一、操作前準(zhǔn)備
環(huán)境檢查:確認(rèn)工作臺(tái)平穩(wěn)、防震、防塵、防潮;電源電壓為220V±10%。
設(shè)備檢查:檢查目鏡、物鏡、載物臺(tái)、光源及調(diào)焦旋鈕是否完好,鏡頭無灰塵、無油污。
試樣準(zhǔn)備:試樣需經(jīng)磨制、拋光、浸蝕,觀察面清潔、干燥、無殘留浸蝕劑;倒置顯微鏡觀察面朝下,正置顯微鏡觀察面朝上。
二、開機(jī)與光源調(diào)整
連接電源:將顯微鏡光源插頭接入低壓變壓器(6~8V),再將變壓器接入220V電源;嚴(yán)禁直接插220V。
打開光源:開啟電源開關(guān),調(diào)節(jié)亮度旋鈕至適中(低倍50%亮度、高倍≤20%),避免過亮或忽明忽暗。
光路校準(zhǔn)(柯勒照明):
縮小視場(chǎng)光闌,調(diào)焦至試樣清晰。
調(diào)節(jié)聚光鏡高度,使光闌邊緣清晰聚焦。
開大視場(chǎng)光闌至充滿視場(chǎng),調(diào)整孔徑光闌至物鏡NA值的70%,平衡分辨率與景深。
三、安裝目鏡與物鏡
安裝目鏡:選擇合適目鏡(如10×),插入目鏡筒并固定。
選擇物鏡:從低倍(如5×、10×)開始,轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器將物鏡對(duì)準(zhǔn)光路,動(dòng)作輕緩。
四、放置試樣
將試樣觀察面朝下(倒置)/朝上(正置),置于載物臺(tái)中心,用壓片固定。
調(diào)整載物臺(tái)X/Y軸,使試樣觀察區(qū)域?qū)?zhǔn)物鏡中心。
五、調(diào)焦操作(核心步驟)
粗調(diào)焦(低倍):
轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)旋鈕,下降載物臺(tái)使物鏡與試樣間距約2~3mm(不接觸)。
目鏡觀察,緩慢上升載物臺(tái),直至視野出現(xiàn)模糊組織。
微調(diào)焦:轉(zhuǎn)動(dòng)微調(diào)旋鈕,至圖像最清晰;切換高倍物鏡(40×、100×)時(shí),僅用微調(diào),防止鏡頭碰撞。
高倍/油鏡(100×):
40×清晰后,轉(zhuǎn)100×物鏡,微調(diào)至清晰。
油鏡需在試樣表面滴香柏油,使物鏡鏡頭浸入油中,微調(diào)對(duì)焦;使用后立即用鏡頭紙擦凈油跡。
六、觀察與調(diào)整
移動(dòng)載物臺(tái):調(diào)節(jié)X/Y軸旋鈕,觀察試樣不同區(qū)域,找代表性組織。
優(yōu)化成像:調(diào)整孔徑光闌、視場(chǎng)光闌及濾光片,提升對(duì)比度與清晰度。
圖像采集(選配):連接相機(jī),設(shè)置曝光、白平衡,拍攝并保存圖像。
七、關(guān)機(jī)與整理
復(fù)位設(shè)備:將載物臺(tái)降至低,物鏡轉(zhuǎn)至低倍位,亮度調(diào)至最小。
關(guān)閉電源:先關(guān)光源開關(guān),再拔電源插頭;油鏡需清潔鏡頭。
清潔保養(yǎng):用鏡頭紙擦拭目鏡、物鏡;試樣取下,臺(tái)面清潔;蓋上防塵罩,冷卻后再蓋。
記錄:填寫使用記錄本,注明使用時(shí)間、設(shè)備狀態(tài)及異常情況。
八、關(guān)鍵注意事項(xiàng)
防碰撞:調(diào)焦時(shí)物鏡嚴(yán)禁接觸試樣;切換物鏡前,確保載物臺(tái)中心與物鏡中心對(duì)齊。
防污染:勿用手觸摸鏡頭;鏡頭臟污用鏡頭紙蘸無水酒精-乙醚混合液(1:1)輕擦。
光源保護(hù):亮度適中,避免長(zhǎng)時(shí)間高亮度使用;關(guān)機(jī)前調(diào)至最暗。
油鏡專用:100×油鏡僅用香柏油,使用后立即清潔,防止腐蝕鏡頭鍍膜。
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