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高內(nèi)涵成像在免疫細(xì)胞功能評(píng)估中的前沿進(jìn)展與挑戰(zhàn)
免疫細(xì)胞功能評(píng)估是腫瘤免疫、自身免疫疾病、抗感染藥物研發(fā)、細(xì)胞治療篩選等領(lǐng)域的核心實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)。傳統(tǒng)檢測(cè)手段各有局限：流式細(xì)胞術(shù)可批量獲取細(xì)胞分子標(biāo)記信號(hào)，但丟失細(xì)胞形態(tài)、空間位置與細(xì)胞間相互作用信息；普通熒光顯微鏡僅能小樣本靜態(tài)拍攝，難以適配高通量藥物篩選；組織切片免疫組化僅捕捉固定時(shí)點(diǎn)靜態(tài)表型，無(wú)法追蹤免疫細(xì)胞動(dòng)態(tài)活化、殺傷、遷移全過(guò)程。
高內(nèi)涵成像融合自動(dòng)化顯微成像、多通道熒光檢測(cè)、時(shí)序活細(xì)胞觀測(cè)與定量圖像分析技術(shù)，可在單細(xì)胞維度同步采集細(xì)胞形態(tài)、多重蛋白標(biāo)志物、空間排布、動(dòng)態(tài)行為等多維度數(shù)據(jù)，逐步成為免疫細(xì)胞功能評(píng)估的主流工具。隨著三維類器官、微流控共培養(yǎng)、CAR-T體外藥效篩選等模型普及，行業(yè)對(duì)高內(nèi)涵設(shè)備的活細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間成像、多標(biāo)記同步檢測(cè)、三維結(jié)構(gòu)解析、自動(dòng)化批量處理能力提出更多需求。本文結(jié)合行業(yè)技術(shù)發(fā)展趨勢(shì)，以橫河電機(jī)（中國(guó)）有限公司相關(guān)設(shè)備落地應(yīng)用為實(shí)例，梳理該技術(shù)在免疫細(xì)胞研究中的應(yīng)用進(jìn)展，同時(shí)梳理現(xiàn)階段行業(yè)普遍存在的技術(shù)、數(shù)據(jù)分析、落地轉(zhuǎn)化層面的現(xiàn)實(shí)挑戰(zhàn)。
一、高內(nèi)涵成像用于免疫細(xì)胞功能評(píng)估的前沿應(yīng)用進(jìn)展
（一）單細(xì)胞動(dòng)態(tài)功能實(shí)時(shí)觀測(cè)，解析免疫活化與殺傷動(dòng)力學(xué)
免疫細(xì)胞的激活、趨化、免疫突觸形成、焦亡、腫瘤殺傷均屬于動(dòng)態(tài)過(guò)程，靜態(tài)終點(diǎn)檢測(cè)容易遺漏中間關(guān)鍵信號(hào)變化。高內(nèi)涵延時(shí)成像可在維持穩(wěn)定溫度、二氧化碳、濕度的培養(yǎng)環(huán)境下，持續(xù)數(shù)小時(shí)至數(shù)天連續(xù)采集圖像，量化動(dòng)態(tài)功能指標(biāo)。
現(xiàn)有研究中，該技術(shù)常用于記錄T細(xì)胞、NK細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞共培養(yǎng)全過(guò)程：追蹤免疫細(xì)胞遷移速率、細(xì)胞接觸時(shí)長(zhǎng)、免疫突觸骨架蛋白重排、靶細(xì)胞凋亡比例動(dòng)態(tài)變化；定量炎癥小體ASC斑點(diǎn)形成、caspase活化等焦亡特征結(jié)構(gòu)，區(qū)分細(xì)胞凋亡與焦亡兩種不同死亡通路。相比流式需要分時(shí)間點(diǎn)裂解取樣，高內(nèi)涵可在同一孔位持續(xù)追蹤同一群細(xì)胞的時(shí)序變化，減少樣本間誤差。
