一、環(huán)境與硬件準備

1. 環(huán)境控制

• 溫度：20–25℃，波動≤±1℃；濕度：40%–60%，避免結露。

• 遠離振動源（如離心機、風機）、強電磁場與直吹氣流，臺面穩(wěn)固防滑，機械泵獨立放置，避免與儀器接觸傳振。

• 電源：配 UPS 防斷電；主斷路器置On，電子服務開關設Operating ModeThermo Fisher。

2. 氣體與真空

• 氮氣：純度≥99.999%，壓力 800±30 kPa（8±0.3 bar），每日檢漏，鋼瓶留余壓≥500 kPa。

• 真空啟動：開機抽真空≥2 小時，UHV 低于 10?? mbar；Bakeout（12 小時）后，F(xiàn)T 分析器穩(wěn)定≥8 小時，真空達 10?1? mbar 級再測試。

• 頻繁開關機：短期（1–3 天）保持真空；長期（>1 周）關機需按規(guī)程放空，保護渦輪泵。

二、開機與校準（數據準確核心）

1. 開機流程

• 上電后啟動系統(tǒng)，機械泵→渦輪泵→真空建立；斷電恢復后若已放空，需重新 Bakeout。

• 進入On 模式至少 90 分鐘后再校準，避免直接從 Off 模式校準Thermo Fisher。

2. 校準要求

• 日常：每日做質量校準；受控環(huán)境可每周 1 次；確保 24 小時內質量偏差＜3 ppm（外標）、1 ppm（內標，鎖質量）Thermo Fisher Scientific。

• 月度：系統(tǒng)校準（含四極桿隔離質量與分辨率）Thermo Fisher Scientific。

• 調諧合格指標：

• 正離子：NL＞1.0e8、IT＜5 ms，特征峰（m/z 195、524、922–1822）清晰。

• 負離子：NL＞1.0e8、IT＜5 ms，特征峰（m/z 265、514、1280–1780）清晰Thermo Fisher。

• TIC 波動＜10%（穩(wěn)定噴霧關鍵）Thermo Fisher Scientific。

3. 校準操作

• 正 / 負離子模式分別用對應校準液（賽默飛貨號 88323/88324），以 5 μL/min 輸注，確認噴霧穩(wěn)定再執(zhí)行Thermo Fisher。

• 校準后用Evaluate 功能驗證，不合格需重復校準Thermo Fisher。

三、樣品與進樣規(guī)范

1. 樣品制備

• 濃度：單樣品≤10 μg/mL，過高易污染離子源。

• 溶劑：優(yōu)選色譜級甲醇 / 水；難溶物先用二氯甲烷等溶解，再用甲醇 / 水稀釋；禁用強酸強堿、難揮發(fā)溶劑（如 DMSO、DMF、表面活性劑）。

• 過濾：配置后經 0.22 μm 濾膜過濾，去除不溶物。

• 體積：樣品瓶體積≥0.5 mL；低于 0.5 mL 需用內插管，避免空針。

2. 進樣操作

• 使用匹配規(guī)格樣品瓶、瓶蓋與預切割墊，避免損壞進樣針；瓶蓋適度擰緊，過緊易引發(fā)負壓空針。

• 進樣前檢查管路無氣泡、無漏液，流速與梯度符合方法要求。

四、方法與參數設置

1. 基礎參數

• 掃描模式：根據需求選 Full MS、SIM、AIF-MS/MS 等；分辨率設 35,000 及以上時，正負掃描循環(huán)約 1 秒Thermo Fisher Scientific。

• AGC 目標：過高易導致空間電荷 / 聚束效應，過低則靈敏度下降；參考默認模板，按需微調Thermo Fisher Scientific。

• 注射時間（IT）：與 AGC 聯(lián)動，避免過長導致污染或信號飽和。

• 極性切換：支持，切換時間約 250 ms；正負同時掃描時，需匹配循環(huán)時間需求Thermo Fisher Scientific。

2. 離子源設置（H-ESI 為例）

• 鞘氣（Sheath Gas）：正離子 5–10，負離子 7–12；輔助氣（Aux Gas）正離子 2、負離子適量，以 TIC 穩(wěn)定為準Thermo Fisher Scientific。

• 噴霧電壓：正離子約 4 kV，噴霧電流～0.9 μA；毛細管溫度 320℃，S-lens RF 水平 50（參考值，按需優(yōu)化）Thermo Fisher。

• 離子傳輸管（ITT）：根據污染頻率更換，信號下降 / 背景升高 / 源壓異常時及時清潔或更換Thermo Fisher Scientific。

五、日常維護與污染控制

1. 日常清潔

• 每日：清潔離子源腔體、噴霧針、樣品盤；檢查毛細管入口無堵塞。

• 每周：清潔樣品瓶架、進樣針；檢查氣路密封。

• 離子源清潔：取下腔體、加熱模塊、毛細管，用 50% 甲醇水超聲 15 分鐘，晾干后安裝。

2. 定期維護

六、關機與數據管理

1. 關機規(guī)范

• 分析結束：推薦留Standby 模式，不直接關機，保障下次質譜精度Thermo Fisher。

• 長期關機：按規(guī)程放空真空，關閉氮氣與電源，做好儀器防塵保護。

2. 數據安全

• 數據存至課題組專屬文件夾，避免覆蓋；U 盤拷貝前先格式化，防止病毒或格式沖突。

• 原始文件保留，定期備份，命名規(guī)范（含日期、樣品、批次）。

七、安全與應急

• 高壓風險：操作時禁止觸碰離子源、高壓接口；維護前斷電并釋放靜電。

• 真空泄漏：若 Tune 顯示壓力異常，立即停機檢漏，嚴禁帶壓操作。

• 污染應急：信號驟降 / 背景升高時，優(yōu)先清潔離子源與 ITT；必要時聯(lián)系賽默飛工程師。

八、關鍵禁忌