BHQ-3 acid 是一種高效的非熒光淬滅劑，屬于黑洞猝滅劑（Black Hole Quencher, BHQ）系列中的羧酸活性衍生物，以下是關(guān)于其詳細(xì)介紹：

一、基本信息

• 中文名稱：BHQ-3酸、黑洞猝滅劑-3酸、BHQ-3羧酸

• 英文名稱：BHQ-3 acid

• CAS號：1338332-66-3

• 分子式：C33H35N6O2+

• 分子量：547.68

• 外觀：深紫色至黑色固體粉末

結(jié)構(gòu)式：

二、化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

• 核心結(jié)構(gòu)：BHQ-3 acid的核心結(jié)構(gòu)為高度共軛的芳香族系統(tǒng)，能夠吸收620-730nm范圍內(nèi)的光能，而不會發(fā)射可檢測熒光，實現(xiàn)高效淬滅。

• 羧酸基團(tuán)：分子中的羧酸基團(tuán)（-COOH）為化學(xué)修飾提供了位點，可通過活化形成NHS酯或其他可偶聯(lián)基團(tuán)，與蛋白質(zhì)、多肽或寡核苷酸反應(yīng)，構(gòu)建穩(wěn)定的熒光-淬滅體系。

• 溶解性：易溶于極性有機(jī)溶劑（如DMSO、DMF、乙醇等），在水中溶解性較好，便于在水溶液體系中操作。

• 穩(wěn)定性：在干燥、避光條件下穩(wěn)定，可長期儲存。在水溶液或活化條件下需短期使用，以保證反應(yīng)效率。在中性至弱堿性緩沖條件下穩(wěn)定，適合生物實驗環(huán)境和FRET探針構(gòu)建體系。

三、功能特性

• 高效熒光淬滅：BHQ-3 acid的淬滅機(jī)制為靜態(tài)淬滅與動態(tài)淬滅結(jié)合，淬滅效率高，且自身無熒光發(fā)射，不會產(chǎn)生背景熒光干擾。

• 寬吸收譜：吸收波段寬，可兼容多種紅光和近紅外熒光標(biāo)記，實現(xiàn)靈活的實驗設(shè)計。

• 化學(xué)可修飾性：羧酸基團(tuán)可通過水溶性活化劑（如EDC/NHS）與氨基共價結(jié)合，構(gòu)建穩(wěn)定酰胺鍵，反應(yīng)條件溫和，對生物大分子活性影響小。

• 水溶性與生物兼容性：酸性形式改善水溶性，降低在水溶液中自聚或沉淀的風(fēng)險，適用于生物體系。

四、應(yīng)用領(lǐng)域

• 熒光探針研發(fā)：BHQ-3 acid常用于寡核苷酸探針（如TaqMan探針、分子信使探針）設(shè)計，通過FRET實現(xiàn)靶序列檢測。熒光染料與BHQ-3之間的能量轉(zhuǎn)移在無靶標(biāo)存在時保持淬滅狀態(tài)，靶標(biāo)結(jié)合后熒光信號恢復(fù)，實現(xiàn)高信噪比檢測。

• 實時熒光定量PCR（qPCR）：在qPCR探針中廣泛應(yīng)用，通過FRET效應(yīng)對紅色或遠(yuǎn)紅熒光染料進(jìn)行淬滅。實驗過程中，DNA聚合酶的5'→3'外切活性切割探針時，熒光染料與BHQ-3分離，熒光信號增強(qiáng)，實現(xiàn)靶序列的實時定量。

• 酶動力學(xué)和活性檢測：可用于設(shè)計熒光報告底物，檢測酶切或蛋白相互作用，通過熒光恢復(fù)定量分析酶活性。

• 多重?zé)晒鈾z測：由于BHQ-3主要淬滅紅光至近紅外光熒光，適用于多通道熒光實驗，避免信號串?dāng)_，實現(xiàn)多重標(biāo)記檢測。

• 生物傳感器構(gòu)建：可與功能性納米材料、熒光染料和生物識別分子結(jié)合，開發(fā)高靈敏度的生物傳感器。

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