NanoTemper MST分子互作檢測成套體系技術(shù)

一、成套體系概述

本套NanoTemper MST微量熱泳動分子互作檢測系統(tǒng)配套體系由二代RED-NHS蛋白熒光標(biāo)記試劑盒（MO-L011）與Premium抗吸附專用毛細(xì)管（MO-K025）組成，為MST分子親和力檢測的標(biāo)準(zhǔn)成套組合。整套體系實現(xiàn)蛋白熒光標(biāo)記、樣品純化、抗吸附上樣、儀器檢測全流程標(biāo)準(zhǔn)化，解決傳統(tǒng)實驗中標(biāo)記不穩(wěn)定、背景噪音高、蛋白管壁吸附、數(shù)據(jù)重復(fù)性差、弱結(jié)合靶點無信號等行業(yè)痛點。廣泛應(yīng)用于藥物靶點親和力篩選、蛋白-小分子、蛋白-抗體、蛋白-多肽、膜蛋白互作、PROTAC分子評價等生命科學(xué)研究與創(chuàng)新藥物研發(fā)領(lǐng)域。

整套配套設(shè)備儀器類型：MicroScale Thermophoresis (MST) Molecular Interaction Analyzer（Monolith / Dianthus全系紅光機(jī)型）

二、成套組成清單及品類界定

本成套系統(tǒng)包含兩大核心組件，品類區(qū)分明確，分別對應(yīng)生化試劑與儀器專用耗材：

1. MO-L011 RED-NHS 2nd Generation 蛋白熒光標(biāo)記試劑盒

品類：生化試劑 / 標(biāo)記試劑盒

貨號：MO-L011

用途：蛋白賴氨酸位點共價熒光標(biāo)記、為MST檢測提供穩(wěn)定熒光信號源，屬于實驗反應(yīng)核心試劑。

2. MO-K025 Monolith Premium Capillaries

品類：儀器一次性耗材

貨號：MO-K025（200支/盒）

用途：MST上機(jī)檢測專用樣品承載毛細(xì)管，高分子抗吸附涂層，消除非特異性吸附，保障數(shù)據(jù)基線穩(wěn)定。

三、MO-L011試劑盒核心技術(shù)參數(shù)與原理

1. 產(chǎn)品基礎(chǔ)參數(shù)

• 染料體系：第二代 NT-647 RED-NHS 活化熒光染料（紅光通道）

• 激發(fā)/發(fā)射波長：650 nm / 670 nm

• 適配蛋白：≥5 kDa，濃度 2–20 μM

• 反應(yīng)次數(shù)：4次獨立微量標(biāo)記

• 標(biāo)記方式：NHS-酯與蛋白賴氨酸伯氨基共價偶聯(lián)

• 標(biāo)記時長：30 min；全程實驗≤60 min（含純化）

• 標(biāo)記度DOL：0.5–1.2

2. 技術(shù)原理

二代NT-647染料帶有琥珀酰亞胺活性酯（NHS-Ester），在弱堿性無氨基緩沖體系中與蛋白表面賴氨酸殘基發(fā)生特異性共價結(jié)合，形成穩(wěn)定酰胺鍵。標(biāo)記條件溫和、不破壞蛋白構(gòu)象與結(jié)合活性，熒光標(biāo)記不可逆、無脫落，可滿足長時間多點梯度MST檢測。

3. 二代產(chǎn)品核心升級優(yōu)勢

• 熒光量子產(chǎn)率提升35%，信噪比顯著提高

• 大幅改善弱親和力（μM~mM）靶點信號振幅

• 降低染料非特異性吸附，基線平穩(wěn)無漂移

• 標(biāo)記均一性更強(qiáng)，批次重復(fù)性偏差＜10%

• 蛋白回收率穩(wěn)定60%–90%，適合微量珍貴樣品

四、MO-K025 Premium毛細(xì)管核心技術(shù)參數(shù)與優(yōu)勢

1. 產(chǎn)品參數(shù)

• 規(guī)格：200支/盒，一次性硼硅玻璃毛細(xì)管

• 單支上樣體積：4–5 μL

• 內(nèi)壁工藝：共價接枝中性高分子刷抗吸附涂層

• 適配機(jī)型：Monolith NT.115、Pico、Monolith X、Dianthus全系紅光設(shè)備

2. 核心技術(shù)價值

Premium毛細(xì)管采用化學(xué)鍵合親水涂層，屏蔽玻璃管壁負(fù)電荷，從根源解決蛋白、抗體、疏水多肽、膜蛋白、PROTAC小分子的非特異性吸附問題。相比普通Standard毛細(xì)管，可有效避免基線下降、曲線畸變、KD擬合偏差等常見實驗問題，是高精度、弱結(jié)合、難測體系的必配耗材。

五、整套實驗體系工作流程（標(biāo)準(zhǔn)化SOP）

第一步：蛋白樣品準(zhǔn)備（無Tris、無甘氨酸、無高濃度咪唑）

第二步：MO-L011系統(tǒng)熒光標(biāo)記（染料:蛋白=3:1，避光30 min）

第三步：試劑盒自帶脫鹽柱純化去除游離染料，獲得純標(biāo)記蛋白

第四步：DOL標(biāo)記度質(zhì)控，篩選合格標(biāo)記樣品

第五步：MO-K025 Premium毛細(xì)管上機(jī)，避免吸附干擾

第六步：MST梯度檢測與KD擬合分析

六、成套體系技術(shù)優(yōu)勢（整體協(xié)同優(yōu)勢）

• 光學(xué)匹配：NT-647染料光譜與儀器紅光檢測通道原廠校準(zhǔn)，無串色、無雜峰

• 標(biāo)記+抗吸附閉環(huán)：試劑盒保證標(biāo)記質(zhì)量，Premium毛細(xì)管保證上機(jī)穩(wěn)定性，成套解決95%以上MST實驗失敗問題

• 適配疑難靶點：膜蛋白、疏水蛋白、弱結(jié)合小分子、多肽、抗體均可穩(wěn)定檢測

• 數(shù)據(jù)精度高：擬合R2普遍＞0.98，批次重復(fù)性佳

• 實驗效率高：1小時完成標(biāo)記純化，當(dāng)天出KD數(shù)據(jù)

• 體系標(biāo)準(zhǔn)化可溯源：全部為NanoTemper原廠標(biāo)準(zhǔn)配套，符合藥物研發(fā)、SCI論文數(shù)據(jù)規(guī)范

七、適用研究場景

• 小分子藥物靶點親和力篩選與KD定量

• 抗體/抗原結(jié)合驗證、親和力排序、競爭結(jié)合實驗

• 蛋白-蛋白、蛋白-多肽相互作用研究

• 膜蛋白、GPCR、離子通道體外互作分析

• PROTAC、脂溶性藥物、弱親和力體系研究

• 復(fù)雜基質(zhì)（細(xì)胞裂解液、血清）分子互作檢測

八、成套設(shè)備儀器標(biāo)準(zhǔn)填寫信息（可直接用于申報）

Instrument Type：MicroScale Thermophoresis (MST) Molecular Interaction Analyzer

配套試劑：NanoTemper MO-L011 RED-NHS 2nd Generation 蛋白熒光標(biāo)記試劑盒

配套耗材：NanoTemper MO-K025 Premium Capillaries（200 count）

九、供貨

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