Gibco II型膠原酶的使用步驟及儲存事項(xiàng)
Gibco II 型膠原酶除了具有高活性外,還含有較高的梭菌蛋白酶活性,在消化心臟、骨、甲狀腺、軟骨和肝臟等組織時(shí)表現(xiàn)出色。同時(shí),它在生理溫度和 pH 條件下具有良好的解離能力,無需機(jī)械攪拌或特殊設(shè)備。此外,該酶還含有其他蛋白酶、多糖酶和脂酶,能夠有效水解結(jié)締組織和上皮組織細(xì)胞外基質(zhì)內(nèi)的其他成分。
優(yōu)勢:
高效解離:針對膠原的特異性切割能力,確保組織解離*底。
溫和條件:生理溫度和pH值下操作,減少細(xì)胞損傷。
多組織適用性:支持多種組織類型的細(xì)胞解離,應(yīng)用廣泛。
Gibco II 型膠原酶的使用方法與儲存事項(xiàng):
溶解與稀釋:
推薦使用Hanks' Balanced Salt Solution(HBSS)含鈣和鎂的溶液進(jìn)行溶解,確保酶活性穩(wěn)定。
可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求稀釋至不同濃度(如0.5-2.5mg/mL用于組織解離,1-2mg/mL用于軟骨消化)。
操作步驟:
將組織剪成小塊,加入膠原酶溶液,37℃水浴或孵箱中振搖消化。
消化時(shí)間因組織類型而異(如致密結(jié)締組織需4-48小時(shí),易消化組織僅需15-45分鐘)。
消化后通過離心、過濾去除未消化組織,用培養(yǎng)液漂洗細(xì)胞,制成懸液接種。
儲存與運(yùn)輸:
儲存條件:2°C至8°C,避光保存,確保酶活性長期穩(wěn)定。
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