如何正確使用和保養(yǎng)Topsil色譜柱
Topsil系列色譜柱的基礎特性,它的使用和保養(yǎng)可參考以下規(guī)范操作,能有效延長柱子使用壽命、保障分離穩(wěn)定性。
一、正確使用要點
適配體系確認
Topsil系列色譜柱該系列pH適用范圍為2.0-8.0,不可超出該區(qū)間使用,避免破壞硅膠基質;首次使用前需用甲醇或乙腈以低流速沖洗20-30個柱體積完成活化,活化階段不接檢測器,減少污染風險。
樣品前處理要求
所有進樣樣品需經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾,復雜基質樣品(生物樣、中藥提取液等)建議搭配同填料的保護柱,避免不溶物、強吸附雜質堵塞柱頭。
操作細節(jié)規(guī)范
控制工作壓力不超過色譜柱最大耐壓的70%,避免壓力驟變、劇烈震動;更換流動相時需保證溶劑互溶,含緩沖鹽的體系要提前做好過渡沖洗,防止鹽結晶析出。
二、日常保養(yǎng)方法
使用后清洗流程
含緩沖鹽的體系,使用后先以10%甲醇水溶液沖洗30分鐘除鹽,再切換高比例有機相沖洗20個柱體積;普通體系直接用高比例有機相沖洗殘留雜質即可。
污染針對性處理
柱頭堵塞、柱壓升高時,可小心取出柱頭1-2mm被污染的填料,補入同類型新填料整平;強吸附雜質殘留時,可選用異丙醇梯度洗脫完成深度清潔。
長期存儲規(guī)范
清洗完成后,將柱內(nèi)充滿純甲醇或乙腈,擰緊兩端密封堵頭,放置在15-25℃的干燥避光環(huán)境保存,禁止將緩沖鹽留在柱內(nèi)長期靜置。
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