膠原酶 I 型（貨號 abs47048000，CAS：9001-12-1）是生物實驗常用的蛋白水解酶，活性大于 125 CDU/mg，僅用于科研實驗，需 -20℃避光長期保存。它源自溶組織梭菌，屬于肽鏈內(nèi)切酶，可特異性識別膠原的 Pro-X-Gly-Pro 序列，切割肽鍵降解三股螺旋結(jié)構(gòu)的天然膠原纖維，是組織解離核心試劑。

一、膠原酶 I 型與其他膠原酶有何區(qū)別？

商業(yè)化膠原酶依據(jù)酶組分與活性分為五類，I 型具備均衡的膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶等活性。對比其他類型，II 型梭菌蛋白酶活性更高，適配骨骼、心臟等堅韌組織；III 型次級蛋白酶活性低，多用于乳腺組織；IV 型胰蛋白酶活性弱，適合胰島細胞分離。I 型酶活配比均衡，適用范圍更廣。

二、膠原酶 I 型主要用于哪些實驗？

該試劑標(biāo)準(zhǔn)工作濃度為 50-200 U/ml，主流應(yīng)用分為三類。第一類是常規(guī)組織解離，將肝、肺、脂肪、腎上腺等組織剪碎后，加入酶液 37℃振蕩孵育，制備原代單細胞懸液。第二類為器官灌注實驗，用酶液對離體器官循環(huán)灌注，溫和解離組織獲取高活性細胞。第三類是流式細胞檢測實驗，經(jīng)其處理得到的單細胞可開展細胞活力、細胞亞群分型等流式分析，細胞狀態(tài)穩(wěn)定，檢測結(jié)果可靠。

應(yīng)用方向：器官灌注、流式檢測、組織解離、原代細胞制備、離體器官研究、細胞表型分析

三、實驗操作有哪些關(guān)鍵要點？

配制儲存液時需用含鈣鎂的 HBSS 緩沖液溶解，過濾除菌后分裝凍存，避免反復(fù)凍融。組織消化時添加 3 mM CaCl?可提升效率，孵育時長控制在 4-18 h。消化完成后需篩除組織殘渣，緩沖液清洗細胞并低速離心，最終用培養(yǎng)液重懸即可開展后續(xù)實驗，操作全程嚴(yán)格無菌。

四、愛必信相關(guān)產(chǎn)品推薦