ODS填料的操作要點(diǎn)與維護(hù)
ODS填料是一種以十八烷基硅烷鍵合硅膠為基質(zhì)的高效液相色譜(HPLC)固定相填料,具有高疏水性、高表面鍵合覆蓋率和優(yōu)異的化學(xué)穩(wěn)定性,在生物化學(xué)和藥物分析工作中應(yīng)用較為廣泛,可用于分離藥物、天然產(chǎn)物、農(nóng)用化學(xué)品、維生素等多種物質(zhì),也是中藥制劑定量分析中常用的填料。
ODS填料具有較高的碳含量,一般在10%-20%左右,這使其對(duì)各種類型的生物大分子有更強(qiáng)的適應(yīng)能力。其使用 pH 范圍通常為2-8。此外,ODS 填料粒徑分布較窄,機(jī)械強(qiáng)度高,能獲得高分離度的優(yōu)質(zhì)峰形。
操作要點(diǎn)與維護(hù):
1、裝填技術(shù)
勻漿法:使用與顆粒密度相近的溶劑制備勻漿,避免沉降分級(jí)。
壓力控制:裝填壓力5-12 MPa,確保柱床均勻。
流速優(yōu)化:裝填流速為使用流速的2-3倍,減少液壓沖擊。
2、流動(dòng)相處理
過(guò)濾脫氣:流動(dòng)相需經(jīng)0.22μm或0.45μm濾膜過(guò)濾,超聲脫氣10-20分鐘。
沖洗順序:先用甲醇沖洗10-20分鐘,再切換至測(cè)試流動(dòng)相(如含緩沖鹽時(shí),需用重蒸水過(guò)渡)。
3、清洗與保存
常規(guī)清洗:使用100%甲醇或丙酮沖洗10個(gè)柱體積以上。
頑固污染:采用75%丙酮:25%異丙醇或100%乙酸乙酯。
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