
在細胞培養(yǎng)實驗中,不少科研人都會遇到胎牛血清出現(xiàn)沉淀、析出的情況。看著渾濁、有絮狀物的血清,直接丟掉太浪費,繼續(xù)用又擔心影響細胞狀態(tài)。本文一次性講清胎牛血清析出的原因、不同沉淀的處理方式,以及到底還能不能用,幫你安心用血清、不浪費、不影響實驗。
胎牛血清出現(xiàn)沉淀、析出,并不是血清變質,多為成分物理狀態(tài)變化導致,主要有 3 種原因:
纖維蛋白原是血清里含量較高的蛋白質,溫度波動、反復凍融、pH 輕微變化,都可能讓它析出,形成絮狀、絲狀物,這是最常見的沉淀類型。
血清里含磷酸鈣等鹽類,低溫或 pH 改變時溶解度下降,會析出形成細小渾濁或顆粒沉淀。
血清中多種蛋白在儲存過久、溫度不當、濃度變化時,也會發(fā)生聚集析出,形成肉眼可見的沉淀。
只要沒有污染,輕微與中度析出的胎牛血清都可以繼續(xù)使用,不用直接丟棄。
· 解凍后僅有少量絮狀沉淀,無異味、無渾濁。
· 屬于正?,F(xiàn)象,血清活性不受影響。
· 可直接使用;不放心可先用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)對照 24 小時,確認無污染即可。
· 不屬于污染,只是蛋白與鹽類聚集。
· 處理后完-全可以正常使用,不影響細胞培養(yǎng)。
根據(jù)沉淀多少,按下面方法處理即可:
少量沉淀直接使用,或靜置片刻讓沉淀下沉,取上清使用。
較多沉淀:
· 方法 1:400g 離心 1–2 分鐘,取上清液使用。
· 方法 2:靜置沉淀到底部,無菌轉移上清到新瓶。
· 方法 3:用無菌濾器過濾后使用。
重要提醒:處理全程保持無菌,避免引入支原體、細菌污染。
· 血清避免反復凍融,收到后立即分裝凍存。
· 解凍遵循室溫→4℃→冰箱緩慢解凍,減少劇烈溫度變化。
· 儲存溫度穩(wěn)定在 -20℃以下,避免頻繁開關冰箱門。
· 解凍后盡快使用,不宜長期在 4℃存放。
胎牛血清出現(xiàn)析出、沉淀,大多是纖維蛋白原、鹽類、蛋白質的物理變化,不是變質。輕微沉淀可直接用,大量沉淀經離心或過濾后也能正常使用。只要做好分裝、正確解凍、規(guī)范儲存,就能大幅減少沉淀,提升血清使用效率與實驗穩(wěn)定性。
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