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關(guān)鍵詞:1-1-1004A, 1-1-1004B、Mediomics檢測試劑盒、美國Mediomics代理、Mediomics Bridge-It試劑盒、FRET-PINCER檢測試劑盒、TRF-PINCER IgG定量檢測、cAMP檢測試劑盒、人白蛋白檢測試劑盒、人胰島素檢測試劑盒、兔IgG檢測試劑盒、均相熒光檢測
? 關(guān)于 Mediomics
美國 Mediomics 是一家專注于生命科學(xué)檢測技術(shù)與產(chǎn)品化的創(chuàng)新型生物技術(shù)企業(yè),核心方向圍繞 快速、均相(homogeneous)、可定量 的檢測試劑盒與生物傳感平臺(tái)展開工作。其產(chǎn)品面向?qū)W術(shù)研究機(jī)構(gòu)、藥物研發(fā)與篩選部門、即時(shí)檢測相關(guān)應(yīng)用領(lǐng)域、以及涉及醫(yī)療與環(huán)境研究方向的組織和實(shí)驗(yàn)室。
Mediomics 所解決的問題,本質(zhì)上來自一個(gè)長期存在的矛盾:越來越多的實(shí)驗(yàn)場景需要定量、需要通量、需要重復(fù)性,但傳統(tǒng)檢測方法——尤其是以 ELISA 為代表的固相包被-洗滌流程——在操作復(fù)雜度和時(shí)間成本上始終是一道繞不開的坎。 當(dāng)檢測需求從"偶爾做一次"變成"每天幾十板"時(shí),流程的每一步冗余都會(huì)被放大成整體效率瓶頸。
因此,Mediomics 的技術(shù)路線選擇了另一條路徑:不做固相包被,不做反復(fù)洗滌,而是通過精心設(shè)計(jì)的分子識(shí)別與熒光能量轉(zhuǎn)移機(jī)制,讓目標(biāo)分子的存在與濃度直接在溶液相中被轉(zhuǎn)化為可讀的熒光信號——也就是業(yè)內(nèi)常說的 mix-and-measure(混合即測)均相檢測。
公司已通過 ISO 9001:2015 質(zhì)量管理體系 的標(biāo)準(zhǔn)化運(yùn)作框架,貫穿于產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)批次控制、文檔管理以及交付環(huán)節(jié)的整個(gè)鏈條。對于實(shí)驗(yàn)室用戶而言,這意味著每一批試劑盒背后的生產(chǎn)記錄、質(zhì)控節(jié)點(diǎn)和一致性可追溯,而不僅僅是"能出結(jié)果"。
Mediomics 的多項(xiàng)核心技術(shù)平臺(tái)源自與研究型大學(xué)機(jī)構(gòu)的合作與技術(shù)許可安排,并在此基礎(chǔ)上完成了從學(xué)術(shù)原理到可量產(chǎn)試劑盒的工程化落地。其平臺(tái)技術(shù)曾獲得來自美國國家衛(wèi)生研究院(NIH)下屬研究所、美國國家科學(xué)基金會(huì)(NSF)等機(jī)構(gòu)的研究資助支持,用于推進(jìn)檢測新方法與捕獲試劑開發(fā)相關(guān)的項(xiàng)目工作。
?? 下圖為上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司作為美國Mediomics授權(quán)代理商的授權(quán)書

? 為什么均相檢測值得認(rèn)真對待——核心優(yōu)勢拆解
▎核心優(yōu)勢一:其流程精簡到「一步混合 + 短孵育 = 讀數(shù)」
傳統(tǒng) ELISA 的基本節(jié)奏是:
包被 → 封閉 → 洗滌 → 加樣 → 孵育 → 洗滌 → 加檢測抗體 → 孵育 → 洗滌 → 加酶標(biāo)二抗 → 孵育 → 洗滌 → 加底物 → 讀數(shù)
每一步之間都有等待和洗滌,每一步都是潛在的人為偏差入口。
