BHQ-3 azide 是一種高效的熒光淬滅劑，屬于 Black Hole Quencher (BHQ) 系列，其分子末端修飾有疊氮基團(tuán)（-N?），賦予其良好的化學(xué)修飾能力，廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、化學(xué)生物學(xué)及生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域。

化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

• 分子式：C??H??N??O?

• 分子量：629.79

• 外觀：深紫色至黑色固體粉末

• 溶解性：易溶于極性有機(jī)溶劑（如 DMSO、DMF），在水中的溶解性相對(duì)較差，但在某些水性緩沖液體系中可通過適當(dāng)處理（如添加表面活性劑或助溶劑）達(dá)到一定程度的溶解。

• 穩(wěn)定性：在干燥、避光、低溫條件下穩(wěn)定，可長期儲(chǔ)存；溶液狀態(tài)需盡快使用以避免疊氮基團(tuán)降解。

結(jié)構(gòu)式：

主要應(yīng)用

1. 熒光探針設(shè)計(jì)：

• 分子信標(biāo)（Molecular Beacons）：BHQ-3 azide 常用于標(biāo)記分子信標(biāo)的 3' 或 5' 末端，與熒光報(bào)告基團(tuán)（如 FAM、Cy5）形成 FRET 對(duì)。當(dāng)探針處于未結(jié)合狀態(tài)時(shí)，熒光被淬滅；當(dāng)探針與靶序列結(jié)合后，構(gòu)象改變導(dǎo)致熒光恢復(fù)，實(shí)現(xiàn)信號(hào)的“開/關(guān)"調(diào)控。

• FRET 探針：在 TaqMan 探針、分子信標(biāo)等設(shè)計(jì)中，BHQ-3 azide 作為淬滅基團(tuán)，與熒光染料配對(duì)，實(shí)現(xiàn)靶序列擴(kuò)增的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。由于淬滅效率高，可有效降低背景信號(hào)，提高定量精度。

• 可控激活探針：通過設(shè)計(jì)特定的酶切位點(diǎn)或化學(xué)響應(yīng)基團(tuán)，實(shí)現(xiàn)熒光信號(hào)的動(dòng)態(tài)調(diào)控，適用于酶活性檢測(cè)、核酸剪切等生物事件的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。

2. 實(shí)時(shí)定量 PCR（qPCR）：

• BHQ-3 azide 作為探針的淬滅端，與熒光染料形成 FRET 對(duì)，實(shí)現(xiàn)靶序列擴(kuò)增的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。其高效淬滅能力顯著降低背景信號(hào)，提高檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確性。

3. 生物傳感器構(gòu)建：

• 結(jié)合 BHQ-3 的熒光淬滅特性和生物分子的特異性識(shí)別能力，構(gòu)建高靈敏度的生物傳感器。例如，用于檢測(cè)酶活性、核酸剪切或小分子存在等生物事件。

• 通過點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)將 BHQ-3 azide 引入傳感器體系，實(shí)現(xiàn)熒光信號(hào)的開關(guān)調(diào)控，適用于動(dòng)態(tài)檢測(cè)與實(shí)時(shí)監(jiān)控。

4. 多色熒光實(shí)驗(yàn)：

• BHQ-3 的寬吸收譜與紅色熒光染料匹配，可用于多重標(biāo)記實(shí)驗(yàn)，實(shí)現(xiàn)多色信號(hào)解耦，同時(shí)減少光漂白和背景干擾。

5. 化學(xué)生物學(xué)研究：

• 通過點(diǎn)擊化學(xué)修飾，將 BHQ-3 azide 固定在特定生物分子上，實(shí)現(xiàn)定位淬滅或靶向信號(hào)調(diào)控。廣泛用于蛋白質(zhì)-小分子相互作用研究、酶切活性檢測(cè)及生物成像等領(lǐng)域。

特點(diǎn)

• 高效淬滅：在 620-730 nm 波長范圍內(nèi)淬滅效率接近 99%，顯著降低背景熒光，提升信噪比。

• 寬光譜吸收：覆蓋紅光至近紅外區(qū)域，適用于多種紅色熒光染料的淬滅。

• 化學(xué)修飾能力強(qiáng)：疊氮基團(tuán)通過點(diǎn)擊化學(xué)實(shí)現(xiàn)與含炔基分子的特異性連接，操作簡便、條件溫和。

• 生物相容性好：在復(fù)雜生物環(huán)境中穩(wěn)定，適用于體外實(shí)驗(yàn)及活細(xì)胞成像。

• 光穩(wěn)定性優(yōu)良：具有抗光漂白性能，適合長時(shí)間光照環(huán)境下的應(yīng)用。

儲(chǔ)存與操作注意事項(xiàng)

• 儲(chǔ)存條件：需在 -20℃ 以下冰凍、干燥、避光保存，避免頻繁解凍。

• 操作規(guī)范：溶液狀態(tài)需盡快使用，中性至弱堿性緩沖條件（pH 7.0-8.5）下穩(wěn)定。

• 安全提示：僅供科研或工業(yè)應(yīng)用，不可用于人類醫(yī)療或食用。避免反復(fù)凍融，取用后應(yīng)充入惰性氣體，封口膜封口，擰緊瓶蓋裝入自封袋，并及時(shí)放入冰箱。

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