一、產(chǎn)品基本信息

屬性 | 詳細信息

靶種屬 | 小鼠

宿主 | 驢

抗體形式 | 全 IgG

特異性 | IgG（H+L，即重鏈和輕鏈）

最小交叉反應 | 牛、雞、山羊、豚鼠、敘利亞倉鼠、馬、人、兔、綿羊血清蛋白

標記物 | Cyanine Cy3

產(chǎn)品類別 | 親和純化全 IgG 抗體

克隆性 | 多克隆

二、產(chǎn)品描述

本品為驢源抗小鼠 IgG 二抗，經(jīng)免疫親和層析純化，采用 Cy3 熒光染料標記。由Jackson推出，艾美捷代理?；诿庖唠娪竞?或 ELISA 驗證，該抗體可與小鼠 IgG 全分子反應，同時也能識別其他小鼠免疫球蛋白亞類的輕鏈。經(jīng)檢測，未發(fā)現(xiàn)與非免疫球蛋白血清蛋白的交叉反應。

該抗體已通過 ELISA 及/或固相吸附驗證，確保與牛、雞、山羊、豚鼠、敘利亞倉鼠、馬、人、兔、綿羊血清蛋白的最小交叉反應。但仍可能與其他種屬的免疫球蛋白發(fā)生交叉反應，建議用戶在實驗中設(shè)置適當?shù)膶φ铡?/p>

抗體形式：全 IgG 的特性

本產(chǎn)品為全 IgG 形式，即從抗血清中通過免疫親和層析分離得到的完整抗體分子。全 IgG 包含一個 Fc 片段和兩個通過二硫鍵連接的抗原結(jié)合 Fab 片段，因此為二價抗體，平均分子量約為 160 kDa。全 IgG 形式適用于絕大多數(shù)免疫檢測實驗（如免疫熒光、流式細胞術(shù)、免疫組化等）。

三、物理狀態(tài)與儲存條件

凍干粉狀態(tài)

物理狀態(tài)：凍干固體

儲存溫度：2–8°C（凍干粉）

產(chǎn)品規(guī)格單中注明了復溶所需去離子水的體積，請按指示操作。

復溶方法

1. 加入指定體積的去離子水（參見產(chǎn)品規(guī)格書）。

2. 輕輕混勻，若溶液未w全澄清，可短暫離心去除不溶物。

3. 工作稀釋液應現(xiàn)用現(xiàn)配。

4. 復溶后的未稀釋液體在 2–8°C 下穩(wěn)定約 6 周。

長期儲存（復溶后）

分裝凍存：分裝后于 -70°C 或以下冷凍保存。避免反復凍融。

甘油保存法：加入等體積的甘油（ACS 級或更優(yōu)），使甘油終濃度為 50%，混勻后于 -20°C 以液體形式保存。

有效期：自復溶之日起 1 年。若檢測結(jié)果符合預期用途，可適當延長有效期。

純化與緩沖體系

參數(shù) | 說明

純化方法 | 使用瓊脂糖偶聯(lián)抗原進行免疫親和層析

緩沖液 | 0.01 M 磷酸鈉，0.25 M NaCl，pH 7.6

穩(wěn)定劑 | 15 mg/ml 牛血清白蛋白（無 IgG、無蛋白酶）

防腐劑 | 0.05% 疊d化鈉

注意：疊d化鈉可能抑制某些酶標記體系（如 HRP），若用于酶聯(lián)檢測，請適當考慮。

四、推薦工作濃度與稀釋范圍

稀釋比例：1:100 – 1:800（適用于大多數(shù)應用）

稀釋倍數(shù)以范圍形式提供，因為最佳稀釋度取決于多種因素，包括：

抗原密度

細胞/組織的通透性

樣本類型（冰凍切片、石蠟切片、細胞爬片等）

檢測設(shè)備靈敏度

建議：s次使用時，對該稀釋范圍進行梯度預實驗（例如 1:100、1:200、1:400、1:800），以確定特定實驗體系中的最佳工作濃度。

五、Cy3 熒光染料特性

Cy3 是一種橙紅色熒光染料，與傳統(tǒng)的四甲基羅丹明（TRITC）相比，具有更亮、更耐光猝滅、背景更低的優(yōu)點。

光學參數(shù) | 數(shù)值

最大激發(fā)波長（Amax） | 550 nm

最大發(fā)射波長（Emax） | 570 nm

濾光片兼容性

熒光顯微鏡：可使用傳統(tǒng)的 TRITC 濾光片組，因為 Cy3 的激發(fā)和發(fā)射光譜與 TRITC 幾乎相同。推薦將 Cy3 作為 TRITC 的更亮替代品。

激光激發(fā)：

氬離子激光（514 nm 或 528 nm 譜線）：可激發(fā)約 50% 的最大強度。

氦氖激光（543 nm 譜線）或汞燈（546 nm 譜線）：可激發(fā)約 75% 的最大強度。

六、多色成像建議

與 FITC 雙標：建議使用窄帶通發(fā)射濾光片檢測 FITC，以很大程度減少 Cy3 在 FITC 通道中的串色。

與 Alexa Fluor 647 多標：Cy3 可與 AF647 搭配用于共聚焦顯微鏡。如需更理想的光譜間隔（介于綠色熒光染料如 AF488 與遠紅染料如 AF647 之間），可考慮 Rhodamine Red-X。

七、應用場景

本產(chǎn)品適用于以下實驗技術(shù)（需根據(jù)實驗體系優(yōu)化稀釋倍數(shù)）：

免疫熒光（IF）：細胞爬片、冰凍切片、石蠟切片。

流式細胞術(shù)（FACS）：細胞表面或胞內(nèi)染色。

免疫組化（IHC）：尤其適用于需要多重染色的組織切片。

其他需要橙紅色熒光檢測的免疫學實驗。

八、質(zhì)量控制與驗證

通過免疫電泳和/或 ELISA 確認抗體與小鼠 IgG 全分子的反應性。

通過固相吸附確認對多種常見種屬血清蛋白的交叉反應最小化。

未檢測到針對非免疫球蛋白血清蛋白的抗體，表明純度和特異性良好。

九、操作注意事項

1. 復溶后澄清度：若復溶后溶液渾濁，應以最大速度離心 5–10 分鐘，取上清使用。

2. 避免反復凍融：分裝凍存是維持活性的最佳方法。若采用甘油保存法，可直接從 -20°C 取用液體，無需反復凍融。

3. 工作液穩(wěn)定性：稀釋后的工作液應在當日使用完畢，不建議保存。

4. 避光操作：Cy3 為熒光染料，所有操作及孵育步驟應盡量避免強光直射，以保持熒光信號強度。

5. 防腐劑兼容性：疊d化鈉對活細胞有毒，若用于活細胞染色，需通過透析或稀釋降低疊d化鈉濃度。

警告：本產(chǎn)品僅限研究使用，不適用于人類或獸醫(yī)診斷治療。