抗體藥物中的糖鏈對抗原性、生物活性、高級結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性均有很大的影響，因此直接關(guān)系到藥品的安全性和有效性。由于培養(yǎng)工藝條件的變化會導(dǎo)致抗體藥物中的糖鏈分布不均勻，所以在生產(chǎn)階段對糖鏈的管理非常重要?，F(xiàn)階段雖然在日本藥典中并

未收錄糖鏈的測定方法等內(nèi)容，但在相關(guān)領(lǐng)域有關(guān)于介紹測定方法的需求。 

本文為您介紹使用超快速液相色譜儀“Nexera X2”和高靈敏度熒光檢測器“RF-20AXS” 對抗體藥物中的糖鏈進(jìn)行分析的方法。該測定方法使用了Core-Shell 型快速分析液相色譜柱“AerisTM PEPTIDE XB-C18”。 因為該色譜柱用于分離分子量較小的肽或進(jìn)行肽圖分析，所以可有效分離抗體藥物中所含的糖鏈與雜質(zhì)

糖鏈分析中檢測器的靈敏度與線性

使用PA 化糖鏈（PA-Sugar Chain009  Takara Bio 株式會社生產(chǎn)），確認(rèn)了熒光檢測器“RF-20AXS”的靈敏度與線性。表1 中顯示其分析條件。 圖1 為使用熒光檢測器“RF-20AXS”和舊機(jī)型“RF-10AXL”，對PA 化糖鏈10 fmol（注入5 nmol/L，2 μL）分析中的靈敏度進(jìn)行比較的譜圖。結(jié)果顯示，熒光檢測器“RF-20AXS”的噪音較低，并能取得良好的S/N。圖 2 為使用熒光檢測器“RF-20AXS”，1～100 fmol（注入0.5～50 nmol/L，2 μL）的標(biāo)準(zhǔn)曲線。 由圖可知，熒光檢測器“RF-20AXS”也適合測定主成分以外的微量雜質(zhì)

行肽圖分析，所以可有效分離抗體藥物中所含的糖鏈與雜質(zhì)