橫河電機(jī)（中國(guó)）引入的CellVoyager系列高內(nèi)涵平臺(tái)依托雙轉(zhuǎn)盤共聚焦光學(xué)結(jié)構(gòu)，降低長(zhǎng)時(shí)間活細(xì)胞成像的光漂白與光損傷，適配免疫細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間動(dòng)態(tài)觀測(cè)場(chǎng)景。國(guó)內(nèi)多家藥企與高校實(shí)驗(yàn)室借助該設(shè)備開展CAR-T體外殺傷實(shí)驗(yàn)，同步采集細(xì)胞核、腫瘤凋亡標(biāo)記、T細(xì)胞表面抑制性受體多通道熒光信號(hào)，輸出單位時(shí)間殺傷效率、免疫細(xì)胞聚集數(shù)量、細(xì)胞間接觸距離等量化參數(shù)，用于候選抗體與細(xì)胞制劑的體外藥效分級(jí)篩選。
（二）多標(biāo)記空間共定位分析，區(qū)分免疫細(xì)胞亞群與微環(huán)境交互
免疫微環(huán)境中存在多種免疫細(xì)胞混雜分布，不同細(xì)胞亞群的空間位置直接關(guān)聯(lián)功能強(qiáng)弱，如腫瘤浸潤(rùn)C(jī)D8+T細(xì)胞、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的排布模式，是免疫檢查點(diǎn)藥物響應(yīng)的重要參考依據(jù)。高內(nèi)涵多通道熒光成像可單次實(shí)驗(yàn)搭載多種熒光基團(tuán)，結(jié)合圖像分割算法識(shí)別細(xì)胞個(gè)體，統(tǒng)計(jì)各標(biāo)志物表達(dá)強(qiáng)度、蛋白共定位系數(shù)，區(qū)分功能分化、耗竭、活化狀態(tài)的免疫細(xì)胞亞群。
針對(duì)外周血單核細(xì)胞、腫瘤組織解離細(xì)胞、三維腫瘤球共培養(yǎng)體系，設(shè)備可完成數(shù)十項(xiàng)特征參數(shù)提?。杭?xì)胞大小、細(xì)胞核形態(tài)、膜表面PD-1/LAG-3等檢查點(diǎn)分子表達(dá)、胞內(nèi)細(xì)胞因子熒光強(qiáng)度、細(xì)胞間空間距離、免疫細(xì)胞浸潤(rùn)深度等空間指標(biāo)，構(gòu)建多維免疫功能評(píng)價(jià)體系。
配套CellPathfinder分析軟件支持自定義免疫分析算法模板，針對(duì)巨噬細(xì)胞極化、T細(xì)胞耗竭、樹突狀細(xì)胞抗原呈遞等實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景預(yù)設(shè)分割邏輯，可自動(dòng)區(qū)分M1/M2型巨噬細(xì)胞，量化樹突狀細(xì)胞與T細(xì)胞結(jié)合比例，降低人工圖像判讀帶來(lái)的數(shù)據(jù)偏差；系統(tǒng)開放數(shù)據(jù)接口，可將批量免疫表型數(shù)據(jù)導(dǎo)出至統(tǒng)計(jì)軟件開展關(guān)聯(lián)分析，支撐候選藥物作用機(jī)制研究。
（三）三維細(xì)胞模型適配，還原體內(nèi)免疫微環(huán)境真實(shí)狀態(tài)
傳統(tǒng)二維平板共培養(yǎng)簡(jiǎn)化體內(nèi)生理結(jié)構(gòu)，免疫細(xì)胞遷移、浸潤(rùn)行為與真實(shí)組織存在差異。三維腫瘤球、類器官、膠原凝膠共培養(yǎng)模型逐步普及，但三維結(jié)構(gòu)多層遮擋、信號(hào)不均，對(duì)成像系統(tǒng)光學(xué)分辨率、Z軸層掃能力提出更高要求。
