近日，由華西醫(yī)院研發(fā)的首-個EBV mRNA疫苗正式在海南博鰲樂城投入臨床應用，填-補EBV陽性腫瘤mRNA精準治療領(lǐng)域空白。

在腫瘤疫苗和mRNA等新型疫苗，以及常規(guī)疫苗的開發(fā)評價中，不應僅依賴抗體滴度作為免疫原性評估的唯-一指標，需同步檢測IL6、TNF-α、IFN-γ、IL-2等細胞因子的表達水平，來有效反映T細胞免疫應答的激活狀態(tài)，并結(jié)合特異性T細胞計數(shù)共同構(gòu)成完整的細胞免疫評價體系?！稁畎捳钜呙缗R床試驗技術(shù)指導原則》（CDE發(fā)布）就明確要求檢測疫苗誘導的IFN-γ、IL-2、TNF-α等細胞因子水平。

當疫苗研發(fā)項目進入動物實驗或臨床樣本檢測階段，樣本量會迅速增加，篩選批次也會增加。因此，需要高通量、高穩(wěn)定性、低人工成本的檢測方法來進行高效驗證。

TR-FRET細胞因子檢測試劑盒，無需洗板，大幅減少人工操作時間，低背景，高信噪比，能夠提高檢測效率和批間一致性，適用于多樣本、多批次的高通量檢測需求場景。義翹神州成功推出SwiftFluo® 系列TR-FRET試劑盒，涵蓋IFN-γ、IL-6、IL-2、TNF-α等細胞因子。在新品上市之際，特推出免費試用活動。0元申請100 Tests試劑盒一套。

經(jīng)典方法成熟，但高通量壓力明顯

ELISA和ELISpot是細胞因子檢測中應用廣泛、方法體系成熟的經(jīng)典技術(shù)。ELISA利用酶聯(lián)免疫吸附的原理，可用于血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清中的細胞因子總濃度。ELISpot在酶聯(lián)免疫吸附的原理上進行升級，可檢測單個細胞的分泌情況，特別適合觀察低頻免疫細胞應答。

但是在高通量檢測時，它們會存在一定的局限性。

ELISA流程成熟，需要多步孵育、洗板、顯色等過程，人工操作環(huán)節(jié)較多。在多批次、大樣本檢測時，洗板誤差、操作差異和時間成本就會凸顯出來。

ELISpot對活細胞的培養(yǎng)和刺激依賴性較強，實驗周期較長，對細胞狀態(tài)、操作熟練度、讀板分析這些要求更高，高通量檢測難度大。

在疫苗和藥物開發(fā)周期中，從I、II、III期臨床試驗到?上市后監(jiān)測，需要檢測?數(shù)千、甚至上萬份樣本，高通量、低誤差、低人工的技術(shù)方法更適用。TR-FRET具有均相、免洗、快速優(yōu)勢。在大樣本、多批次檢測場景中，TR-FRET技術(shù)均相免洗，大幅減少人工操作時間，提高檢測效率和批間一致性，降低整體研發(fā)周期與失敗風險。

表一：細胞因子檢測方法對比

TR-FRET（時間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移）技術(shù)通過兩個熒光標記分子在一定距離內(nèi)發(fā)生能量轉(zhuǎn)移來實現(xiàn)對目標分子的特異性檢測。在檢測體系中，兩個熒光標記的分子分別是能量供體和能量受體。能量供體中的鑭系元素（銪Eu3+、鋱Tb3+等）是長壽命的毫秒級熒光，而樣本中的干擾信號（自發(fā)熒光、散射光、雜蛋白）屬于短壽命的納秒級熒光。通過時間分辨測量技術(shù)，設置一個延遲時間，可有效的將目標信號和背景噪聲區(qū)分開。

SwiftFluo® TR-FRET細胞因子檢測試劑盒基于雙抗夾心原理開發(fā)，包含兩株表位不同的特異性單抗，分別偶聯(lián)Eu（能量供體）與LA（能量受體）。當樣本中存在目標細胞因子時（如IL-6），兩株抗體同時結(jié)合目標因子，使供體和受體靠近到合適的距離。

在外部光源激發(fā)下，供體與受體之間發(fā)生能量共振轉(zhuǎn)移。檢測特定波長（受體665 nm，供體620 nm）的信號比值，即可測定樣本中的細胞因子含量。目標蛋白水平與信號比值呈正比。

SwiftFluo® TR-FRET試劑盒具有高特異性、高重復性和高通量的特性，適合用于疫苗免疫應答評價、炎癥因子檢測、細胞培養(yǎng)上清分析，以及藥物篩選中的多樣本檢測。

?義翹神州SwiftFluo® TR-FRET高通量試劑盒

目前，義翹神州 SwiftFluo® TR-FRET 細胞因子檢測試劑盒覆蓋TNF-α、IL-6、IL-2、IFN-γ等常用檢測指標，提供100、1000、10000 Tests等多種靈活規(guī)格包裝，可滿足疫苗研發(fā)和免疫評價中的多種檢測需求。與國際競品比對，檢測范圍寬，性能優(yōu)異。

同時，義翹神州還提供配套耗材，包括96孔白色淺孔板（貨號：SFP02）和高透壓敏膜（貨號：SFM01）。

SwiftFluo® TR-FRET 人IL-6檢測試劑盒 （貨號：SFBM003）