如果你做的胃黏膜HE切片達到了這個標準，導師肯定就不會問你了。

那么一張好看的HE切片有哪些判斷標準呢？

我們常常說，HE切片要做到完整、清晰、干凈，膜就是膜，核就是核，細胞的組織結構要清晰可辨，有明顯的邊界。切片染色要均勻，表面沒有污漬，干凈透亮。

說的更詳細一些就是：

HE染色后細胞核呈現深藍色或藍紫色，我們在看結果時要觀察核的顏色深淺、形態(tài)大小、核質比等特征。這些是判斷細胞活性和腫瘤良惡性的重要指標。腫瘤細胞會細胞核增大、顏色變深，同時核質比增大。

細胞質在HE染色中呈現粉紅色至紅色，我們需要觀察細胞質的豐富程度、染色深淺來進行病理判斷。不同的細胞類型細胞質染色深淺會有差異，嗜酸性顆粒染色較深。

除了細胞核和細胞質，組織中的其它成分在HE染色結果中顏色和形態(tài)大小也會存在差異，詳細內容可以查看以下表格。

在了解了好的HE切片樣子后，我們再來看看那些異常的實驗結果吧！

接下來我們就詳細的講一講這些翻車現場。

1整體偏藍

HE切片整體偏藍，細胞核甚至被染成黑色，背景深，看不清結構。

出現這種結果的原因可能是切片在蘇木精中泡的太久或者染液太濃，當然，也可能是分化時間短或切片有點厚。

針對這種情況，我們可以縮短蘇木精的染色時間1-2min，適當延長1%鹽酸酒精分化的時間5-10s。建議分化在顯微鏡下操作，當核質染色分明后再進行下一步。伊紅染液也有使用時長，建議超過兩周的直接扔。新鮮的伊紅染液浸泡1-2min足矣。

2整體偏紅

切片整體偏紅，細胞核顏色淺，細胞質也談，核質對比度差。

原因無外乎：蘇木精染色不足、分化超時、伊紅染過了。面對這種結果，我們首先核查一下蘇木精的使用記錄，建議2-4周更換一次。蘇木精的染色時間可以延長2-4min看看結果。分化的時間一定要嚴格控制，別超過15s。伊紅染色后快速用水沖洗，防止染色過度。

3核非藍色

細胞核可能是棕紅、蒼白或顏色太深。

有時候我們會將細胞核染成棕紅色，究其原因是蘇木精氧化失效或返藍不夠。建議我們在染色之前看看蘇木精液面有沒有氧化膜。氧化膜是有明顯金屬光澤的藍紫色（或紫紅色）薄膜，也常被稱做“金屬膜”或“彩虹膜”。如果有氧化膜建議使用前進行過濾。

蘇木精失效或分化超時可能會造成細胞核蒼白。舊液和洗液不能混合使用，換液就要整瓶換。分化不足會造成細胞核顏色過深，甚至將胞漿染成藍色。建議重新進行一次分化，增加10s，并在顯微鏡下觀察直至胞漿脫色。

4染色不均

切片出現花斑、邊緣中心深淺不一結果。

HE切片染色不均可能是由多個原因造成的，比如切片脫蠟不徹-底、片子薄厚不均等操作細節(jié)。切片機使用新的刀片，確保切片厚度維持在3-5μm。每次二甲苯的脫蠟時間在15min。染色過程中可以輕微晃動切片，確保試劑均勻染色。

5切片脫落

切片脫落、污染、有氣泡等問題。

淋巴結、脾、骨髓等含血較多的組織容易脫片。這些組織在制備切片時，脫水透明要做透，切片厚度確保3-5μm。

有個偏方，據說對發(fā)脆發(fā)硬的組織有用，大家不妨試一下：棉簽蘸5%氨水或2%冰醋酸，擦組織表面10到15秒，丟進冰水混合物泡1分鐘再切。鈣化、骨組織這類硬骨頭，能明顯改善。

6切片霧化

HE切片霧化會造成切片整體或局部呈現出半透明的“朦朧感”，組織結構和細胞細節(jié)模糊不清。肉眼可見切片表面有一層白色或灰白色薄霧，仿佛是隔著一層磨砂玻璃看東西。顯微鏡下，整個視野模糊不清，無法區(qū)分細胞核和細胞質。

切片霧化的主要原因是脫水不徹-底。我們在實驗過程中，要確保乙醇處理的順序和時間正確?？梢詤⒖歼@樣的操作流程：70%乙醇10-20s，80%乙醇10-20s，95%乙醇1-2min，無水乙醇2-3min。

脫蠟不徹-底，切片會形成白色斑點。所以我們一直強調，脫蠟要徹-底，嚴格按照流程操作。義翹神州經過多年實踐，形成了一套成熟的步驟，大家可以嘗試一下：兩次二甲苯，每次15min，無水乙醇2min，95%酒精2min，80%酒精2min，70%酒精2min。

總結一下

控制染色時間、分化時間，使用新鮮染液，并結合顯微鏡觀察，是避免HE染色翻車的核心技巧。真正的技術，不是我們背下的實驗參數，而是對變量的敏感度。

當我們能夠從一張“藍的發(fā)紫”的片子里，瞬間找到是分化時間的問題還是染液失效時，我們就真正的熟練掌握HE染色技術了，再也不怕導師半夜的微信問詢了。