高內(nèi)涵成像可執(zhí)行多層Z-stack序列掃描，通過(guò)軟件完成三維重構(gòu)，定量免疫細(xì)胞穿透腫瘤球外層基質(zhì)、浸潤(rùn)內(nèi)部核心區(qū)域的比例，評(píng)估免疫細(xì)胞浸潤(rùn)能力；同時(shí)捕捉三維空間內(nèi)免疫細(xì)胞聚集、局部細(xì)胞因子釋放引發(fā)的局部熒光信號(hào)變化，更貼近體內(nèi)免疫應(yīng)答過(guò)程。
橫河電機(jī)相關(guān)設(shè)備搭載多層Z軸自動(dòng)對(duì)焦與sCMOS高靈敏度相機(jī)，針對(duì)三維免疫模型優(yōu)化層掃間隔與曝光參數(shù)，減少深層組織熒光信號(hào)衰減問(wèn)題。國(guó)內(nèi)多家CRO機(jī)構(gòu)利用該平臺(tái)開展免疫調(diào)節(jié)劑篩選，對(duì)比不同化合物處理后免疫細(xì)胞三維浸潤(rùn)水平，為體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)提供前期體外數(shù)據(jù)支撐。
（四）高通量自動(dòng)化篩選，適配大規(guī)模免疫藥物研發(fā)管線
免疫檢查點(diǎn)抑制劑、細(xì)胞治療、小分子免疫調(diào)節(jié)劑研發(fā)需要大批量化合物、抗體、細(xì)胞株體外功能篩選，96孔、384孔微孔板成為標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)載體。自動(dòng)化高內(nèi)涵成像系統(tǒng)可完成微孔板整板自動(dòng)掃描、目標(biāo)細(xì)胞智能定位、批量圖像同步分析，大幅壓縮單批次實(shí)驗(yàn)周期。
設(shè)備可實(shí)現(xiàn)無(wú)人工值守連續(xù)檢測(cè)，低倍率快速初篩定位含免疫細(xì)胞的有效視野，自動(dòng)切換高倍物鏡采集精細(xì)熒光圖像，減少無(wú)效視野數(shù)據(jù)存儲(chǔ)，提升篩選通量。在橫河電機(jī)（中國(guó)）服務(wù)的制藥實(shí)驗(yàn)室場(chǎng)景中，單臺(tái)設(shè)備單日可完成數(shù)百個(gè)孔位免疫殺傷、細(xì)胞活化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)，同步輸出標(biāo)準(zhǔn)化定量數(shù)據(jù)，適配藥物早期大規(guī)模體外篩選需求，縮短候選分子篩選周期。
（五）無(wú)標(biāo)記與AI輔助識(shí)別，降低免疫樣本染色成本
多重?zé)晒饪贵w染色存在試劑成本高、光譜串色、樣本損傷等問(wèn)題。近年基于明場(chǎng)、相差圖像的無(wú)標(biāo)記細(xì)胞識(shí)別技術(shù)逐步落地，結(jié)合機(jī)器學(xué)習(xí)算法依靠細(xì)胞形態(tài)、紋理特征區(qū)分中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞大類，減少熒光染料使用量。
平臺(tái)內(nèi)置深度學(xué)習(xí)圖像模塊，可基于少量標(biāo)注免疫細(xì)胞圖像完成模型訓(xùn)練，自動(dòng)識(shí)別活化、凋亡、遷移狀態(tài)的免疫細(xì)胞，針對(duì)弱熒光、低信噪比樣本優(yōu)化分割精度，緩解自體熒光干擾帶來(lái)的數(shù)據(jù)分析誤差，拓展珍貴原代免疫細(xì)胞樣本的檢測(cè)方案選擇空間。
二、以橫河電機(jī)（中國(guó)）為例，本土場(chǎng)景下的技術(shù)落地實(shí)踐
