高效解離的關(guān)鍵密碼:膠原酶 II 型的應(yīng)用與性能解析
膠原酶 II 型(CAS:9001-12-1,貨號(hào) abs47048001)是組織解離與原代細(xì)胞制備的核心酶制劑,來(lái)源于溶組織梭菌,活性不低于 125 CDU/mg,憑借獨(dú)特酶學(xué)特性被廣泛應(yīng)用于各類生物實(shí)驗(yàn)中。
膠原酶 II 型的作用原理是什么?
膠原酶 II 型屬于肽鏈內(nèi)切酶,可特異性識(shí)別膠原的 Pro-X-Gly-Pro 序列,切割氨基酸與甘氨酸之間的肽鍵,也是少數(shù)能降解三股超螺旋天然膠原纖維的蛋白酶。該產(chǎn)品為復(fù)合酶制劑,除核心梭菌蛋白酶 A 外,還含有多糖酶、脂酶等組分,可同步水解細(xì)胞外基質(zhì)中的蛋白、多糖與脂質(zhì),高效瓦解結(jié)締組織結(jié)構(gòu),同時(shí)對(duì)細(xì)胞本體損傷較小,保障解離后細(xì)胞活性。
膠原酶 II 型與 I 型有何區(qū)別?
商業(yè)化膠原酶依據(jù)酶組分活性劃分多個(gè)類型,II 型與 I 型差異集中在酶活配比與適用場(chǎng)景。I 型膠原酶各類蛋白酶活性分布均勻,適配上皮、肺、脂肪等組織;II 型膠原酶梭菌蛋白酶活性更高,針對(duì)致密結(jié)締組織的解離能力更強(qiáng),二者需根據(jù)組織膠原含量選型。
膠原酶 II 型可應(yīng)用于哪些實(shí)驗(yàn)?
該試劑工作濃度為 50-200 U/ml,常規(guī)在 37℃條件下孵育 4-18 h,可開展多類實(shí)驗(yàn)。
主要用于心臟、肝臟、骨骼、甲狀腺、軟骨等組織的原代細(xì)胞分離,也可用于器官灌注實(shí)驗(yàn);經(jīng)其解離的細(xì)胞懸液細(xì)胞活率高,可直接用于流式細(xì)胞術(shù)等后續(xù)檢測(cè),小鼠脾臟、肝腎、腫瘤組織解離實(shí)驗(yàn)均能取得良好效果。產(chǎn)品需 -20℃避光保存,有效期 2 年,分裝使用可避免反復(fù)凍融影響酶活性。
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