而 Mediomics 的 FRET-PINCER 與 TRF-PINCER 系列的思路是:
試劑預(yù)混 → 加樣本 → 混合 → 孵育(通常約 30 分鐘)→ 直接上機(jī)讀數(shù)
沒有包被過夜,沒有封閉,沒有洗板機(jī)依賴。把操作變量縮減之后,批內(nèi)和批間變異自然更可控。
▎核心優(yōu)勢二:溶液相識(shí)別——用分子設(shè)計(jì)替代物理吸附
PINCER 平臺(tái)的巧妙之處不在于"更強(qiáng)力地抓住目標(biāo)",而在于把識(shí)別事件編碼進(jìn)一段可被熒光信號報(bào)告的結(jié)構(gòu)變化中。
其核心構(gòu)件是一段經(jīng)過功能化設(shè)計(jì)的 DNA 雙鏈"夾鉗"結(jié)構(gòu)——其中兩個(gè)半位點(diǎn)(half-sites)各自標(biāo)記了不同的熒光基團(tuán)/淬滅基團(tuán)或能量供體-受體對。當(dāng)目標(biāo)分子(通過特異性抗體或適配體的介導(dǎo))促使 DNA 半位點(diǎn)重新組合為完整雙鏈時(shí),空間構(gòu)象的變化會(huì)反映在熒光信號的增減上。目標(biāo)濃度越高,構(gòu)象轉(zhuǎn)變的程度越強(qiáng),信號變化越可量化。
這種做法的好處是:它不依賴塑料孔壁上的蛋白吸附均勻度,也就規(guī)避了微孔板批間差異帶來的隱性漂移。
▎核心優(yōu)勢三:Bridge-It 平臺(tái)——為 DNA 結(jié)合蛋白與信號通路分子量身定制
如果說 PINCER 更像一把"通用靶向定量尺",那么 Bridge-It 就是專門為 DNA 結(jié)合蛋白(轉(zhuǎn)錄因子、CREB、cAMP 響應(yīng)元件結(jié)合蛋白等)及其配體調(diào)節(jié)效應(yīng) 打造的工具箱。
Bridge-It 的設(shè)計(jì)同樣源于一個(gè)干凈的概念:把一個(gè)蛋白的結(jié)合位點(diǎn)拆成兩段 DNA 半位點(diǎn),各自帶上熒光標(biāo)記。只有當(dāng)目標(biāo) DNA 結(jié)合蛋白(及其激活/抑制狀態(tài))在場并正確橋接兩個(gè)半位點(diǎn)時(shí),熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)才會(huì)發(fā)生可測量的變化。
這使得它在 cAMP 信號通路研究、磷酸二酯酶(PDE)活性檢測、小分子配體篩選 等場景中,能夠以均相方式給出功能性讀數(shù),而非僅僅是一個(gè)"總蛋白存在與否"的靜態(tài)標(biāo)記。
▎核心優(yōu)勢四:TRF(時(shí)間分辨熒光)通道降低背景——適合復(fù)雜基質(zhì)
部分 PINCER 與 Bridge-It 產(chǎn)品線提供了 TR-FRET / TRF-PINCER 變體。時(shí)間分辨熒光的本質(zhì)優(yōu)勢是:它在納秒級脈沖后延時(shí)讀取信號,過濾掉短壽命的背景熒光干擾(培養(yǎng)上清中的酚紅、培養(yǎng)基成分、溶血樣本的血紅蛋白等都會(huì)產(chǎn)生短壽命自發(fā)熒光)。
這意味著當(dāng)你要從細(xì)胞培養(yǎng)上清、血清稀釋液、發(fā)酵液等"不那么干凈的"基質(zhì)中拿數(shù)據(jù)時(shí),TRF 版本往往能提供更好的信噪比表現(xiàn)。
▎核心優(yōu)勢五:可規(guī)模化到 384 孔——與 HTS 節(jié)奏對齊
很多試劑盒停留在 96 孔就夠用了,但 Mediomics 從平臺(tái)搭建之初就把 384 孔格式作為正式產(chǎn)品線來配套(而非事后改版)。384 孔不只是"孔變小了",它意味著:
• 試劑消耗量進(jìn)一步壓縮
• 單板的并行樣本數(shù)提升 4 倍
• 機(jī)械臂移液平臺(tái)與多層板棧系統(tǒng)的坐標(biāo)邏輯可以直接對接