橫河電機(jī)依托多年精密光學(xué)、半導(dǎo)體檢測(cè)技術(shù)積累，將轉(zhuǎn)盤共聚焦成像技術(shù)移植至生命科學(xué)高內(nèi)涵產(chǎn)品線，在國(guó)內(nèi)搭建適配本土免疫研究需求的設(shè)備與配套服務(wù)體系，產(chǎn)品覆蓋臺(tái)式小型共聚焦高內(nèi)涵設(shè)備、高通量全自動(dòng)篩選平臺(tái)、單細(xì)胞微流控聯(lián)動(dòng)系統(tǒng)，服務(wù)高校免疫實(shí)驗(yàn)室、藥企免疫研發(fā)部門、第三方CRO檢測(cè)機(jī)構(gòu)等多元用戶群體。
在設(shè)備適配層面，結(jié)合國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室樣本特點(diǎn)調(diào)整硬件配置：針對(duì)臨床來(lái)源有限的外周血、腫瘤原代免疫細(xì)胞，優(yōu)化相機(jī)靈敏度與熒光激發(fā)光路，降低樣本用量；配套獨(dú)立溫控、氣體調(diào)控艙，適配長(zhǎng)時(shí)間原代免疫細(xì)胞活細(xì)胞觀測(cè)；推出微流控單細(xì)胞操控單元聯(lián)動(dòng)方案，實(shí)現(xiàn)免疫細(xì)胞分選、共培養(yǎng)、動(dòng)態(tài)成像一體化流程，用于CAR-T單細(xì)胞功能追蹤實(shí)驗(yàn)。
在本土化配套服務(wù)層面，企業(yè)在國(guó)內(nèi)配備專業(yè)應(yīng)用工程師團(tuán)隊(duì)，針對(duì)免疫細(xì)胞功能評(píng)估搭建標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)流程模板，涵蓋NK細(xì)胞殺傷、T細(xì)胞活化、巨噬細(xì)胞極化、炎癥小體檢測(cè)、三維腫瘤免疫浸潤(rùn)等常用實(shí)驗(yàn)方案；同步提供軟件定制化分析流程調(diào)試服務(wù)，協(xié)助科研人員搭建專屬免疫數(shù)據(jù)計(jì)算模型，降低設(shè)備使用門檻。同時(shí)對(duì)接國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室數(shù)字化轉(zhuǎn)型需求，將成像分析數(shù)據(jù)與電子實(shí)驗(yàn)記錄本系統(tǒng)打通，實(shí)現(xiàn)免疫實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)全流程留存與追溯，符合醫(yī)藥研發(fā)數(shù)據(jù)合規(guī)相關(guān)要求Yokogawa Electric Corporation。
在產(chǎn)學(xué)研協(xié)同層面，橫河電機(jī)（中國(guó)）與國(guó)內(nèi)多所醫(yī)學(xué)院、免疫研究院開展聯(lián)合實(shí)驗(yàn)平臺(tái)共建，針對(duì)自身免疫疾病、抗感染免疫、細(xì)胞治療篩選等方向開展聯(lián)合方法學(xué)開發(fā)，持續(xù)優(yōu)化設(shè)備在本土特色樣本（臨床患者原代免疫細(xì)胞、國(guó)產(chǎn)類器官模型）上的成像與分析表現(xiàn)，推動(dòng)高內(nèi)涵技術(shù)在國(guó)內(nèi)免疫領(lǐng)域的普及應(yīng)用。
三、高內(nèi)涵成像用于免疫細(xì)胞評(píng)估現(xiàn)存核心挑戰(zhàn)
（一）光學(xué)成像層面的技術(shù)局限
多重?zé)晒夤庾V串色干擾
