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一、基本信息
產(chǎn)品中文名稱:BHQ-10 氨基 / BHQ-10 胺 / 深色猝滅劑 10-氨基
產(chǎn)品英文名稱:BHQ-10 Amine / BHQ-10 NH2 / Dark Quencher 10 Amine
分子式:C22H24N6Na2O6S2
分子量:578.57
純度規(guī)格:95%
外觀性狀:深棕色至黑色粉末狀固體,無明顯氣味。
結(jié)構(gòu)式:
二、溶解性與保存條件
溶解性:該產(chǎn)品易溶于二甲基亞砜(DMSO)、二甲基甲酰胺(DMF)、THF等有機溶劑;在水溶液或磷酸鹽緩沖液(PBS)中溶解度較低,建議先以 DMSO 溶解配成儲備液,再稀釋至所需水相體系中使用。
保存條件:長期保存需置于負 20 攝氏度以下環(huán)境,嚴格避光、干燥保存,建議充入氮氣或氬氣等惰性氣體密封。溶液狀態(tài)下應避免反復凍融,分裝后單次使用,未用完的溶液不可重復冷凍。
三、光譜特性與功能描述
BHQ-10 Amine 屬于 BHQ 系列深色猝滅劑(Black Hole Quencher)的氨基活性衍生物。其核心發(fā)色團為多環(huán)芳香族結(jié)構(gòu),具有寬范圍的光吸收特性。
吸收范圍:主要覆蓋 600 納米至 750 納米波段,峰值吸收位于近紅外區(qū)域,與 Cy5、Alexa Fluor 647、IRDye 680、DyLight 680 等常用近紅外熒光染料的發(fā)射光譜高度重疊。
熒光特性:該化合物本身幾乎不產(chǎn)生熒光發(fā)射,屬于非熒光型(暗)猝滅劑,通過 FRET(熒光共振能量轉(zhuǎn)移)機制高效淬滅供體熒光,淬滅效率可達 95% 以上。
反應活性:分子末端含有一個伯氨基(-NH2),具有良好的親核反應活性,可在弱堿性條件下(pH 7.5 至 8.5)與羧基活化試劑(如 EDC/NHS)、NHS 酯、異氰酸酯、醛基(還原胺化)、環(huán)氧基等發(fā)生偶聯(lián)反應,形成穩(wěn)定的共價連接,適用于標記核酸、蛋白質(zhì)、多肽等生物分子。
四、主要應用領域
熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)探針構(gòu)建:BHQ-10 Amine 作為受體猝滅基團,與 Cy5 等供體熒光染料配對,用于設計分子信標(Molecular Beacon)、TaqMan 探針、雙標記雜交探針等。
實時熒光定量 PCR(qPCR):作為探針 3 端或 5 端的猝滅基團,在 PCR 擴增過程中通過 Taq 酶的 5 至 3 外切酶活性切割探針,實現(xiàn)熒光信號的"開-關"檢測,廣泛應用于基因表達分析、病原體檢測、SNP 基因分型等。
核酸檢測與基因芯片:用于構(gòu)建 FRET 體系的核酸雜交探針,提高檢測靈敏度和特異性。
生物傳感與成像:應用于熒光生物傳感器、活體近紅外成像探針的開發(fā)。
五、使用方法與操作注意事項
偶聯(lián)反應建議:將 BHQ-10 Amine 溶于無水 DMSO 配成 10 至 50 毫摩爾每升的儲備液。與含 NHS 酯的熒光染料或含羧基的生物分子偶聯(lián)時,推薦反應體系 pH 為 7.5 至 8.5,反應溫度室溫或 4 攝氏度,反應時間 2 至 12 小時。反應結(jié)束后通過 HPLC 或凝膠過濾柱純化偶聯(lián)產(chǎn)物。
操作安全警示:本產(chǎn)品僅供科學研究使用,嚴禁用于人體臨床診斷、治療或任何醫(yī)療用途。操作時應佩戴防護手套、護目鏡和實驗服,在通風櫥內(nèi)稱量粉末,避免吸入粉塵或接觸皮膚和眼睛。如不慎接觸,立即用大量清水沖洗并就醫(yī)。
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