BHQ-2 azide（BHQ-2 疊氮）是一種以疊氮基（-N?）修飾的黑洞淬滅劑（Black Hole Quencher-2），屬于非熒光暗猝滅染料，廣泛應(yīng)用于熒光探針設(shè)計(jì)、生物分子標(biāo)記及分子生物學(xué)研究。以下是關(guān)于 BHQ-2 azide 的詳細(xì)介紹：

一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

• 分子式與分子量：C??H??N??O?，分子量為 588.63。

• 外觀：深紫色固體或粉末。

• 溶解性：易溶于有機(jī)溶劑（如 DMF、DMSO、二氯甲烷），極難溶于水。但在水中可通過轉(zhuǎn)化為其鹽形式提升部分溶解性。

• 穩(wěn)定性：對光、濕敏感，需嚴(yán)格避光保存。避免頻繁溶解或凍干，以防影響活性。

• 純度：通常≥95%，滿足科研級實(shí)驗(yàn)要求。

二、功能特性

• 猝滅波長范圍：550–650 nm，適用于淬滅 TAMRA、ROX、Cy3、Cy3.5 等紅色熒光團(tuán)。

• 猝滅機(jī)制：通過非輻射能量轉(zhuǎn)移（如 FRET）吸收熒光團(tuán)的激發(fā)能量，幾乎不發(fā)射熒光，從而高效淬滅信號。

• 疊氮基團(tuán)（-N?）：可參與點(diǎn)擊化學(xué)（Click Chemistry），與炔基（-C≡CH）發(fā)生環(huán)加成反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)與生物分子（如寡核苷酸、蛋白質(zhì)）的共價偶聯(lián)。

• 光穩(wěn)定性：作為非熒光染料，不受光漂白影響，可長期保持淬滅性能。

• 生物兼容性：適用于體外實(shí)驗(yàn)，但僅限科研和工業(yè)用途，不可用于人體或制藥。

三、應(yīng)用領(lǐng)域

• FRET 體系：BHQ-2 azide 可與多種紅色熒光染料（如 Cy3、Cy5、TAMRA、ROX 等）形成 FRET 體系，通過吸收激發(fā)能量并阻止熒光發(fā)射，實(shí)現(xiàn)探針信號控制。

• 分子信標(biāo)：用于構(gòu)建分子信標(biāo)、蝎子引物等，實(shí)現(xiàn)實(shí)時 PCR、基因分型（如 SNP 檢測）、基因表達(dá)分析等。

• 點(diǎn)擊化學(xué)：疊氮基團(tuán)可與炔基發(fā)生高效的“點(diǎn)擊反應(yīng)"（如 CuAAC 反應(yīng)），實(shí)現(xiàn)生物分子的特異性標(biāo)記。

• 蛋白質(zhì)/肽標(biāo)記：標(biāo)記抗體、酶或受體，用于免疫熒光、流式細(xì)胞術(shù)、蛋白質(zhì)相互作用研究。

• 核酸修飾：與氨基末端寡核苷酸偶聯(lián)，用于核酸雜交、基因編輯（如 CRISPR-Cas9 探針）及核酸藥物遞送系統(tǒng)。

• 酶底物標(biāo)記：標(biāo)記酶底物，通過熒光信號變化反映酶切或底物轉(zhuǎn)化，實(shí)現(xiàn)高靈敏度檢測。

• 生物傳感器：構(gòu)建 FRET 型傳感器，檢測蛋白質(zhì)相互作用、小分子識別及細(xì)胞信號傳導(dǎo)。

• 藥物篩選：適用于 FRET 或熒光淬滅平臺，用于藥物篩選、蛋白功能分析及生物活性監(jiān)測。

• 納米顆粒修飾：與脂質(zhì)體、納米顆粒或抗體結(jié)合，實(shí)現(xiàn)藥物的靶向遞送。

• 智能響應(yīng)系統(tǒng)：設(shè)計(jì) pH/酶響應(yīng)探針，監(jiān)測細(xì)胞內(nèi)代謝物或酶活性（如蛋白酶切割后熒光恢復(fù)），用于疾病標(biāo)志物檢測與藥物釋放調(diào)控。

四、儲存與操作注意事項(xiàng)

• 儲存條件：避光、-20℃ 干燥保存，避免反復(fù)凍融。

• 操作條件：建議在通風(fēng)櫥中操作，全程避光，防止降解。取用時需保持干燥，避免頻繁溶解或凍干。

• 安全提示：疊氮化合物具有一定毒性，操作時需佩戴手套和護(hù)目鏡，避免吸入或接觸皮膚。

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