免疫功能評(píng)估常需要5種及以上標(biāo)志物同步標(biāo)記，常規(guī)熒光基團(tuán)發(fā)射光譜存在重疊，易造成信號(hào)交叉干擾，導(dǎo)致細(xì)胞標(biāo)志物表達(dá)定量偏差。轉(zhuǎn)盤共聚焦雖可降低雜散光，但熒光通道數(shù)量仍存在上限，無(wú)法滿足空間蛋白質(zhì)組學(xué)數(shù)十重標(biāo)記同步檢測(cè)需求；若增加標(biāo)記輪次反復(fù)染色，會(huì)破壞活細(xì)胞完整生理狀態(tài)，僅能應(yīng)用于固定細(xì)胞樣本。
深層三維樣本信號(hào)衰減問(wèn)題
三維腫瘤球、類器官、組織切片厚度提升后，激發(fā)光穿透效率下降，深層免疫細(xì)胞熒光信號(hào)強(qiáng)度顯著降低，圖像對(duì)比度不足，容易出現(xiàn)細(xì)胞漏分割、定量偏低等問(wèn)題。延長(zhǎng)曝光時(shí)間會(huì)加劇光漂白，縮短動(dòng)態(tài)觀測(cè)時(shí)長(zhǎng)，成像速度與成像質(zhì)量難以同步平衡。
長(zhǎng)時(shí)間活細(xì)胞成像的光毒性制約
免疫細(xì)胞本身對(duì)光照敏感，持續(xù)激光照射會(huì)引發(fā)細(xì)胞氧化應(yīng)激，改變細(xì)胞活化、凋亡基線水平，干擾真實(shí)功能數(shù)據(jù)?，F(xiàn)有光學(xué)結(jié)構(gòu)可緩解光損傷，但超長(zhǎng)時(shí)程（超過(guò)72小時(shí)）免疫細(xì)胞動(dòng)態(tài)追蹤仍會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞活性下降，限制部分慢性免疫應(yīng)答過(guò)程觀測(cè)。
（二）圖像數(shù)據(jù)分析體系存在短板
免疫細(xì)胞異質(zhì)性帶來(lái)分割識(shí)別難度
免疫細(xì)胞形態(tài)差異大，活化、靜息、凋亡狀態(tài)下尺寸、輪廓變化明顯；細(xì)胞聚集堆疊時(shí)易出現(xiàn)細(xì)胞邊界粘連，常規(guī)通用分割算法難以精準(zhǔn)區(qū)分單個(gè)細(xì)胞，造成細(xì)胞計(jì)數(shù)、熒光強(qiáng)度計(jì)算失真。定制化AI模型需要大量人工標(biāo)注免疫細(xì)胞圖像，標(biāo)注流程耗時(shí)，中小實(shí)驗(yàn)室難以獨(dú)立完成模型訓(xùn)練。
多維海量數(shù)據(jù)處理效率不足
單批次高通量微孔板成像會(huì)生成數(shù)萬(wàn)張圖像，配套形態(tài)、熒光、空間距離等上百項(xiàng)細(xì)胞特征數(shù)據(jù)，數(shù)據(jù)存儲(chǔ)、傳輸、統(tǒng)計(jì)分析占用大量算力。商業(yè)分析軟件內(nèi)置統(tǒng)計(jì)模塊功能有限，復(fù)雜免疫關(guān)聯(lián)分析需要借助第三方編程工具，對(duì)使用者生物信息分析能力存在一定要求；不同品牌設(shè)備輸出圖像格式不統(tǒng)一，跨平臺(tái)數(shù)據(jù)對(duì)比缺乏通用標(biāo)準(zhǔn)化流程。
定量指標(biāo)缺乏統(tǒng)一行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)
目前免疫細(xì)胞功能高內(nèi)涵檢測(cè)無(wú)統(tǒng)一量化規(guī)范，不同實(shí)驗(yàn)室、不同設(shè)備針對(duì)同一指標(biāo)（如免疫突觸面積、細(xì)胞浸潤(rùn)比例）采用的計(jì)算邏輯、閾值設(shè)置存在區(qū)別，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)重復(fù)性、跨實(shí)驗(yàn)室可比性偏弱，不利于臨床轉(zhuǎn)化過(guò)程中方法學(xué)驗(yàn)證。