如果你所在團(tuán)隊(duì)的痛點(diǎn)之一是"篩選通量卡在手工 ELISA 上",這一條值得重點(diǎn)評估。
? 技術(shù)平臺(tái)與應(yīng)用場景對應(yīng)說明
Mediomics 的產(chǎn)品體系可以按照檢測對象和所用平臺(tái)進(jìn)行歸類,以便用戶根據(jù)自身研究目標(biāo)快速對號入座。
針對 DNA 結(jié)合蛋白活性、轉(zhuǎn)錄因子功能狀態(tài)、cAMP 信號通路研究以及磷酸二酯酶 PDE 活性檢測等方向,主要依托 Bridge-It® Assay Platform 完成。該平臺(tái)采用熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)或時(shí)間分辨熒光(TR-FRET)作為讀出方式,能夠在均相體系中反映蛋白與 DNA 的相互作用強(qiáng)度及小分子調(diào)節(jié)劑的干預(yù)效果。
針對蛋白質(zhì)類生物標(biāo)志物(例如白蛋白、C 反應(yīng)蛋白、胰島素等)以及各類抗體(如 IgG、IgM)的定量檢測,主要采用 FRET-PINCER® 或 TRF-PINCER® Assay Platform。這兩類平臺(tái)同樣基于均相混合即測邏輯,通過構(gòu)象變化驅(qū)動(dòng)熒光信號變化,適用于從基礎(chǔ)科研到藥物篩選過程中對蛋白濃度的精確把控。
針對小分子代謝物(如 SAM、L-氨酸、L-甲氨酸等)的定量分析,Mediomics 提供了 Bridge-It® 代謝物熒光檢測系列。該系列利用酶耦聯(lián)反應(yīng)或特異性結(jié)合事件,將小分子濃度轉(zhuǎn)化為熒光強(qiáng)度的可量化變化,為代謝通路研究和發(fā)酵工藝優(yōu)化提供高通量檢測手段。
需要特別說明的是,以上所有產(chǎn)品均為 實(shí)驗(yàn)室 R&D 用途,不用于臨床診斷中對人類或動(dòng)物疾病的診斷或治療判定。
? 熱門產(chǎn)品詳細(xì)介紹
① Human Albumin FRET-PINCER 檢測試劑盒(人血清白蛋白檢測)
? 產(chǎn)品定位
用于在生物樣本中定量人血清白蛋白(Human Albumin / HSA)的濃度。白蛋白是最常見的血清蛋白參照指標(biāo)之一,也是藥代動(dòng)力學(xué)、蛋白穩(wěn)定性、樣本質(zhì)量核查中的常規(guī)關(guān)注對象。
? 產(chǎn)品特點(diǎn)
• 均相檢測,無需包被板或洗板步驟
• 定量范圍可覆蓋生理/病理研究中常見的白蛋白濃度區(qū)間
• 與多數(shù)標(biāo)準(zhǔn)微孔板熒光讀數(shù)儀兼容
• 反應(yīng)體系可在 96 孔或 384 孔格式下運(yùn)行
• 樣本體積需求相對較低,適合珍貴樣本并行復(fù)測
? 存儲(chǔ)條件
試劑盒各組分通常應(yīng)冷藏儲(chǔ)存于 2–8°C,避光保存;凍融循環(huán)應(yīng)避免;具體開封后的有效期以隨盒說明書標(biāo)注為準(zhǔn)。熒光標(biāo)記類組分對光敏感,操作時(shí)建議遮光環(huán)境或鋁箔包裹。
? 工作原理
該試劑盒基于 FRET-PINCER 構(gòu)象傳感架構(gòu)——利用對白蛋白具有特異性的結(jié)合試劑(抗體/適配體元件)與經(jīng)熒光標(biāo)記的 DNA 夾鉗元件之間的競爭或橋接關(guān)系,使得白蛋白的結(jié)合事件被轉(zhuǎn)化為供體-受體熒光能量轉(zhuǎn)移效率的可逆變化。白蛋白濃度越高,形成的特定構(gòu)象比例越大,F(xiàn)RET 信號的變化幅度越可擬合為標(biāo)準(zhǔn)曲線。
? 使用方法概要
1. 取出試劑盒各組分,平衡至室溫(按說明書指定時(shí)長)
