實驗室在使用賽默飛色譜柱開展液相分析時，常面臨色譜柱頻繁損壞、背壓異常升高等問題，其中柱頭堵塞是顆粒物導致背壓升高的典型表現(xiàn)，樣品組分的非特異性吸附也會加劇柱壓異常。以下整理了色譜柱的損壞來源、預防措施及儲存使用注意事項，序號為純文本格式，可直接復制使用：
一、賽默飛色譜柱常見損壞來源
1.泵頭密封圈磨損產(chǎn)生的顆粒物進入色譜系統(tǒng)
2.進樣閥轉子密封圈磨損產(chǎn)生的顆粒物進入色譜系統(tǒng)
3.流動相或樣品中析出的緩沖鹽結晶堵塞柱頭
4.樣品中含有的復雜易吸附基質(zhì)進入色譜柱
5.各類顆粒物堵塞柱頭過濾篩板，直接導致色譜柱背壓升高
6.樣品中組分與色譜柱前端硅膠表面游離的硅醇基發(fā)生吸附作用，導致背壓升高，此類問題在低pH體系下可得到緩解：低pH環(huán)境會抑制硅醇基解離，降低吸附概率
二、日常使用預防措施
1.加裝在線過濾器在線過濾器內(nèi)部顆?？障锻ǔ?.5μm，超高效液相（UHPLC）系統(tǒng)可選用0.2μm空隙的在線過濾器，其空隙尺寸與色譜柱柱頭過濾篩板尺寸接近或略小，可有效阻隔來自樣品、泵頭密封墊、自動進樣器轉子密封墊的顆粒物，避免柱頭過濾篩板堵塞。注意：極低死體積的液相系統(tǒng)加裝在線過濾器后可能導致系統(tǒng)死體積增大、色譜峰展寬，此類系統(tǒng)需謹慎選用；多數(shù)常規(guī)液相系統(tǒng)加裝后色譜圖無明顯變化。
2.柱前加裝保護柱保護柱是內(nèi)填與分析柱固定相一致的10~20mm短柱，分為通用型、一體式、卡套式等類型，不僅能阻隔顆粒物，還可吸附樣品中的易吸附基質(zhì)組分，降低樣品對分析柱的損傷。注意：使用強溶劑清洗系統(tǒng)時需先取下保護柱，避免保護柱中殘留的強保留組分被洗脫進入分析柱；若保護柱出現(xiàn)吸附飽和，也會影響色譜分離效果，需及時更換。
3.樣品預處理凈化部分液相分析方法未明確要求樣品凈化，但建議檢測前根據(jù)樣品基質(zhì)對樣品進行過濾等凈化處理，減少雜質(zhì)進入色譜柱的概率。
三、賽默飛色譜柱使用與儲存注意事項
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1.接入色譜柱前需先用水沖洗整個液相系統(tǒng)，避免管路中有機溶劑和氣泡進入色譜柱。
2.禁止有機溶劑直接進入色譜柱，否則會導致填料脫水、柱床損壞；開啟泵時需小流速啟動，逐步提升流速，避免壓力迅猛升高損壞柱床，15mm內(nèi)徑色譜柱的流速不得超過3mL/min。
3.每次使用后需用蒸餾水沖洗色譜柱，將含鹽流動相全置換干凈；若短時間不再使用，需按規(guī)范方法保存。
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1.沖洗干凈的色譜柱可充入0.02%~0.05%的疊氮鈉水溶液封存，或使用三氯丁醇苯基汞代鹽封閉色譜柱后，置于5℃左右冰箱低溫保存。
2.再次使用前，用蒸餾水沖洗掉保護溶液即可直接使用。
3.若次日還需使用，需從液相系統(tǒng)中取下色譜柱，封閉后存放于4~8℃冰箱中冷藏。
