什么是ELISA？

時(shí)間：2025/10/9閱讀：785

說(shuō)清楚四種ELISA及其應(yīng)用

什么是ELISA？

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）是一種基于抗原-抗體特異性反應(yīng)的免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)，用于對(duì)樣本中特定物質(zhì)的進(jìn)行定性和定量分析，也用于抗體開(kāi)發(fā)過(guò)程中的抗體篩選，是抗體高通量篩選的基石。

ELISA技術(shù)的核心主要有兩點(diǎn)：抗體與抗原的特異性結(jié)合和酶標(biāo)信號(hào)放大效應(yīng)。

常見(jiàn)的ELISA類型主要有四種：直接ELISA、間接ELISA、雙抗夾心ELISA和競(jìng)爭(zhēng)ELISA。

直接法ELISA（Direct ELISA）

直接法ELISA是很簡(jiǎn)單的ELISA，通過(guò)酶標(biāo)一抗直接與靶標(biāo)抗原結(jié)合，顯示信號(hào)；對(duì)直接標(biāo)記的一抗要求高，無(wú)需二抗，一般用于初步篩選和快速檢測(cè)。

直接法雖然速度快，但是通常情況下會(huì)產(chǎn)生高背景、檢測(cè)靈敏度較低、容易產(chǎn)生非特異性結(jié)合；因此主要用于初步篩選和快速檢測(cè)。

間接法ELISA（Indirect ELISA）

間接法ELISA先用一抗識(shí)別并結(jié)合靶標(biāo)抗原，然后通過(guò)酶標(biāo)二抗產(chǎn)生并放大信號(hào)來(lái)檢測(cè)靶標(biāo)樣品；與直接法相比，多了酶標(biāo)二抗的孵育結(jié)合，時(shí)間上要比直接法長(zhǎng)，但是檢測(cè)靈敏度提高了，不需要直接標(biāo)記的一抗，對(duì)一抗的要求也沒(méi)有那么高。

檢測(cè)法主要用于病原體抗體檢測(cè)和診斷，疫苗接種后抗體評(píng)價(jià)，以及抗體開(kāi)發(fā)過(guò)程中抗體的篩選。

雙抗夾心ELISA（Sandwich ELISA）

雙抗夾心法是指通過(guò)捕獲抗體和檢測(cè)抗體分別結(jié)合同一個(gè)抗原的不同表位，形成“雙抗夾心三明治"結(jié)構(gòu)，捕獲抗體抓取樣品中的靶標(biāo)抗原，酶標(biāo)檢測(cè)抗體產(chǎn)生信號(hào)，計(jì)算靶標(biāo)抗原的含量。

雙抗夾心ELISA大分子檢測(cè)中常用的方法，它的檢測(cè)特性好、靈敏度高，適合用于復(fù)雜樣品中靶標(biāo)蛋白的檢測(cè)，在體外診斷、科研樣品檢測(cè)中被廣泛地應(yīng)用；它幾乎是檢測(cè)低豐度靶標(biāo)蛋白的金標(biāo)準(zhǔn)方法。

競(jìng)爭(zhēng)法ELISA（Competitive ELISA）

競(jìng)爭(zhēng)法ELISA是指通過(guò)待檢測(cè)抗原與標(biāo)記抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合有限抗體分子，信號(hào)強(qiáng)度與待檢測(cè)抗原濃度成反比（待測(cè)抗原濃度越高，信號(hào)越?。淮郎y(cè)抗原濃度越低，信號(hào)越高）的一種ELISA技術(shù)，主要用于檢測(cè)小分子抗原。

競(jìng)爭(zhēng)法ELISA一般是將抗體固定在固相載體上，封閉之后，同時(shí)加入待測(cè)樣品（含待測(cè)抗原）和酶標(biāo)抗原（已知濃度），兩者競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合有限的包被抗體，待測(cè)抗原含量越高，酶標(biāo)抗原結(jié)合越少，信號(hào)就越弱。

競(jìng)爭(zhēng)法ELISA適合用于小分子抗原的檢測(cè)，主要用于食品安全藥物殘留、抗生素殘留、霉菌毒素檢測(cè)，體外診斷，環(huán)境檢測(cè)等。

這里順便說(shuō)一下，競(jìng)爭(zhēng)法ELISA也可以包被抗原，用來(lái)檢測(cè)樣品中抗體的濃度。

娜連生物總結(jié)：常見(jiàn)的ELISA主要有四種：直接法ELISA、間接法ELISA、雙抗夾心法ELISA和競(jìng)爭(zhēng)法ELISA，雙抗夾心ELISA主要用于蛋白抗原的檢測(cè)，競(jìng)爭(zhēng)法ELISA主要用于小分子的檢測(cè)，直接法ELISA和間接法ELISA主要用于初篩檢測(cè)和抗體篩選。

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