實驗室微生物培養(yǎng)過程中避免雜菌污染的方法有哪些?
百歐博偉生物:實驗室能直接落地的無菌操作體系,按源頭→操作→環(huán)境→監(jiān)控四步走,基本能把雜菌污染壓到極低。
一、從源頭杜絕:培養(yǎng)基與器材滅菌
1、培養(yǎng)基
必須高壓蒸汽滅菌(121℃,15–20 min)
滅菌后盡快使用,不長期存放
配好后先做空白培養(yǎng)(37℃ 24–48 h 不長菌才算合格)
2、玻璃器皿/耗材
槍頭、培養(yǎng)皿、離心管等一次性無菌包裝優(yōu)先
玻璃器皿干熱滅菌(160℃,2h)或高壓滅菌
不混用開封太久
二、操作過程:無菌操作是核心
1、只在超凈臺/無菌室操作
操作前開紫外燈 20–30 min,再開風(fēng)機(jī) 5–10 min
臺面用 75% 酒精 擦拭
2、手部與著裝
洗手 → 75% 酒精消毒手
穿實驗服、戴手套、口罩
不捋頭發(fā)、不交談、不隨意走動
3、接種/開蓋規(guī)范
試管/三角瓶開口快速過酒精燈火焰
蓋子不要離開無菌區(qū)
培養(yǎng)皿只開一條縫,不全掀開
槍頭一次性使用,絕不重復(fù)蘸取
4、菌種本身
用純化后的單菌落接種
不使用已懷疑污染的菌種
菌種低溫甘油管分裝保存,減少反復(fù)凍融與開口
三、環(huán)境控制:減少環(huán)境菌
1、培養(yǎng)箱定期清潔、消毒
室溫、水浴鍋、冰箱定期擦拭消毒
2、廢棄物及時高壓滅菌再丟棄
不在培養(yǎng)室吃東西、喝水、堆放雜物
四、培養(yǎng)與觀察:早發(fā)現(xiàn)早止損
培養(yǎng)時每天觀察:渾濁、異味、菌落異常
保留空白對照平板,每批必做
一旦污染:立即丟棄,不強(qiáng)行搶救
五、極簡總結(jié)(記這幾句就夠)
器材培養(yǎng)基:滅透、驗無菌
操作:火焰封口、少開口、少說話
環(huán)境:干凈、定期消毒
監(jiān)控:空白對照 + 每日觀察
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