2. 配制標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋系列
3. 將標(biāo)準(zhǔn)品/待測樣本加入微孔板對應(yīng)孔中
4. 加入預(yù)混好的檢測試劑混合液(一步混合)
5. 室溫或指定溫度下孵育約 30 分鐘(具體以說明書為準(zhǔn))
6. 置入熒光讀數(shù)儀,按指定激發(fā)/發(fā)射波長設(shè)置采集數(shù)據(jù)
7. 以標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合未知樣本濃度
② Human Insulin FRET-PINCER 檢測試劑盒(人胰島素檢測)
? 產(chǎn)品定位
面向糖尿病相關(guān)研究、胰島功能研究、以及與代謝通路調(diào)控相關(guān)的藥物篩選工作中對胰島素水平的定量需求。
? 產(chǎn)品特點(diǎn)
• 均相操作邏輯,省去包被/洗滌/封閉全流程
• 對胰島素分子具有特異性識(shí)別設(shè)計(jì),交叉反應(yīng)經(jīng)篩選控制
• 適合在細(xì)胞分泌模型的上清批量檢測中使用
• 可在 96 孔或 384 孔格式下運(yùn)行
? 存儲(chǔ)條件
2–8°C 冷藏避光儲(chǔ)存;各組分開封后按說明書提示使用期限操作;避免直接光照于熒光標(biāo)記組分。
? 工作原理
胰島素分子通過與試劑盒中的特異性結(jié)合元件形成復(fù)合物,驅(qū)動(dòng) PINCER 結(jié)構(gòu)中 DNA 半位點(diǎn)的重組狀態(tài)改變,進(jìn)而調(diào)制 FRET 信號對的能量轉(zhuǎn)移效率。信號變化與溶液中胰島素濃度之間存在可校準(zhǔn)的定量關(guān)系。相比夾心 ELISA 的兩步抗體孵育,這種設(shè)計(jì)把整個(gè)過程壓縮為一個(gè)混合平衡過程。
? 使用方法概要
1. 準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)曲線:用配套稀釋液將胰島素標(biāo)準(zhǔn)品做系列稀釋
2. 樣本處理:如涉及血清/血漿,按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)確定是否需要預(yù)稀釋以避免基質(zhì)超載(具體以說明書的線性范圍為準(zhǔn))
3. 加樣:每孔加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣本
4. 加試劑:加入預(yù)混檢測試劑(通常為一管即用型混合液或兩液分步加入,依版本而定)
5. 混勻:輕輕振蕩混勻(避免產(chǎn)生氣泡)
6. 孵育:室溫暗處孵育約 30 分鐘
7. 讀數(shù):設(shè)定好激發(fā)/發(fā)射通道后直接讀取熒光值
8. 計(jì)算:軟件四參數(shù)邏輯斯蒂(4-PL)或線性擬合均可,取決于曲線形態(tài)
③ Rabbit IgG FRET-PINCER 檢測試劑盒(兔 IgG 定量檢測)
? 產(chǎn)品定位
用于生物學(xué)樣本中兔免疫球蛋白 G(rIgG)濃度的定量檢測。典型應(yīng)用包括疫苗與藥物免疫原性相關(guān)的抗體滴度跟蹤、pull-down 或 Co-IP 之后的兔抗體回收量評估、以及一般兔源抗體相關(guān)預(yù)臨床研究中的水平監(jiān)測。
? 產(chǎn)品特點(diǎn)
• 一步混合、短孵育(約 30 分鐘)即可讀數(shù)
• 定量可重復(fù)性較好
• 檢測限可延伸至 ng/mL 級別(具體數(shù)值依批次與基質(zhì)而異)
• 交叉反應(yīng)方面:經(jīng)設(shè)計(jì)篩選后與人 IgG、小鼠 IgG、小鼠 IgM 的交叉反應(yīng)控制在低水平
• 可直接用于較大批量樣本的同時(shí)處理
? 存儲(chǔ)條件
