在現(xiàn)代光學(xué)成像領(lǐng)域,共聚焦顯微鏡憑借焦面光信號(hào)篩選能力,突破了傳統(tǒng)寬場顯微鏡的焦外雜光限制,成為生命科學(xué)、工業(yè)檢測等領(lǐng)域的核心成像工具。而橫河電機(jī)推出的CSU系列激光共聚焦掃描單元,作為轉(zhuǎn)盤式共聚焦技術(shù)的產(chǎn)品,憑借獨(dú)特的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)破解了傳統(tǒng)點(diǎn)掃描共聚焦的速度瓶頸,將共聚焦成像的應(yīng)用邊界拓展到了動(dòng)態(tài)過程捕捉、活體長時(shí)觀測等更多場景。

核心原理:從共聚焦基礎(chǔ)到雙轉(zhuǎn)盤的技術(shù)革新
共聚焦成像的核心邏輯是通過與激發(fā)光焦點(diǎn)共軛的針孔結(jié)構(gòu),濾除樣品焦平面以外的雜散光,僅保留焦面處的熒光信號(hào),從而實(shí)現(xiàn)更高的成像對(duì)比度與光學(xué)層切能力。但傳統(tǒng)點(diǎn)掃描共聚焦采用單束激光逐點(diǎn)掃描樣品,成像速度受限于掃描振鏡的轉(zhuǎn)動(dòng)速率,單幀成像往往需要數(shù)百毫秒到數(shù)秒,且高功率激光單點(diǎn)長時(shí)間照射容易造成樣品的光漂白與光損傷,無法適配活細(xì)胞動(dòng)態(tài)過程、高速瞬態(tài)現(xiàn)象的觀測需求。
橫河CSU系列的核心創(chuàng)新在于采用了雙轉(zhuǎn)盤同步掃描架構(gòu),對(duì)傳統(tǒng)Nipkow轉(zhuǎn)盤共聚焦技術(shù)實(shí)現(xiàn)了革命性升級(jí):
1.雙盤協(xié)同設(shè)計(jì):單元內(nèi)置兩組同軸同步轉(zhuǎn)動(dòng)的轉(zhuǎn)盤,前端為微透鏡陣列轉(zhuǎn)盤,后端為Nipkow針孔轉(zhuǎn)盤,每個(gè)微透鏡與后端對(duì)應(yīng)的針孔位置精準(zhǔn)共軛。入射激光首先經(jīng)過微透鏡陣列分束并聚焦,精準(zhǔn)耦合到對(duì)應(yīng)的針孔中,將光能利用率從傳統(tǒng)單轉(zhuǎn)盤結(jié)構(gòu)的不足1%提升至40%以上,大幅降低了所需的激發(fā)光功率。
2.并行掃描邏輯:Nipkow轉(zhuǎn)盤上的針孔按螺旋路徑密集排布,轉(zhuǎn)盤高速轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí),數(shù)千個(gè)針孔同步對(duì)樣品焦平面進(jìn)行并行掃描,單幀成像速度可突破1000fps,較傳統(tǒng)點(diǎn)掃描共聚焦提升3-4個(gè)數(shù)量級(jí)。
3.共軛光路優(yōu)化:返回的熒光信號(hào)沿原光路返回后,通過二向色鏡分離并直接投射到sCMOS或EMCCD等高靈敏度探測器上,無需額外掃描器件,進(jìn)一步減少了光信號(hào)損失,提升了成像靈敏度。
差異化技術(shù)優(yōu)勢
橫河CSU系列之所以成為全球主流顯微鏡廠商的共聚焦模塊選擇,核心在于其兼顧了高速、低損傷、高分辨率的多重優(yōu)勢:
• 超高速三維成像:配合快速Z軸位移臺(tái),可實(shí)現(xiàn)每秒數(shù)十層的三維斷層掃描,數(shù)秒內(nèi)即可完成大體積樣品的三維重構(gòu),適配活體內(nèi)動(dòng)態(tài)過程的三維捕捉需求。
• 極低光毒性與光漂白:得益于高光能利用率與短時(shí)間單點(diǎn)照射特性,同等成像質(zhì)量下所需激發(fā)功率僅為點(diǎn)掃描共聚焦的1/10甚至更低,支持活細(xì)胞、活體動(dòng)物連續(xù)數(shù)小時(shí)甚至數(shù)天的長時(shí)程觀測,不會(huì)對(duì)樣品生理活性造成明顯影響。