（三）樣本與應(yīng)用轉(zhuǎn)化層面的現(xiàn)實(shí)障礙
原代免疫細(xì)胞樣本獲取難度高、穩(wěn)定性差
臨床患者外周血、腫瘤浸潤(rùn)原代免疫細(xì)胞獲取量有限，體外存活時(shí)間短，對(duì)成像前培養(yǎng)、染色操作流程容錯(cuò)率低；批次間個(gè)體差異大，需要增加生物學(xué)重復(fù)，提升實(shí)驗(yàn)成本。部分稀有免疫細(xì)胞亞群占比極低，高通量成像下有效目標(biāo)細(xì)胞數(shù)量不足，統(tǒng)計(jì)結(jié)果波動(dòng)較大。
設(shè)備使用與維護(hù)成本帶來(lái)普及門檻
全自動(dòng)高通量高內(nèi)涵成像系統(tǒng)采購(gòu)、年度維護(hù)、專用熒光試劑綜合成本偏高，中小型高校實(shí)驗(yàn)室、小型生物技術(shù)企業(yè)配置數(shù)量有限；設(shè)備操作、數(shù)據(jù)分析需要兼具免疫學(xué)與成像技術(shù)知識(shí)的復(fù)合型人員，人才儲(chǔ)備不足會(huì)限制設(shè)備使用效率。
臨床場(chǎng)景轉(zhuǎn)化存在合規(guī)壁壘
現(xiàn)階段高內(nèi)涵免疫檢測(cè)多停留在基礎(chǔ)科研與藥物體外篩選階段，臨床診斷應(yīng)用較少。臨床檢測(cè)對(duì)方法學(xué)穩(wěn)定性、數(shù)據(jù)溯源、儀器標(biāo)準(zhǔn)化驗(yàn)證有嚴(yán)格要求，而高內(nèi)涵成像分析流程參數(shù)可調(diào)范圍大，不同操作人員設(shè)置差異會(huì)影響結(jié)果，完整臨床驗(yàn)證體系尚未完整，難以直接用于臨床免疫診斷指標(biāo)判定。
（四）本土適配配套資源有待改善
國(guó)內(nèi)免疫研究常用的國(guó)產(chǎn)類器官、微流控芯片、熒光抗體與進(jìn)口設(shè)備適配性仍存在優(yōu)化空間；本土化標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)方案、配套質(zhì)控試劑盒供給不足，多數(shù)實(shí)驗(yàn)流程依賴海外文獻(xiàn)參考，自主建立標(biāo)準(zhǔn)化免疫高內(nèi)涵檢測(cè)方法學(xué)周期較長(zhǎng)。
四、技術(shù)發(fā)展優(yōu)化方向與行業(yè)展望
針對(duì)上述挑戰(zhàn)，行業(yè)技術(shù)迭代與落地優(yōu)化可從多維度推進(jìn)：
一是光學(xué)技術(shù)持續(xù)升級(jí)，拓展多光譜成像、超分辨光路、低光毒性照明方案，提升多重標(biāo)記同步檢測(cè)能力，改善三維深層樣本成像信噪比；結(jié)合無(wú)標(biāo)記成像技術(shù)減少熒光試劑依賴，降低樣本損傷。橫河電機(jī)等設(shè)備廠商持續(xù)迭代雙轉(zhuǎn)盤共聚焦光學(xué)單元，優(yōu)化光路光利用率，平衡成像速度與細(xì)胞保護(hù)需求。
二是AI智能分析體系改善，搭建面向免疫細(xì)胞的預(yù)訓(xùn)練深度學(xué)習(xí)模型，內(nèi)置通用免疫細(xì)胞分割模板，降低人工標(biāo)注工作量；統(tǒng)一圖像數(shù)據(jù)存儲(chǔ)格式，打通成像軟件與生信分析平臺(tái)數(shù)據(jù)通道，簡(jiǎn)化多維免疫特征統(tǒng)計(jì)流程；行業(yè)逐步推動(dòng)免疫定量指標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)范，提升數(shù)據(jù)可對(duì)比性。
