摘要： 針對植物轉(zhuǎn)基因材料中綠色熒光蛋白（GFP）表達檢測存在操作繁瑣、易破壞樣本等問題，引入LUYOR-3415RG便攜式雙波長熒光蛋白激發(fā)光源對獼猴桃毛狀根進行活體無損篩查。該方法可在普通光環(huán)境下快速判別GFP陽性轉(zhuǎn)化體，顯著提升篩選效率，已在浙江農(nóng)林大學(xué)相關(guān)基因組學(xué)研究中得到文獻佐證。

一、背景與痛點

在作物功能基因驗證實驗中，常采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的毛狀根轉(zhuǎn)化系統(tǒng)，并以GFP作為報告基因。傳統(tǒng)檢測方式需在熒光顯微鏡下對組織切片逐一觀察，存在制樣耗時、樣本易污染或失活、大批量篩選效率低等不足。

二、解決方案——LUYOR-3415RG活體熒光篩查

研究中采用LUYOR-3415RG便攜式雙波長熒光蛋白激發(fā)光源（藍光≈488nm激發(fā)GFP，綠光可選激發(fā)DsRed/RFP），配合專用黃色濾光觀察眼鏡（如LUV-30A），操作流程如下：

• 樣品處理：獼猴桃莖段農(nóng)桿菌侵染后培養(yǎng)2～4周，待毛狀根長出。

  
  

• 活體照射：用LUYOR-3415RG藍光波段直接照射毛狀根，無需暗室及切片。

  
  

• 陽性判定：佩戴濾光眼鏡觀察，GFP陽性根顯現(xiàn)明亮綠色熒光，陰性對照無熒光信號。

  
  

• 分選利用：直接挑取熒光陽性毛狀根用于后續(xù)基因功能驗證或生化測定。

  
  

三、產(chǎn)品主要技術(shù)參數(shù)

四、典型用戶反饋

"原先做檢測需要在熒光顯微鏡下一個個篩選，現(xiàn)在我們使用LUYOR-3415RG雙波長激發(fā)光源一照便知，具體位置清晰可見，大大減少了工作繁瑣程度，為實驗提供了不少便捷。"——浙江農(nóng)林大學(xué)林學(xué)院

"用LUYOR-3415RG照射含有紅色熒光蛋白的擬南芥種子，可以很容易篩選出轉(zhuǎn)基因種子……節(jié)省大量時間，加快實驗進度。"——西南大學(xué)

"以前所有的轉(zhuǎn)GFP或RFP材料都要做Western blot篩選陽性，現(xiàn)在用激發(fā)光源照射，只挑陽性的做Western，圖可以直接留作發(fā)表用，很方便。"——廣東省農(nóng)科院蔬菜所

五、小結(jié)

LUYOR-3415RG便攜式熒光蛋白激發(fā)光源通過將熒光檢測從顯微切片轉(zhuǎn)化為活體宏觀觀察，實現(xiàn)了植物轉(zhuǎn)基因材料（毛狀根、葉片、種子等）的快速初篩與分選。其在獼猴桃功能基因組研究及多所高校、科研院所的轉(zhuǎn)基因?qū)嶒炛芯谐墒鞈?yīng)用，是分子生物學(xué)與作物遺傳改良研究中提高篩選通量的實用工具。

• 關(guān)聯(lián)文獻：Li X, Huo L, Li X, et al. Genomes of diverse Actinidia species provide insights into cis-regulatory motifs and genes associated with critical traits. BMC Biol. 2024;22:200.

  
  

• 相關(guān)產(chǎn)品：LUYOR-3415RG 便攜式雙波長熒光蛋白激發(fā)光源（兼容GFP/RFP等多熒光標記檢測）

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