代次低，活力強！JM-1細胞，技術(shù)全程指導(dǎo)人B淋巴母細胞瘤細胞

產(chǎn)品名稱：JM-1細胞

中文名稱：人B淋巴母細胞瘤細胞

組織來源：血

疾病：淋巴瘤;B 細胞

傳代比例/細胞消化：1:2傳代

培養(yǎng)基配置：IMDM 培養(yǎng)基；20%胎牛血清（推薦胎牛血清PRO HN -FBS -500)；0.05 mM β-mercaptoethanol；1%雙抗

背景：是一種前B淋巴母細胞，是從B細胞淋巴瘤患者的血液中分離出來的。可用于免疫學(xué)研究。

形態(tài)：淋巴母細胞樣

生長特征：懸浮生長

倍增時間：每周 2-3次

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

凍存條件：凍存液：90%FBS，DMSO 10%,

或使用非程序凍存液：貨號：H-W-50/100

保藏機構(gòu)：ATCC; CRL-10423

備注：該細胞為懸浮細胞，請注意離心收集細胞懸液，請勿直接倒掉細胞培養(yǎng)液。

懸浮細胞注意事項：

1. 懸浮細胞經(jīng)過快遞運輸，會出現(xiàn)細胞皺縮和死細胞碎片等情況，收到時先放培養(yǎng)箱靜置4小時以上，2.將瓶內(nèi)全部培養(yǎng)基吸至離心管內(nèi)離心收集，3.使用5-6ml新鮮培養(yǎng)基重懸細胞沉淀后接種T25培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

懸浮細胞傳代：
如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。                                        方法一：將細胞懸液收集到離心管中1000rpm，離心5min，棄去上清，補加新鮮培養(yǎng)液后重懸混勻按1：2的比例分到 新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力。                                                                                 方法二：1) 半換液處理，豎著培養(yǎng)瓶靜置 1小時 左右，肉眼可見大部分細胞沉在底部；                                                                                                                              2) 輕輕吸掉 3ml 左右培養(yǎng)基，將剩余細胞懸起混勻；                                                   3) 將細胞懸液按 1:2 到 1:3 的比例分到新的含 6-8 mL 培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中或者培養(yǎng)瓶中，一般這樣傳代 3 次左右可以離心傳代一次。                                                                                            注意：使用試劑需要提前37度復(fù)溫，避免細胞遇冷受刺激皺縮。

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所有的懸浮細胞培養(yǎng)方法注意要點：

第一：維持細胞正常增值速度范圍，比如大多數(shù)懸浮細胞增值范圍是30-50萬個細胞/ml 的密度。

第二：提供優(yōu)秀的培養(yǎng)環(huán)境，包含所使用的培養(yǎng)基 血清，溫度，濕度等。

第三：有很多種懸浮細胞生長需要細胞之間有信號傳遞，因此需要相對聚集在一起則會生長的快，全部分散開了 可能就不長了，但是這個聚集在一起有一定的前提就是不能全部成團了 出現(xiàn)細胞團塊內(nèi)部 營養(yǎng)吸收和氣體交換不通暢也會凋亡。