冷藏(2–8°C)避光儲(chǔ)存;標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶后按說明書建議分裝凍存或限定短期使用;反復(fù)凍融應(yīng)避免。
? 工作原理
試劑盒中的 DNA 夾鉗結(jié)構(gòu)兩端攜帶熒光標(biāo)記對,兔 IgG 的特異性結(jié)合元件與目標(biāo) IgG 結(jié)合后,誘導(dǎo)夾鉗閉合/解離狀態(tài)的偏移,從而改變供體與受體之間的空間距離——FRET 效率隨之變化。儀器讀取的信號差值即對應(yīng)樣本中 rIgG 的量。
? 使用方法概要
1. 標(biāo)準(zhǔn)品用指定緩沖液復(fù)溶并做系列稀釋建立標(biāo)準(zhǔn)曲線
2. 待測樣本如需預(yù)處理(如澄清、稀釋),按說明書建議方法操作
3. 每孔加入樣本或標(biāo)準(zhǔn)品
4. 加入預(yù)混檢測試劑,混勻
5. 室溫孵育約 30 分鐘(避光)
6. 上熒光讀數(shù)儀采集
7. 用標(biāo)準(zhǔn)曲線反算濃度,必要時(shí)乘以稀釋倍數(shù)
④ Human / Mouse IgG TRF-PINCER 檢測試劑盒(人 IgG / 小鼠 IgG 定量,時(shí)間分辨熒光版)
? 產(chǎn)品定位
用于人源或小鼠免疫球蛋白 G 的定量檢測,尤其適合基質(zhì)較復(fù)雜、背景熒光偏高的樣本場景,例如含培養(yǎng)基成分的雜交瘤上清初篩、細(xì)胞培養(yǎng)上清中的抗體分泌監(jiān)測、蛋白純化流穿/洗脫液中的 IgG 追蹤等。
? 產(chǎn)品特點(diǎn)
• 采用時(shí)間分辨熒光(TRF)檢測模式,延時(shí)讀取以壓制短壽命背景熒光
• 均相混合即測,不需要包被與洗板
• 可對接 96 孔或 384 孔自動(dòng)化液體處理平臺(tái)
• 對目標(biāo)物種 IgG 有特異性識(shí)別設(shè)計(jì)
? 存儲(chǔ)條件
2–8°C 避光儲(chǔ)存;銪(Eu3?)等鑭系螯合物標(biāo)記組分對光與 pH 敏感,操作中避免強(qiáng)光直射;開封后按說明書規(guī)定時(shí)限內(nèi)用完。
? 工作原理
TRF-PINCER 的基礎(chǔ)傳感邏輯與 FRET-PINCER 同源——但供體側(cè)使用的是長壽命鑭系熒光團(tuán)(如 Eu3?螯合物),讀取系統(tǒng)在閃光激發(fā)后等待數(shù)百微秒再采集,從而"跳過"了樣本中有機(jī)分子自帶的短壽命熒光噪聲。結(jié)果是:同樣的均相夾鉗機(jī)制,但在臟基質(zhì)中獲得更干凈的基線。
? 使用方法概要
1. 按說明書復(fù)溶標(biāo)準(zhǔn)品并做梯度稀釋
2. 樣本如有明顯色素或培養(yǎng)基殘留,評估是否需要適度稀釋(線性驗(yàn)證后可回算)
3. 加樣本/標(biāo)準(zhǔn)品 → 加試劑混合液 → 輕混
4. 孵育(通常約 30 分鐘,避光或弱光環(huán)境)
5. 上 TRF 讀數(shù)儀:設(shè)置延遲時(shí)間、門寬、激發(fā)/發(fā)射參數(shù)(按說明書推薦值)
6. 以標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合濃度
⑤ Bridge-It® cAMP 檢測試劑盒(cAMP 定量 / 信號通路研究)
? 產(chǎn)品定位
cAMP是 G 蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)信號通路下游的經(jīng)典第二信使。Bridge-It cAMP 試劑盒用于定量細(xì)胞裂解液或適當(dāng)處理后的樣本中 cAMP 水平,服務(wù)于 GPCR 激動(dòng)劑/拮抗劑篩選、腺苷酸環(huán)化酶調(diào)控研究、以及磷酸二酯酶抑制劑的功能驗(yàn)證。