三是輕量化設(shè)備方案開發(fā)，推出小型臺(tái)式高內(nèi)涵設(shè)備，降低采購(gòu)與運(yùn)維成本，適配中小型實(shí)驗(yàn)室常規(guī)免疫檢測(cè)；同步本土配套試劑、芯片、標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)方案供給，縮短方法學(xué)搭建周期。
四是產(chǎn)學(xué)研協(xié)同推動(dòng)臨床轉(zhuǎn)化，聯(lián)合藥企、醫(yī)療機(jī)構(gòu)完成高內(nèi)涵免疫檢測(cè)方法學(xué)驗(yàn)證，建立符合臨床規(guī)范的數(shù)據(jù)采集、分析、溯源流程，拓展自身免疫病、腫瘤免疫預(yù)后體外評(píng)估等臨床應(yīng)用場(chǎng)景。
從行業(yè)發(fā)展來(lái)看，高內(nèi)涵成像不會(huì)替代流式、傳統(tǒng)免疫熒光等技術(shù)，而是形成互補(bǔ)檢測(cè)體系：流式負(fù)責(zé)大批量免疫細(xì)胞分群統(tǒng)計(jì)，高內(nèi)涵補(bǔ)充空間、動(dòng)態(tài)、形態(tài)維度信息，二者結(jié)合構(gòu)建更完整的免疫細(xì)胞功能評(píng)價(jià)體系。伴隨細(xì)胞治療、腫瘤免疫藥物持續(xù)研發(fā)，兼具活細(xì)胞動(dòng)態(tài)觀測(cè)、三維結(jié)構(gòu)解析、高通量篩選能力的高內(nèi)涵平臺(tái)，會(huì)在免疫基礎(chǔ)研究與藥物開發(fā)中承擔(dān)更多實(shí)驗(yàn)任務(wù)。橫河電機(jī)（中國(guó)）這類具備本土技術(shù)服務(wù)能力的設(shè)備供應(yīng)商，也將持續(xù)根據(jù)國(guó)內(nèi)免疫研究需求迭代軟硬件配套，助力國(guó)內(nèi)免疫學(xué)科研與產(chǎn)業(yè)發(fā)展。
五、結(jié)語(yǔ)
高內(nèi)涵成像突破傳統(tǒng)免疫檢測(cè)技術(shù)單一維度數(shù)據(jù)局限，依靠動(dòng)態(tài)時(shí)序觀測(cè)、單細(xì)胞空間定量、高通量自動(dòng)化篩選等優(yōu)勢(shì)，為免疫細(xì)胞活化、殺傷、浸潤(rùn)、極化等功能評(píng)估提供全新技術(shù)路徑。以橫河電機(jī)（中國(guó)）相關(guān)設(shè)備在國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室的落地應(yīng)用可見，成熟的光學(xué)硬件、配套分析軟件與本土化技術(shù)服務(wù)，能夠有效匹配國(guó)內(nèi)免疫研究多樣化實(shí)驗(yàn)需求。
同時(shí)該技術(shù)仍面臨光譜干擾、三維成像缺陷、數(shù)據(jù)分析標(biāo)準(zhǔn)化不足、臨床轉(zhuǎn)化受限等多重現(xiàn)實(shí)挑戰(zhàn)。未來(lái)依靠光學(xué)硬件迭代、人工智能算法優(yōu)化、行業(yè)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)建立、本土配套體系改善，高內(nèi)涵成像技術(shù)將進(jìn)一步釋放應(yīng)用潛力，持續(xù)支撐腫瘤免疫、細(xì)胞治療、抗感染、自身免疫疾病等領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究與新藥研發(fā)工作。
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