Laminin521（LN521）在iPSC干細(xì)胞培養(yǎng)中的應(yīng)用

本文摘要：

解析iPSC干細(xì)胞培養(yǎng)的核心痛點(diǎn)，揭秘全長(zhǎng)層粘連蛋白在細(xì)胞微環(huán)境中的關(guān)鍵作用。通過(guò)對(duì)比片段化與全長(zhǎng)蛋白的差異，深入講解laminin521的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)優(yōu)勢(shì)，為細(xì)胞治療研發(fā)提供專業(yè)的基質(zhì)選擇指南。

本文關(guān)鍵詞：全長(zhǎng)層粘連蛋白、LN521、laminin521、干細(xì)胞培養(yǎng)、iPSC培養(yǎng)、細(xì)胞外基質(zhì)、無(wú)動(dòng)物源基質(zhì)

什么是全長(zhǎng)層粘連蛋白？

今天聊一聊干細(xì)胞培養(yǎng)中的一項(xiàng)關(guān)鍵材料：全長(zhǎng)層粘連蛋白。

現(xiàn)在iPSC誘導(dǎo)多能干細(xì)胞越來(lái)越火，帕金森、神經(jīng)損傷等細(xì)胞治療都在快速推進(jìn)。但很多人培養(yǎng)時(shí)總遇到問(wèn)題：細(xì)胞狀態(tài)差、表型不穩(wěn)、實(shí)驗(yàn)重復(fù)不出來(lái)，根本原因就是體外沒(méi)模擬好細(xì)胞在體內(nèi)的真實(shí)微環(huán)境。

細(xì)胞外基質(zhì)就是關(guān)鍵，而層粘連蛋白又是基質(zhì)里的核心。它一共有16種亞型，像一把把專屬鑰匙，對(duì)應(yīng)不同組織和細(xì)胞功能。只有完整的全長(zhǎng)結(jié)構(gòu)，才能發(fā)揮全部生理功能，片段化的只能勉強(qiáng)黏附，沒(méi)法調(diào)控信號(hào)、構(gòu)建微環(huán)境，更支撐不了高質(zhì)量干細(xì)胞培養(yǎng)。

全長(zhǎng)層粘連蛋白到底強(qiáng)在哪？

第一，它能精準(zhǔn)激活干細(xì)胞增殖、存活的關(guān)鍵信號(hào)通路，讓細(xì)胞保持穩(wěn)定表型，不跑偏、不紊亂。

第二，它是基底膜的骨架，能搭出接近體內(nèi)的三維微環(huán)境，幫細(xì)胞建立極性，為后續(xù)定向分化打好基礎(chǔ)。

第三，它自帶生長(zhǎng)因子結(jié)合位點(diǎn)，可以緩慢釋放VEGF、FGF、BMP等，讓培養(yǎng)環(huán)境更穩(wěn)定，減少細(xì)胞應(yīng)激。

在全長(zhǎng)層粘連蛋白里，Biolaminin521，也就是LN521，是目前最能打的代表。它是重組人源、無(wú)動(dòng)物源、成分明確，批次超級(jí)穩(wěn)定。

laminin521進(jìn)行干細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

在它上面培養(yǎng)干細(xì)胞，10天產(chǎn)量能達(dá)到片段化產(chǎn)品的10 倍；單細(xì)胞傳代存活率大幅提升，第3天就能匯合，大幅縮短擴(kuò)繁周期；細(xì)胞鋪展更均勻、遷移更活躍，覆蓋度遠(yuǎn)高于片段蛋白，特別適合類器官和規(guī)?；囵B(yǎng)。

和傳統(tǒng)片段蛋白相比，Biolaminin521 沒(méi)有動(dòng)物源風(fēng)險(xiǎn)、沒(méi)有批次差異，更符合臨床轉(zhuǎn)化要求，細(xì)胞治療級(jí)產(chǎn)品還滿足USP 和ISCT 標(biāo)準(zhǔn)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)論

• 培養(yǎng)iPSC、ESC、MSC等高要求干細(xì)胞，一定要用全長(zhǎng)層粘連蛋白。
  

• 片段蛋白不能替代全長(zhǎng)，只能做低要求的基礎(chǔ)黏附。
  

• LN521 常規(guī)包被濃度0.5–1.0μg/cm2，37℃孵育30分鐘就能用，不用洗板，兼容無(wú)血清體系。

如果你在做干細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞治療研發(fā)，想要穩(wěn)定、提效、合規(guī)的基質(zhì)方案，laminin521會(huì)是你的優(yōu)選。想要protocol和選型指南的小伙伴，歡迎聯(lián)系Biolamina中國(guó)直售提供商上海曼博生物。