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藥物分析排憂解難系列 | 如何應(yīng)對(duì)極端比例和緩梯度
隨著去年中國(guó)藥典的版本更新，做藥物分析檢測(cè)的老鐵們又要迎來(lái)新一波的忙碌了，樣品、儀器、數(shù)據(jù)構(gòu)成了日常工作的“鐵三角"，主打一個(gè)“穩(wěn)"不可破。上班上出個(gè)三角形穩(wěn)定性原理也屬實(shí)是重生之我在實(shí)驗(yàn)室學(xué)小學(xué)數(shù)學(xué)了。
講真，雖然小學(xué)數(shù)學(xué)是有點(diǎn)超綱，但好歹三角形還是穩(wěn)得住，要是真穩(wěn)不住，那才是叫人欲哭無(wú)淚啊，要說(shuō)實(shí)驗(yàn)室里最怕什么不穩(wěn)，相信每個(gè)人都有自己的血淚史，今天，咱就說(shuō)一個(gè)大家都見(jiàn)過(guò)的不穩(wěn)吧，它叫保留時(shí)間不穩(wěn)。
做液相的朋友大概率都有過(guò)以下經(jīng)歷：保留時(shí)間飄，心率往上飆，保留時(shí)間跑，兩腿要發(fā)抖，擔(dān)了驚受了怕，咱還得知道液相的保留時(shí)間為啥會(huì)飄？
如果儀器狀態(tài)正常，操作也沒(méi)問(wèn)題，那大概率就是因?yàn)榉椒ū旧泶嬖谝欢ǖ奶魬?zhàn)性。這種挑戰(zhàn)，通常來(lái)自于流動(dòng)相梯度比例或者變化的極限挑戰(zhàn)，比如采用某一相比例低于 5% 的方法，或者是長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)變化百分之的梯度，這些都屬于極端條件。近年來(lái)，隨著很多檢測(cè)品種或項(xiàng)目相關(guān)法規(guī)要求的更新，采用此類極端比例的方法日益增多，這就導(dǎo)致了咱的心臟頻繁被挑戰(zhàn)，上個(gè)班還能體驗(yàn)心律失常，一份班受了兩份罪。
對(duì)于這種極端比例和緩梯度，可以舉個(gè)例子，比如 25 版藥典當(dāng)中一款名為碘海醇的品種。
如圖為它在有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)項(xiàng)目下的液相色譜梯度條件：
起始 1% 有機(jī)相，一個(gè)小時(shí)梯度變化 12%。若儀器穩(wěn)定性稍有不足，保留時(shí)間便可能出現(xiàn)顯著漂移，影響分析結(jié)果的可靠性。這種極端情況，已經(jīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出一般儀器可以穩(wěn)定運(yùn)行的極限。
當(dāng)常規(guī)的儀器配置難以應(yīng)對(duì)此類情況，在實(shí)際操作中，經(jīng)驗(yàn)豐富的實(shí)驗(yàn)人員通常會(huì)采取以下策略：把梯度起始比例和終止比例的流動(dòng)相分別手動(dòng)配成 A、B 兩相，也就是 1% 乙腈作為 A，13% 乙腈作為 B，然后把儀器方法設(shè)置成從 0% 走到 100% 的線性梯度。通過(guò)這種方式，既避免了極端比例，也不會(huì)被緩慢的梯度變化困擾，從而有效提升實(shí)驗(yàn)效果。
然而，該方法雖然解決了儀器方面的挑戰(zhàn)，卻又引入了人為操作的不確定性：手工配制流動(dòng)相難以保證批次間完全一致，而“配液高手"也不可能永遠(yuǎn)在崗。臨時(shí)對(duì)策雖能應(yīng)急，卻并非長(zhǎng)久之計(jì)。
