，與Rab6結合及貨物識別相關；抗體特異性識別該區(qū)域可避免與驅動蛋白家族其他成員（如KIF23、KIF14）的交叉反應。

3. 寬WB稀釋范圍（1:2000-1:10,000）：提供極大實驗靈活性，可根據不同細胞系或細胞周期階段KIF20A的表達水平優(yōu)化信噪比。

4. 親和純化+高純度：抗原親和純化確?？贵w特異性，降低WB背景和IP非特異性沉淀。

5. IP-WB一體化方案：配套抗輕鏈HRP二抗及豬血清封閉建議，有效消除沉淀中重鏈干擾，便于檢測KIF20A與Rab6或其他中體蛋白的共沉淀。