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◆概述
發(fā)光探針是在化學(xué)反應(yīng)中,由于底物從激發(fā)態(tài)躍遷至基態(tài)而發(fā)光的一類物質(zhì)。該過程由特定的化學(xué)反應(yīng)觸發(fā),使得發(fā)光探針具有高選擇性和低背景噪聲,從而增強(qiáng)信號檢測。
由于發(fā)光探針覆蓋的動態(tài)范圍廣泛,常被用于ATP與鈣離子的動力學(xué)研究。它還能作為報告基因,用于可視化特定細(xì)胞或研究基因表達(dá)。FUJIFILM Wako可提供多種穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶的 JCRB 細(xì)胞系。
◆JCRB細(xì)胞系
JCRB(Japan Collection of Research Biosources)是全球基礎(chǔ)科學(xué)與應(yīng)用科學(xué)領(lǐng)域的細(xì)胞庫,涵蓋全球多個研究領(lǐng)域。
FUJIFILM Wako與日本國立生物醫(yī)藥創(chuàng)新研究所達(dá)成合作,提供超過 1,600 種細(xì)胞系,其中包括肺細(xì)胞系與膠質(zhì)瘤細(xì)胞系。2026年, FUJIFILM Wako與JCRB細(xì)胞庫持續(xù)深度綁定,啟動中國市場的全面拓展,為廣大中國客戶提供高品質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)品。

穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶的細(xì)胞系

◆JCRB細(xì)胞系的應(yīng)用
1. 毒理學(xué)與藥物篩選
JCRB0134(MCF-7)細(xì)胞系是毒理學(xué)與藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域的重要模型,該細(xì)胞系可長期保持基因組穩(wěn)定性,用于藥物篩選,并促進(jìn)患者個體化藥物的開發(fā)。
2. 種族多樣性對個性化治療的益處
JCRB提供的細(xì)胞系在種族和性別多樣性方面具有高度代表性,因此有助于提高在細(xì)胞培養(yǎng)模型中識別有效抗癌藥物的成功率,從而降低藥物在不同人群中的失效率。
◆JCRB細(xì)胞系相關(guān)的發(fā)光探針
除D-熒光素外,F(xiàn)UJIFILM Wako還可提供性能優(yōu)于傳統(tǒng)發(fā)光探針的底物,包括AkaLumine-HCl和腔腸素。
D-熒光素 (鉀鹽)

D-熒光素(鉀鹽)的結(jié)構(gòu)
D-熒光素是一種源自螢火蟲的發(fā)光底物。在ATP與鎂離子存在時,熒光素酶將熒光素轉(zhuǎn)化為熒光素-AMP中間體,該中間體進(jìn)一步氧化生成激發(fā)態(tài)的氧化熒光素。當(dāng)氧化熒光素從激發(fā)態(tài)轉(zhuǎn)為穩(wěn)定態(tài)時,會釋放能量,產(chǎn)生黃綠色光(λmax=565nm),同時生成二氧化碳與AMP1。本產(chǎn)品為易于溶解的鉀鹽。
AkaLumine-HCl(TokeOni)

圖1. D-熒光素與AkaLumine-HCl的熒光光譜
AkaLumine-HCl是一種熒光素酶的發(fā)光底物,可用于體內(nèi)生物發(fā)光成像。該底物發(fā)射近紅外光譜范圍的光,波長范圍為670-680 nm。與傳統(tǒng)的熒光素相比,這一波長具有顯著優(yōu)勢,因?yàn)槠浔凰脱t蛋白的吸收更少。因此,這一特性使其在生物體中具有更有效的組織穿透性,實(shí)現(xiàn)更深層生物結(jié)構(gòu)的可視化,進(jìn)而提升生物發(fā)光成像在醫(yī)學(xué)研究與診斷中的實(shí)用性2。對攜帶LLC/螢火蟲熒光素酶皮下腫瘤的小鼠,分別腹腔注射兩個濃度的D-熒光素與AkaLumine-HCl。15 分鐘后,對采集到的發(fā)光圖像進(jìn)行定量分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn),使用 AkaLumine-HCl 作為底物時,底物濃度不易影響發(fā)光強(qiáng)度3。

圖2. 小鼠體內(nèi)成像結(jié)果
腔腸素h
腔腸素是脫輔基水母發(fā)光蛋白與海腎熒光素酶的發(fā)光底物,而腔腸素h是腔腸素的合成衍生物。據(jù)報道,其與水母發(fā)光蛋白形成的復(fù)合物的發(fā)光強(qiáng)度約為天然腔腸素的10倍。
本產(chǎn)品是源自海腎與橈足綱的熒光素酶與水母發(fā)光蛋白的發(fā)光底物,毒性低,細(xì)胞膜滲透性好。

圖3. 表達(dá)Nanolatern腫瘤小鼠的化學(xué)發(fā)光成像可視化,實(shí)現(xiàn)活細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的實(shí)時成像4。
發(fā)光探針產(chǎn)品列表

◆參考文獻(xiàn)
1. Griffiths MW.: J Dairy Sci. 1993 Oct, 76(10), 3118-3125.
2. Iwano S., et al.: Tetrahedron, 2013 May, 69(19), 3847-3856.
3. Kuchimaru T., et al.: Nat Commun. 2016 Jun;7:11856.
4. Saito K., et al.: Nat Commun. 2012 Dec;3:1262.
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