NAD激酶(NADK)檢測
NAD激酶,英文全稱為NAD kinase,簡稱NADK,對應(yīng)的酶學編號為EC 2.7.1.23,是一類廣泛分布于生物體內(nèi)的關(guān)鍵代謝酶,在動物機體、各類植物、微生物以及體外培養(yǎng)的細胞中均有存在,是維持生物體內(nèi)輔酶平衡重要的物質(zhì)。
截至目前,NADK是生物體內(nèi)已發(fā)現(xiàn)的、唯·一能夠催化NAD+發(fā)生磷酸化反應(yīng),進而生成NADP+的酶。該酶的催化底物具有專一性,主要作用于NAD(H),反應(yīng)過程中可選用ATP,或是無機多聚磷酸[poly(P)]作為磷?;w,完成磷酸化修飾,最終生成對應(yīng)的NADP(H)。這一催化反應(yīng)具備高度特異性,也是生物體內(nèi)合成NADP(H)的核心途徑,暫無其他酶類可替代該功能。
生理功能
NADPH生成與代謝調(diào)控:NADPH是細胞中重要的還原力載體,參與脂肪酸合成、膽固醇合成、核苷酸合成、抗氧化反應(yīng)(如谷胱甘肽還原、硫氧還蛋白還原)等過程。NADK通過生成NADP?,為NADPH的再生提供基礎(chǔ),維持細胞內(nèi)的氧化還原平衡。
細胞增殖與生長:在細胞增殖過程中,NADPH是合成核酸、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等生物大分子所必需的。NADK活性影響NADPH水平,進而影響細胞周期進展和增殖能力,例如在腫瘤細胞中,NADK表達異常可能影響細胞生長和存活。
代謝通路調(diào)節(jié):參與嘌呤代謝、葉酸代謝等通路,通過調(diào)節(jié)NADP?/NADPH比例,影響相關(guān)酶的活性,如影響AICAR(5-氨基咪唑-4-甲酰胺核糖核苷酸)的生成,進而激活A(yù)MPK信號通路,調(diào)節(jié)細胞代謝和能量平衡。
NADK作為生物體內(nèi)唯·一催化NAD+磷酸化的關(guān)鍵酶,掌控著NADP(H)的合成與輔酶平衡,對生命體正常代謝意義重大。NAD激酶(NADK)檢測試劑盒利用NADK催化NAD?磷酸化生成NADP?,NADP?可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)還原為NADPH,NADPH在340nm處有特征吸收峰。通過測定340nm處吸光度的增加速率,可反映NADK活性。
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