BMP6ELISA標(biāo)準(zhǔn)品活性異常如何補(bǔ)救
BMP6 ELISA標(biāo)準(zhǔn)品活性異常沒(méi)有通用的補(bǔ)救方案,只有針對(duì)輕度異常的臨時(shí)補(bǔ)救方法,中重度異常建議直接更換,具體方案如下:
一、僅輕度活性下降可嘗試臨時(shí)補(bǔ)救
僅滿(mǎn)足「R2≥0.95、偏差15%-20%、無(wú)沉淀渾濁」的輕度異常,可嘗試以下方法補(bǔ)救:
?調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)擬合方式?:原來(lái)用直線(xiàn)擬合改成四參數(shù)邏輯擬合,多數(shù)情況下可改善線(xiàn)性,彌補(bǔ)輕度活性下降帶來(lái)的偏差;
?增加復(fù)孔重復(fù)檢測(cè)?:每個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品和樣本都做2-3個(gè)復(fù)孔,取平均值計(jì)算,減少隨機(jī)誤差對(duì)結(jié)果的影響;
?用新標(biāo)準(zhǔn)品校正?:如果有剩余少量新標(biāo)準(zhǔn)品,取1-2個(gè)濃度點(diǎn)和異常標(biāo)準(zhǔn)品比對(duì),用校正系數(shù)修正所有樣本結(jié)果。
?? 補(bǔ)救后僅可用于預(yù)實(shí)驗(yàn)或初步篩選,絕對(duì)不能用補(bǔ)救后的結(jié)果作為正式實(shí)驗(yàn)結(jié)論。
二、中重度活性異常直接更換,不建議補(bǔ)救
出現(xiàn)以下任意一種情況,補(bǔ)救沒(méi)有意義,直接更換新的標(biāo)準(zhǔn)品是的方案:
復(fù)溶后出現(xiàn)渾濁、絮狀沉淀,或原凍干品已經(jīng)潮解結(jié)塊;
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)R2<0.95,沒(méi)有明顯梯度顯色;
質(zhì)控偏差超過(guò)20%,同濃度OD下降超過(guò)20%。
強(qiáng)行補(bǔ)救不僅會(huì)浪費(fèi)時(shí)間和其他試劑,最終得到的結(jié)果也不可靠,反而耽誤實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。
三、補(bǔ)救后的注意事項(xiàng)
即使輕度補(bǔ)救成功,也要重新做質(zhì)控驗(yàn)證:確認(rèn)質(zhì)控偏差回到15%以?xún)?nèi),才能使用結(jié)果;如果偏差仍然超標(biāo),還是需要更換新的標(biāo)準(zhǔn)品。
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