一、卵黃的作用
許多培養(yǎng)基制備時(shí),都會(huì)用到卵黃。一方面,卵黃具有豐富的營(yíng)養(yǎng),可以支持一些營(yíng)養(yǎng)苛求型細(xì)菌的生長(zhǎng),如培養(yǎng)奈瑟氏菌的卵黃雙抗培養(yǎng)基、培養(yǎng)分枝桿菌的羅氏培養(yǎng)基等,添加的卵黃做為營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑,可以促進(jìn)細(xì)菌的快速生長(zhǎng);另一方面,卵黃中含有豐富的卵磷脂和脂肪可以檢測(cè)細(xì)菌的生化特性,能夠分解脂肪和卵磷脂的細(xì)菌在含卵黃的培養(yǎng)基上菌落周圍能夠產(chǎn)生暈圈。
二、卵黃的制備
通常情況下,雞蛋中的蛋黃是無(wú)菌的,使用消毒劑對(duì)雞蛋表面擦拭或浸泡消毒以后,用無(wú)盡鑷子敲碎雞蛋,輕輕搖晃盡可能倒掉蛋清,留下蛋黃倒入含有無(wú)菌玻璃珠的錐形瓶中,加入等量體積的生理鹽水混合均勻(通常一個(gè)蛋黃約15-20g),即為50%的卵黃乳液。
注:宜采用新鮮雞蛋,有些雞蛋的蛋黃存在污染的可能性,制備好的卵黃乳液宜當(dāng)天使用。若蛋黃出現(xiàn)散黃、異味等現(xiàn)象,則不應(yīng)使用。
三、卵黃的保存
為盡可能延長(zhǎng)卵黃的保存時(shí)間,應(yīng)將制備好的卵黃乳液置于2-8℃冰箱中冷藏保存。對(duì)于自行制備的卵黃乳液在進(jìn)行長(zhǎng)期保存時(shí),臨用前應(yīng)對(duì)無(wú)菌性進(jìn)行檢查(可取少量卵黃乳液涂布至TSA平板培養(yǎng)1-2天),若出現(xiàn)污染則不能使用。
注:自制的卵黃污染風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較高,一般建議使用商品化生產(chǎn)的無(wú)菌卵黃乳液,可以更久的儲(chǔ)存。
四、卵黃的使用
卵黃受熱過(guò)度會(huì)變性凝固,因此卵黃通常要在培養(yǎng)基滅菌后冷卻至50℃左右時(shí)加入(液體培養(yǎng)基可以冷卻至更低的溫度時(shí)添加),加入卵黃后的培養(yǎng)基不可繼續(xù)保溫或者凝固后復(fù)融使用,大多數(shù)培養(yǎng)基中卵黃的添加量為5%-15%。
注:由于卵黃通常在2-8℃儲(chǔ)存,在往培養(yǎng)基中添加之前需平衡至室溫(或溫水浴至40℃)再使用,防止培養(yǎng)基接觸過(guò)冷的卵黃出現(xiàn)凝塊。培養(yǎng)基的溫度也不能過(guò)高,防止加入的卵黃出現(xiàn)變性。加入卵黃后的培養(yǎng)基應(yīng)輕輕搖勻,避免產(chǎn)生過(guò)多氣泡,影響使用效果。