Shimadzu LC-30A 與 LCMS-8050 聯(lián)用系統(tǒng)；

色譜柱：Shim-pack GIST Amide（2.1×100mm，3μm；P/N：227-30818-04)；

固相萃取小柱：SHIMSEN Styra HLB 500mg/6mL（P/N: 380-00855-07）；

SHIMSEN Styra MCX 500mg/6mL（P/N: 380-00853-10）；

SHIMSEN Disc HPTFE 針式過濾器（P/N：380-00341）；

LC/MS 認(rèn)證樣品瓶 LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet 移液槍：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；

SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；

SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

UHPLC 條件

色譜柱： Shim-pack GIST Amide（2.1×100mm，3μm；P/N：227-30818-04)

柱溫： 50℃ 流速：0.4 mL/min     進(jìn)樣量：5 μL

流動相：A：0.2%甲酸水溶液    B：0.1%甲酸乙腈

梯度洗脫程序：

質(zhì)譜條件

離子化模式：ESI，正離子掃描 掃描模式：多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)

碰撞氣：氬氣

加熱氣：氮?dú)?10 L/min

霧化氣：氮?dú)?3 L/min

干燥氣：氮?dú)?10 L/min

接口溫度：300℃

DL 溫度： 250 ℃

加熱模塊溫度：400 ℃

各化合物 MRM 參數(shù)見下表(*為定量離子)

1.3.1 樣品提取

稱取 5 g 試樣（精確到 0.01g） 于 50 mL 塑料離心管中，加入 25 mL 0.2%甲酸水溶液，手動振搖 1 min，以 10000 r/min 下離心 5 min， 用吸管吸取上清液轉(zhuǎn)移至 50 mL 塑料離心管中， 混勻， 待凈化。  流程圖見下圖。

1.3.2 樣品凈化

SHIMSEN Styra HLB：5 mL 甲醇、 5 mL 0.2%甲酸水溶液活化，再用 2 mL 待凈化液預(yù)洗，棄去預(yù)洗液； 取 5.5 mL 待凈化液上柱，以約 1 mL/min 流速通過凈化柱，接收流出液于 10 mL 塑料離心管，待混合型陽離子交換固相萃取柱 SHIMSEN Styra MCX 凈化。

SHIMSEN Styra MCX：依次用 5 mL 甲醇、 5 mL 水、 5 mL 30 mmol/L 鹽酸溶液活化，取 5 mL 上述過柱濾液上柱，以約 1mL/min 流速通過凈化柱，待樣液流盡， 用 5 mL 水、 5 mL 甲醇淋洗柱，棄去淋洗液； 用 12 mL20%氨水甲醇溶液洗脫，收集洗脫液(Tips：可換用500mg/12mL規(guī)格小柱，方便加液操作)。 將洗脫液在 50℃水浴中減壓旋至 100 μL 左右， 用定容溶液（乙腈：2%甲酸水=1：1） 定容至 2 mL， 混勻。 過 0.22 μm 微孔濾膜，供 LC-MS/MS 分析。  流程圖如下。

將大大米空白樣品進(jìn)行 0.02 mg/kg（春雷霉素、井岡霉素） 和 0.05 mg/kg（寧南霉素、多抗霉素） 加標(biāo)， 按照上述前處理方法處理后上機(jī)，平行 3 份樣品考察回收率和 RSD，結(jié)果顯示，加標(biāo)回收率為73.83%-97.13%， RSD 為 0.78%-3.51%， 回收率高，重現(xiàn)性好。各化合物回收率及 RSD 數(shù)據(jù)見下表：

本文建立了大米中春雷霉素、井岡霉素、寧南霉素、多抗霉素殘留量的測定方法。參照 GB 23200.125-2026《植物源性食品中春雷霉素、井岡霉素、寧南霉素、多抗霉素殘留量的測定》中的條件并優(yōu)化，采用島津 SHIMSEN Styra HLB、 SHIMSEN Styra MCX 產(chǎn)品對大米基質(zhì)進(jìn)行凈化， Shim-pack GIST Amide 色譜柱進(jìn)行分離，采用島津液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀 LCMS-8050 進(jìn)行檢測分析。對大米空白樣品進(jìn)行 0.02 mg/kg（春雷霉素、井岡霉素） 和 0.05 mg/kg（寧南霉素、多抗霉素）加標(biāo)，按照上述前處理方法處理后上機(jī)，平行 3 份樣品考察回收率和 RSD，結(jié)果顯示，加標(biāo)回收率為 73.83%-97.13%， RSD 為 0.78%-3.51%，回收率高，重現(xiàn)性好，簡單快速。該方法可為大米中春雷霉素、井岡霉素、寧南霉素、多抗霉素殘留量的檢測提供參考。