PCR實(shí)驗(yàn)耗材怎樣選擇？

    關(guān)于PCR實(shí)驗(yàn)耗材怎樣選擇，很多人可能還不是很了解，Aiscenbio技術(shù)小編為您簡(jiǎn)單介紹如下：

    首先，我們羅列一下，對(duì)于PCR實(shí)驗(yàn)操作有哪幾種影響因素？大家通常會(huì)聯(lián)想到的無非是獲得的DNA/RNA的品質(zhì)、引物的特異性，以及逆轉(zhuǎn)錄的效率、甚至包括DNA聚合酶的增長(zhǎng)度、保真度等狀況，但較少一些人會(huì)聯(lián)想到實(shí)驗(yàn)耗材的選取，有可能也會(huì)直接影響到您的實(shí)驗(yàn)操作結(jié)果。

    PCR實(shí)驗(yàn)耗材按實(shí)驗(yàn)類型推薦耗材

    1.?常規(guī)PCR?

    ?推薦耗材?：0.2mL透明八聯(lián)管（低容設(shè)計(jì)）

    ?優(yōu)勢(shì)?：熱傳導(dǎo)快，適配大多數(shù)PCR儀，操作便捷

    ?品牌型號(hào)?：愛賽因0.2ml平蓋八排管

    2.?熒光定量PCR（qPCR）?

    ?推薦耗材?：白色低容96孔板+光學(xué)級(jí)粘性封板膜FYJ130S3780A

    ?原因?：白色壁面增強(qiáng)熒光反射，提升信噪比；光學(xué)膜保障底部讀值準(zhǔn)確性

    3.高通量/自動(dòng)化實(shí)驗(yàn)?

    ?推薦耗材?：ANSI/SBS標(biāo)準(zhǔn)尺寸耗材+卷式鋁箔熱封膜FA25SR80C

    ?適配設(shè)備?：Agilent、4TI、Azenta等全自動(dòng)封膜儀

    ?推薦型號(hào)?：FA35SR80C/耐DMSO卷膜（寬115mm）

    PCR實(shí)驗(yàn)耗材怎樣選擇呢？

    第一步，我們要確認(rèn)做的是哪種PCR實(shí)驗(yàn)。按照檢測(cè)方法的不同，可以分為熒光定量PCR法和普通PCR法。熒光定量PCR法是實(shí)時(shí)檢測(cè)熒光信號(hào)的，不僅對(duì)密封性和導(dǎo)熱性有要求，還對(duì)避光性與透光性有一定的要求，而普通PCR法一般是終點(diǎn)PCR跑膠法測(cè)定，因而在選擇耗材時(shí)只要關(guān)注密封性和導(dǎo)熱性即可。

    第二步，即確認(rèn)好了實(shí)驗(yàn)操作類型后，我們就可以選擇耗材了。如上文可知，避光性與透光性，導(dǎo)熱性、密封性等因素是我們要重點(diǎn)關(guān)注的，那么，我們?cè)倭私庖幌聻槭裁匆P(guān)注這些性能。

    1）避光性是針對(duì)熒光定量來說的，若在實(shí)驗(yàn)操作過程中沒注意避光，帶有熒光的試劑被過度消耗，那就會(huì)直接影響擴(kuò)增效率，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果不夠準(zhǔn)確；

    2）透光性也是針對(duì)熒光定量而言的，它具有定量實(shí)時(shí)的特點(diǎn)，耗材本身的透光性高低關(guān)系到檢測(cè)的熒光信號(hào)的多少，若耗材的透光性太低，應(yīng)檢測(cè)到的信號(hào)檢測(cè)不到，也會(huì)導(dǎo)致對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的誤判；

    3）導(dǎo)熱性越好越均勻，PCR的速度就越快，相應(yīng)的準(zhǔn)確度也更高；

    4）密封性方面，產(chǎn)物揮發(fā)得越少，得到的產(chǎn)物就越多，相應(yīng)的，氣溶膠產(chǎn)生得也更少，這樣對(duì)于下一輪實(shí)驗(yàn)操作的污染也就越少，這意味著假陽性的產(chǎn)生率也越低。

    注：以上僅供參考，不作為實(shí)驗(yàn)依據(jù)，具體請(qǐng)聯(lián)系品牌或技術(shù)老師!

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