等度液相色譜分析儀是一種高效液相色譜儀(HPLC)的類型,它利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對樣品中的化合物進(jìn)行分離和分析。在等度液相色譜中,流動(dòng)相的組成和比例在分析過程中保持恒定,因此得名“等度”。
等度液相色譜分析儀的工作原理基于樣品分子在固定相和流動(dòng)相之間的分配和吸附作用。樣品溶液被注入色譜柱后,樣品中的各組分與固定相發(fā)生相互作用。由于各組分在固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)不同,它們在色譜柱中的移動(dòng)速度也會不同,從而實(shí)現(xiàn)組分的分離。分離后的組分依次進(jìn)入檢測器,檢測器將樣品組分的信號轉(zhuǎn)換為電信號,經(jīng)過數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄和分析,最終生成分析報(bào)告。
等度液相色譜分析儀的標(biāo)準(zhǔn)操作步驟:
一、操作前準(zhǔn)備
檢查儀器電源、線路、廢液瓶是否完好,廢液及時(shí)清空
配制等度單1流動(dòng)相,經(jīng)濾膜過濾、超聲脫氣15-20分鐘
檢查色譜柱連接無誤,確認(rèn)柱流向正確,擰緊接頭
準(zhǔn)備待測樣品,樣品過濾除雜,備好標(biāo)準(zhǔn)對照品
二、開機(jī)預(yù)熱
依次打開主機(jī)電源、高壓泵、檢測器、電腦工作站
開啟檢測器光源,預(yù)熱30分鐘,穩(wěn)定基線
設(shè)置儀器環(huán)境溫度,穩(wěn)定實(shí)驗(yàn)室環(huán)境
三、流動(dòng)相平衡
將吸液頭放入流動(dòng)相瓶內(nèi),排盡管路氣泡
設(shè)置合適流速、柱溫、檢測波長
開啟高壓泵,以設(shè)定流速沖洗平衡色譜柱
持續(xù)走基線,直至基線平穩(wěn)無漂移
四、標(biāo)準(zhǔn)品測定
用進(jìn)樣針吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液,潤洗進(jìn)樣閥3-5次
準(zhǔn)確進(jìn)樣,啟動(dòng)工作站開始采集數(shù)據(jù)
記錄標(biāo)準(zhǔn)品出峰時(shí)間、峰面積,建立標(biāo)準(zhǔn)參照
五、樣品檢測
潤洗進(jìn)樣閥后注入待測樣品
點(diǎn)擊開始運(yùn)行,自動(dòng)完成樣品分離檢測
同一批次樣品連續(xù)測定,做好編號記錄
觀察出峰狀態(tài),異常及時(shí)停機(jī)調(diào)整
六、數(shù)據(jù)處理
檢測完成保存圖譜與實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
對照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品含量、濃度
核對數(shù)據(jù)無誤,導(dǎo)出打印檢測報(bào)告
七、關(guān)機(jī)清洗流程
樣品全部測完后,先用純水沖洗含鹽流動(dòng)相管路
更換甲醇/乙腈有機(jī)相,低流速沖洗色譜柱及整個(gè)流路
沖洗干凈后,依次關(guān)閉高壓泵、檢測器光源
關(guān)閉儀器主機(jī)、電腦電源
整理進(jìn)樣針、器皿,清理操作臺,做好使用記錄
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