摘要： 小麥（Triticum aestivumL.）遺傳轉(zhuǎn)化周期長、再生困難，對陽性苗的早期篩選至關(guān)重要。由于小麥組織富含葉綠素及酚類物質(zhì)，背景熒光干擾強，傳統(tǒng)顯微鏡觀察難度大。本文提出利用LUYOR-3415RG高強度手持熒光燈對小麥T0代再生苗進(jìn)行GFP標(biāo)記的快速篩查，顯著提高育種效率。

1. 痛點分析：為什么小麥最難篩？

與擬南芥和煙草不同，小麥組織在紫外光激發(fā)下會產(chǎn)生強烈的紅色/橙色自發(fā)熒光（Autofluorescence），這會掩蓋微弱的GFP信號。此外，小麥葉片蠟質(zhì)層厚，普通手電筒光線無法穿透，導(dǎo)致“看著像亮了，其實沒亮”。

2. 解決方案：高強度激發(fā) + 暗適應(yīng)

儀器： LUYOR-3415RG（365nm/450nm 雙波段）

方法：

1. 暗適應(yīng)：將待檢小麥組培苗置于黑暗環(huán)境30分鐘（消耗葉綠素?zé)晒猓档捅尘霸胍簦?/p>

   
   

2. 高強度激發(fā)：使用LUYOR-3415RG的365nm（UV檔），緊貼小麥葉片基部或幼嫩葉鞘照射。

   
   

3. 信號識別：

   
   

• 真陽性：呈現(xiàn)亮綠色、點狀分布，邊界清晰，且亮度隨激發(fā)時間不衰減。

  
  

• 假陽性（自發(fā)熒光）：呈現(xiàn)彌散的紅褐色，亮度隨照射時間迅速減弱。

  
  

3. 實驗流程

4. 結(jié)果對比

在未使用3415RG之前，實驗室需要對所有再生苗進(jìn)行PCR鑒定，單株成本約20元，耗時3天。

使用后一分鐘

LUYOR-3415RG憑借其高功率密度，有效克服了小麥組織的背景干擾，是小麥、水稻等單子葉作物轉(zhuǎn)基因篩選的理想工具。