動物組織基DNA因組提取試劑盒（磁珠法）

產(chǎn)品貨號：BA1990

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品介紹:

試劑盒采用磁珠法來提取小鼠不同組織的基因組DNA，磁珠與DNA的特異性結(jié)合使得提取的DNA純度高、 濃度大，而且操作時間短，不需要使用其他儀器。使用本試劑盒提取的基因組DNA可適用于各種常規(guī)的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，包括酶切、PCR、測序、連接和轉(zhuǎn)化等試驗(yàn)。本試劑盒無需使用苯、氯仿等有毒試劑，操作安全。

產(chǎn)品組成：

注意：使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶體上的標(biāo)簽。

實(shí)驗(yàn)步驟（僅供參考）：

1. 稱取小鼠組織23-26mg放于1.5mL離心管中，在離心管中加入200μL溶液A，然后用研磨杵將組織研磨。

2. 向離心管中加入20μL的蛋白酶K溶液（20mg/mL），充分震蕩混勻，65℃放置1-3h，取出后向離心管中加入20μL RNase A（10mg/ mL），吹吸混勻后室溫放置20min。

3. 向離心管中加入220μL無水乙醇和15μL羥基磁珠（磁珠使用前需渦旋震蕩混勻），渦旋震蕩混勻后室溫放置10min，每隔2-3min顛倒混勻一次。

4. 將離心管放于磁力架上吸附5min，待磁珠聚集后將液體吸出。

5. 向離心管中加入600μL漂洗液（使用前請確認(rèn)是否已加入無水乙醇），渦旋震蕩混勻后放于立即磁力架上吸附，待磁珠聚集液體澄清后將液體吸出。

6. 重復(fù)操作步驟5兩次。

7. 將離心管置于磁力架上開蓋放置5min，以除去多余的乙醇，靜置期間如果離心管底部有多余的液體，用移液槍將其吸出。

8. 將離心管從磁力架上取下，置于普通離心管架上，向離心管中加入100-200μL洗脫液，用移液槍將磁珠與洗脫液吹吸混勻，65℃放置5min，之后放于磁力架上吸附，待磁珠聚集液體澄清后將液體吸到干凈的離心管中（若吸取的液體出現(xiàn)渾濁，可以進(jìn)行離心），該液體即為提取的基因組DNA，提取的DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃。

注意事項(xiàng)：

1. 磁珠置于2-8℃冰箱保存。冷凍，干燥和離心等操作會引起磁珠團(tuán)聚，不易于重懸和分散，并影響磁珠表面功能基團(tuán)的化學(xué)活性。

2. 盡量使用新鮮的小鼠組織進(jìn)行基因組DNA的提取。

3. 在提取小鼠脾的基因組DNA時，加入洗脫液溫浴后會變粘稠，可適當(dāng)增加（如再向離心管中加入100μL的洗脫液）洗脫液的體積進(jìn)行離心。

4. 洗脫液的體積不應(yīng)少于100μL，體積過少會影響提取效率，而且洗脫液的pH值也會影響洗脫效率，如果需要用水洗脫，應(yīng)保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)至此范圍)，pH值低于7.0會降低洗脫效率；DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃，以防DNA降解。

5. DNA濃度及純度檢測：提取的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測濃度與純度，DNA應(yīng)在OD₂₆₀處有顯著吸收峰，OD₂₆₀值為1相當(dāng)于大約50μg/mL雙鏈DNA、40μg/mL單鏈DNA。OD₂₆₀/OD₂₈₀比值應(yīng)為1.7-1.9，如果洗脫時不使用洗脫緩沖液，而使用去離子水，比值會偏低，因?yàn)?/span>pH值和離子存在會影響光吸收值，但并不表示純度低。

保存：2-8℃（注：RNase A和蛋白酶K以附件形式，低溫運(yùn)輸，到貨后-20℃保存。）

動物組織基DNA因組提取試劑盒（磁珠法）

產(chǎn)品貨號：BA1990

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品介紹:

試劑盒采用磁珠法來提取小鼠不同組織的基因組DNA，磁珠與DNA的特異性結(jié)合使得提取的DNA純度高、 濃度大，而且操作時間短，不需要使用其他儀器。使用本試劑盒提取的基因組DNA可適用于各種常規(guī)的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，包括酶切、PCR、測序、連接和轉(zhuǎn)化等試驗(yàn)。本試劑盒無需使用苯、氯仿等有毒試劑，操作安全。

產(chǎn)品組成：

注意：使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶體上的標(biāo)簽。

實(shí)驗(yàn)步驟（僅供參考）：

1. 稱取小鼠組織23-26mg放于1.5mL離心管中，在離心管中加入200μL溶液A，然后用研磨杵將組織研磨。

2. 向離心管中加入20μL的蛋白酶K溶液（20mg/mL），充分震蕩混勻，65℃放置1-3h，取出后向離心管中加入20μL RNase A（10mg/ mL），吹吸混勻后室溫放置20min。

3. 向離心管中加入220μL無水乙醇和15μL羥基磁珠（磁珠使用前需渦旋震蕩混勻），渦旋震蕩混勻后室溫放置10min，每隔2-3min顛倒混勻一次。

4. 將離心管放于磁力架上吸附5min，待磁珠聚集后將液體吸出。

5. 向離心管中加入600μL漂洗液（使用前請確認(rèn)是否已加入無水乙醇），渦旋震蕩混勻后放于立即磁力架上吸附，待磁珠聚集液體澄清后將液體吸出。

6. 重復(fù)操作步驟5兩次。

7. 將離心管置于磁力架上開蓋放置5min，以除去多余的乙醇，靜置期間如果離心管底部有多余的液體，用移液槍將其吸出。

8. 將離心管從磁力架上取下，置于普通離心管架上，向離心管中加入100-200μL洗脫液，用移液槍將磁珠與洗脫液吹吸混勻，65℃放置5min，之后放于磁力架上吸附，待磁珠聚集液體澄清后將液體吸到干凈的離心管中（若吸取的液體出現(xiàn)渾濁，可以進(jìn)行離心），該液體即為提取的基因組DNA，提取的DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃。

注意事項(xiàng)：

1. 磁珠置于2-8℃冰箱保存。冷凍，干燥和離心等操作會引起磁珠團(tuán)聚，不易于重懸和分散，并影響磁珠表面功能基團(tuán)的化學(xué)活性。

2. 盡量使用新鮮的小鼠組織進(jìn)行基因組DNA的提取。

3. 在提取小鼠脾的基因組DNA時，加入洗脫液溫浴后會變粘稠，可適當(dāng)增加（如再向離心管中加入100μL的洗脫液）洗脫液的體積進(jìn)行離心。

4. 洗脫液的體積不應(yīng)少于100μL，體積過少會影響提取效率，而且洗脫液的pH值也會影響洗脫效率，如果需要用水洗脫，應(yīng)保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)至此范圍)，pH值低于7.0會降低洗脫效率；DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃，以防DNA降解。

5. DNA濃度及純度檢測：提取的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測濃度與純度，DNA應(yīng)在OD₂₆₀處有顯著吸收峰，OD₂₆₀值為1相當(dāng)于大約50μg/mL雙鏈DNA、40μg/mL單鏈DNA。OD₂₆₀/OD₂₈₀比值應(yīng)為1.7-1.9，如果洗脫時不使用洗脫緩沖液，而使用去離子水，比值會偏低，因?yàn)?/span>pH值和離子存在會影響光吸收值，但并不表示純度低。

保存：2-8℃（注：RNase A和蛋白酶K以附件形式，低溫運(yùn)輸，到貨后-20℃保存。）