• 高適配性與拓展性:可適配從正置、倒置顯微鏡到體視顯微鏡的各類平臺(tái),支持多色熒光成像、熒光壽命成像、光激活/光遺傳實(shí)驗(yàn)等多模態(tài)拓展,可根據(jù)應(yīng)用需求靈活配置。
核心應(yīng)用場景
橫河CSU單元的技術(shù)特性,使其同時(shí)覆蓋了基礎(chǔ)科研與工業(yè)檢測兩大領(lǐng)域的核心需求:
一、生命科學(xué)研究領(lǐng)域
這是CSU系列應(yīng)用廣泛的場景,幾乎覆蓋了從分子到活體的全尺度生命科學(xué)研究:
1.活細(xì)胞動(dòng)態(tài)過程觀測:是囊泡運(yùn)輸、細(xì)胞分裂、細(xì)胞遷移、免疫細(xì)胞-靶細(xì)胞相互作用等亞細(xì)胞到細(xì)胞尺度動(dòng)態(tài)過程觀測的金標(biāo)準(zhǔn)工具。例如在CAR-T細(xì)胞治療研究中,研究人員借助CSU的高速成像能力,可清晰捕捉CAR-T細(xì)胞識(shí)別、殺傷腫瘤細(xì)胞的全動(dòng)態(tài)過程,為免疫療法優(yōu)化提供數(shù)據(jù)支撐。
2.神經(jīng)科學(xué)在體成像:可支持斑馬魚、小鼠等模式動(dòng)物的在體腦成像,同時(shí)記錄上千個(gè)神經(jīng)元的鈣信號(hào)動(dòng)態(tài)變化,是解析大腦神經(jīng)環(huán)路、研究認(rèn)知與疾病機(jī)制的核心工具。針對(duì)透明腦、類器官等大體積樣品,其高速層切能力可快速完成全樣品三維成像,還原神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)的完整結(jié)構(gòu)。
3.單分子與超分辨成像:配合高靈敏度探測器,CSU可實(shí)現(xiàn)單分子熒光成像與單分子示蹤,捕捉單個(gè)蛋白分子在細(xì)胞內(nèi)的運(yùn)動(dòng)軌跡與相互作用過程,結(jié)合STORM、SIM等超分辨技術(shù),還可進(jìn)一步突破衍射極限,實(shí)現(xiàn)納米尺度的結(jié)構(gòu)觀測。
二、工業(yè)與材料檢測領(lǐng)域
依托共聚焦的高縱向分辨率與高速成像能力,CSU系列在工業(yè)檢測領(lǐng)域的應(yīng)用也在快速拓展:
1.半導(dǎo)體與微納器件檢測:其納米級(jí)的縱向分辨率可實(shí)現(xiàn)晶圓表面缺陷檢測、先進(jìn)封裝凸點(diǎn)(Bump)高度測量、MEMS器件三維形貌表征等,高速掃描能力可適配產(chǎn)線級(jí)的批量檢測需求,大幅提升檢測效率。
2.材料科學(xué)表征:可用于復(fù)合材料界面結(jié)構(gòu)分析、涂層厚度均勻性檢測、發(fā)光材料的熒光分布mapping、鋰電池電極材料的微觀孔隙結(jié)構(gòu)表征等,為材料性能優(yōu)化提供微觀尺度的量化數(shù)據(jù)。
3.微流控與精密制造檢測:針對(duì)微流控芯片的流體動(dòng)態(tài)觀測、微流道內(nèi)的顆粒與細(xì)胞分析,以及精密加工零件的表面粗糙度檢測等場景,CSU的高速成像能力可捕捉微秒級(jí)的瞬態(tài)過程,補(bǔ)充了傳統(tǒng)檢測設(shè)備的能力空白。
橫河電機(jī)CSU系列激光共聚焦掃描單元的推出,重新定義了共聚焦成像的能力邊界。近年來隨著技術(shù)迭代,橫河也在不斷推出適配超分辨成像、大視場成像等新需求的升級(jí)型號(hào),未來結(jié)合AI圖像重建、多模態(tài)耦合等技術(shù),其應(yīng)用場景還將進(jìn)一步向病理診斷、高通量藥物篩選、半導(dǎo)體先進(jìn)制程檢測等領(lǐng)域延伸,為多領(lǐng)域的創(chuàng)新發(fā)展提供核心成像技術(shù)支撐。
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