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不用裂解、不用GUS染色，“科辰星飛”讓煙草瞬時轉(zhuǎn)化啟動子驗證飛起來
煙草瞬時轉(zhuǎn)化是植物分子生物學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛的啟動子活性驗證體系之一。傳統(tǒng)實驗流程中，研究人員通過農(nóng)桿菌注射煙草葉片后，需靜置48小時再取樣，開展GUS染色或熒光素酶裂解檢測。其中，GUS染色需經(jīng)過樣本固定、染色、脫色等多個步驟，全程耗時4-6小時，僅能實現(xiàn)定性分析；熒光素酶裂解檢測雖可完成定量檢測，但會對樣本造成不可逆破壞，無法針對同一轉(zhuǎn)化斑塊開展時序動態(tài)監(jiān)測，難以捕捉啟動子活性的動態(tài)變化過程。
“科辰星飛”植物活體成像系統(tǒng)有效優(yōu)化了傳統(tǒng)實驗流程。經(jīng)農(nóng)桿菌注射后的煙草植株，可直接放置于成像暗箱中，在葉片背面噴灑熒光素底物后，30秒內(nèi)就能采集清晰的發(fā)光圖像，無需樣本裂解、染色處理，全程可實現(xiàn)無損檢測。該系統(tǒng)的核心優(yōu)勢在于，可對同一轉(zhuǎn)化斑塊分別在24小時、48小時、72小時進行連續(xù)成像，能夠完整捕捉啟動子活性隨時間變化的動態(tài)規(guī)律，彌補了傳統(tǒng)檢測方法的短板。
在一項新啟動子功能驗證實驗中，研究人員借助“科辰星飛”系統(tǒng)，同步對比3個候選啟動子與陽性對照35S啟動子的活性差異。實驗結(jié)果顯示，其中一款新啟動子在轉(zhuǎn)化48小時的發(fā)光強度可達35S啟動子的70%，但在72小時后活性衰減至35S啟動子的30%，這一特征表明該新啟動子更適配瞬時表達場景，不適用于基因持續(xù)表達的研究。這類精細化的時間分辨活性數(shù)據(jù)，無法通過傳統(tǒng)終點檢測方式獲取，為啟動子功能的精準研判提供了重要依據(jù)。
相較于傳統(tǒng)實驗方案，“科辰星飛”植物活體成像系統(tǒng)可將煙草瞬時轉(zhuǎn)化實驗通量提升5倍以上，大幅降低80%的實驗時間成本，能夠有效提升植物分子生物學(xué)啟動子功能驗證實驗的效率，為相關(guān)科研工作提供高效的技術(shù)支撐。
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