BHQ-10 azide 是一種結合了黑暗淬滅劑 BHQ-10 與疊氮基團(-N?)的化合物,在生物正交化學、熒光標記及光學成像等領域展現(xiàn)出獨特優(yōu)勢,以下是其詳細介紹:
BHQ-10 核心:作為黑暗淬滅劑,BHQ-10 通過吸收熒光基團的能量實現(xiàn)信號淬滅。其吸收峰位于 615 nm,淬滅范圍覆蓋 480-550 nm,尤其適用于淬滅藍色和綠色熒光團(如 FITC、Cy3)。
疊氮基團(-N?):作為生物正交反應的活性基團,疊氮基團可通過銅催化點擊化學(CuAAC)與末端炔烴反應,或通過無銅環(huán)加成(SPAAC)與環(huán)炔烴反應,實現(xiàn)高效、特異的共價偶聯(lián)。
結構式:
外觀:通常呈現(xiàn)為粉末狀,顏色較深。
分子式與分子量:分子式為 C??H??N?Na?O?S?,分子量為 689.67。
溶解性:具有良好的水溶性,可在水溶液中穩(wěn)定存在并發(fā)揮作用。
穩(wěn)定性:在適當的儲存條件下(-20°C,避光,避濕)具有較好的穩(wěn)定性,有利于長期保存和使用。
熒光淬滅:
高效淬滅:BHQ-10 azide 能通過結合熒光共振能量轉移(FRET)和靜態(tài)猝滅效應,高效地猝滅熒光信號,可用于猝滅最大發(fā)射光接近 516 nm 的熒光基團,如熒光素。
特異性強:可以更特異地針對目標熒光進行淬滅,避免其他熒光猝滅劑常見的背景殘留物問題,使檢測結果更加準確可靠。
光穩(wěn)定性好:BHQ-10 染料具有良好的光穩(wěn)定性,確保熒光信號在長時間觀測中保持持久和強烈。
生物標記與成像:
點擊化學反應:疊氮基團賦予了 BHQ-10 azide 較高的反應活性,能夠通過點擊化學反應等與多種含有炔基等官能團的物質快速、高效地結合,便于與不同的生物分子或材料進行偶聯(lián)。
生物正交標記:疊氮基團與炔烴的反應具有高選擇性和高效性,適用于活細胞或體內的標記與成像。
核酸與蛋白質標記:在核酸標記中,可先將炔基修飾引入寡核苷酸序列,再通過點擊化學反應將 BHQ-10 azide 偶聯(lián)到核酸分子上;在蛋白質標記中,可通過基因工程手段將炔基氨基酸引入蛋白質序列,再與 BHQ-10 azide 進行偶聯(lián)。
納米探針制備:
BHQ-10 azide 還可用于制備淬滅型納米探針,應用于腫瘤靶向成像等領域。
儲存條件:需在 -20°C 下避光、避濕保存,以防止降解。
取用操作:取用時需保持干燥環(huán)境,避免頻繁溶解和凍干。
反應條件:疊氮基團與炔烴的反應需在無水、無氧條件下進行,以確保反應效率。銅催化點擊化學需控制銅離子濃度,避免對生物樣品產生毒性。
安全防護:操作時需佩戴實驗手套、護目鏡等防護裝備,避免直接接觸。廢棄物需按實驗室安全規(guī)范處理,防止環(huán)境污染。
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