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膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基的使用方法與原理
一、用途：
腸道菌選擇性培養(yǎng)基，特別是沙門氏菌的選擇性分離。
二、實(shí)驗(yàn)原理：
蛋白胨和牛肉浸出粉提供碳氮源、維生素和生長因子等生長必需的營養(yǎng)物質(zhì)；乳糖和蔗糖作為可發(fā)酵碳源；去氧膽酸鈉和檸檬酸鈉抑制革蘭氏陽性菌的生長；硫代硫酸na及檸檬酸鐵銨與沙門氏菌產(chǎn)生的硫化氫反應(yīng)，使得菌落的顏色呈黑色；中性紅作為酸堿指示劑；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。
三、培養(yǎng)基成分（g/L）：
蛋白胨 | 20.0 |
牛肉浸出粉 | 3.0 |
乳糖 | 10.0 |
蔗糖 | 10.0 |
去氧膽酸鈉 | 1.0 |
硫代硫酸Na | 2.3 |
檸檬酸鈉 | 1.0 |
檸檬酸鐵銨 | 1.0 |
中性紅 | 0.03 |
瓊脂 | 16.0 |
pH 7.2±0.1 25℃ | |
四、試驗(yàn)方法：
稱取本品65.2g，加熱溶解于1000ml純化水中，待冷卻至50-55℃，傾入無菌平皿，無需高壓滅菌。
五、膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基（DHL）中國藥典微生物靈敏度試驗(yàn):
按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基，接種以下質(zhì)控菌株，放置30-35℃需氧培養(yǎng)18-24小時。
注：回收率計算時，用TSA瓊脂做對照培養(yǎng)基。
質(zhì)控菌株 | 菌株編號 | 接種量(CFU) | 回收率 | 生長情況 | 其他特征 |
金黃色葡萄球菌 | CMCC26003 | 100-1000 | / | - | 抑制 |
大腸埃希氏菌 | CMCC44102 | 50-100 | ≥70% | +++ | 粉紅色菌落 |
乙型副傷寒沙門菌 | CMCC50094 | 50-100 | ≥70% | +++ | 無色透明菌落黑色中心 |
鼠傷寒沙門氏菌 | ATCC14028 | 50-100 | ≥70% | +++ | 無色透明菌落黑色中心 |
不同細(xì)菌在膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基上的生長特征：
注:本文屬海博生物原創(chuàng),未經(jīng)允許不得轉(zhuǎn)載。
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