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上海諾寧生物科技有限公司成立于2011年，是集研發(fā)銷售為一體的綜合性公司。公司不僅有代理的國內(nèi)外品牌的產(chǎn)品，還有自主品牌“NoninBio”的產(chǎn)品，產(chǎn)品涉及試劑、耗材、儀器，涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學、信號傳導和神經(jīng)科學等領域，可以為客戶提供全面的解決方案。
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EZ poly™mRNA轉染試劑產(chǎn)品參數(shù)
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
EZ poly™mRNA轉染試劑詳細信息
EZ poly™mRNA轉染試劑
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝規(guī)格 |
NBS2052-0.5ml | EZ poly™mRNA轉染試劑 | 0.5ml |
NBS2052-1ml | EZ poly™mRNA轉染試劑 | 1ml |
NBS2052-5ml | EZ poly™mRNA轉染試劑 | 5x1ml |
產(chǎn)品簡介:
EZ poly™mRNA轉染試劑是一款高性能的mRNA專用轉染試劑，可用于mRNA在多種貼壁細胞中的傳送?？芍苯訉?span style="box-sizing: border-box; appearance: none; -webkit-tap-highlight-color: rgba(0, 0, 0, 0); padding: 0px; margin: 0px;">mRNA傳遞到細胞質(zhì)中進行表達，避免了轉錄調(diào)控作用及進入細胞核的限制。可被應用在短期蛋白表達的相關研究工作中。
應用范圍:
EZ poly™mRNA轉染試劑可適用于眾多貼壁或懸浮細胞株的mRNA轉染。在各種常規(guī)、難轉、原代細胞及干細胞中均可得到較高的轉染效率，且性能穩(wěn)定。與其它轉染試劑相比，具有不受血清影響、毒性低、穩(wěn)定性好、轉染簡單易行、重復性好等優(yōu)點。
保存條件:
2-8℃保存一年
運輸：
常溫運輸
mRNA的轉染:
以24孔板為例，請參考表1的轉染規(guī)模調(diào)整，步驟如下:
1 | 細胞接種: 每孔接種0 . 5 ~ 1 . 0 × 105 個細胞，細胞培養(yǎng) 12~24小時，使轉染時細胞密度達到60~70%融合度 |
2 | mRNA稀釋: 將0.4 µg的mRNA稀釋于無RNA酶的DEPC水中，終體積10 µL |
3 | 復合物制備: 按比例取適量EZ poly™mRNA轉染試劑稀釋于無RNA酶的DEPC水中，終體積10 µL，室溫孵育5分鐘后與mRNA稀釋液混勻 |
4 | 室溫靜止20分鐘 |
5 | 每孔20 µL復合物加入細胞培養(yǎng)板中，混勻，37℃培養(yǎng)18~48小時后檢測基因表達，無需更換培養(yǎng)基 |
mRNA的轉染優(yōu)化:
可通過改變細胞密度、mRNA濃度以及EZ poly™mRNA轉染試劑濃度對轉染進行優(yōu)化。保證細胞融合度在60%以上，EZ poly™mRNA轉染試劑(µL): mRNA (µg)可以在1:1和5:1之間調(diào)整。轉染步驟與DNA相同，請參考表1的轉染規(guī)模進行調(diào)整，所有數(shù)量和體積均是按孔計算。轉染高密度細胞可獲得高轉染效率、高表達水平和低細胞毒性。
表1. 不同培養(yǎng)板所需轉染試劑和mRNA的用量
培養(yǎng)板 | 單孔面積 | 接種 培養(yǎng)基 | DEPC水 稀釋后終體積 | mRNA轉染 | |
試劑用量 | mRNA | ||||
96孔板 | 0.3cm2 | 200µL | 2×5µL | 0.4µL | 0.2µg |
24孔板 | 2.0cm2 | 500µL | 2×10µL | 0.8µL | 0.4µg |
12孔板 | 4.0cm2 | 1mL | 2×20µL | 1.6µL | 0.8µg |
6孔板 | 10.0cm2 | 2mL | 2×50µL | 2.0µL | 1.0µg |
60mm | 20.0cm2 | 5mL | 2×0.1mL | 8.0µL | 4.0µg |
100mm | 60.0cm2 | 15mL | 2×0.3mL | 24µL | 12µg |
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