? 產(chǎn)品特點(diǎn)
• 均相 FRET 型檢測,避免 cAMP 的多次轉(zhuǎn)移與衍生化步驟
• 可檢測低濃度范圍的 cAMP 變化
• 適配 96 孔和 384 孔格式
• 與高通量篩選的節(jié)拍匹配
? 存儲(chǔ)條件
冷藏避光儲(chǔ)存;cAMP 標(biāo)準(zhǔn)品與標(biāo)記試劑對溫度波動(dòng)敏感,避免反復(fù)取出回溫;嚴(yán)格按說明書指示的儲(chǔ)存分區(qū)放置(有些組分可能要求 ≤-20°C 冷凍)。
? 工作原理
Bridge-It 平臺(tái)的 cAMP 檢測利用的是 cAMP 與其結(jié)合蛋白(如 PKA 調(diào)節(jié)亞基衍生的 cAMP 結(jié)合域)之間的特異性相互作用 來驅(qū)動(dòng) DNA 半位點(diǎn)的裝配狀態(tài)變化。簡而言之:cAMP 在場時(shí),會(huì)與標(biāo)記系統(tǒng)中的結(jié)合蛋白元件結(jié)合,從而讓兩個(gè) DNA 半位點(diǎn)不再被橋接——或反向邏輯(依具體版本設(shè)計(jì))——最終體現(xiàn)為 FRET 信號對的比值 shift。因?yàn)?cAMP 是直接驅(qū)動(dòng)者,信號變化正反映其濃度。
? 使用方法概要
1. 制備 cAMP 標(biāo)準(zhǔn)曲線(用配套緩沖液稀釋)
2. 細(xì)胞經(jīng)處理后,用提供的裂解/終止液收集(具體方式依細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)調(diào)整)
3. 裂解液離心取上清,轉(zhuǎn)移至檢測板
4. 加入預(yù)混檢測試劑,混勻
5. 孵育(通常在室溫暗處,約 30–60 分鐘視版本而定)
6. 上熒光讀數(shù)儀讀取 FRET 通道比值
7. 以 cAMP 標(biāo)準(zhǔn)曲線換算樣本中的 pmol/mL 或 nM 等值
⑥ Bridge-It® PDE 檢測試劑盒(磷酸二酯酶活性檢測)
? 產(chǎn)品定位
用于研究磷酸二酯酶(PDE)的酶活水平或篩選 PDE 抑制劑。PDE 是 cAMP/cGMP 信號衰減的關(guān)鍵酶,也是多種心血管與中樞神經(jīng)領(lǐng)域藥物的靶點(diǎn)。
? 產(chǎn)品特點(diǎn)
• 基于 cAMP(或 cGMP 衍生底物)的酶促轉(zhuǎn)化,用 FRET 信號變化報(bào)告底物消耗/產(chǎn)物生成
• 均相操作,適合比較不同化合物對 PDE 活性的抑制效果
• 可擴(kuò)展為 384 孔用于初篩規(guī)模的工作
? 存儲(chǔ)條件
冷藏(部分酶組分可能要求冷凍分裝);底物與熒光探針避光;嚴(yán)格遵循每次取用后的即時(shí)回冷。
? 工作原理
該系統(tǒng)將 PDE 催化的環(huán)核苷酸水解反應(yīng)與一個(gè) FRET 可報(bào)告的二級狀態(tài)耦合起來:當(dāng) PDE 活躍時(shí),底物的減少(或產(chǎn)物的出現(xiàn))會(huì)改變結(jié)合蛋白- DNA 夾鉗系統(tǒng)的平衡位置,從而使 FRET 信號沿一個(gè)方向移動(dòng)。加入潛在抑制劑后,信號偏移被壓制——由此可計(jì)算抑制率與 IC?? 等參數(shù)。
? 使用方法概要
1. 配制 PDE 酶工作液與測試化合物稀釋系列
2. 預(yù)孵育:化合物 + 酶(±緩沖體系)短暫預(yù)溫
3. 啟動(dòng)反應(yīng):加入含熒光標(biāo)記底物的混合檢測試劑
4. 孵育:通常在室溫或 37°C 視版本而定,時(shí)間窗口由動(dòng)力學(xué)線性段決定
5. 終止或直接在時(shí)間終點(diǎn)讀取(依方案選擇動(dòng)力學(xué)模式或終點(diǎn)模式)
6. 上機(jī)讀 FRET 信號,用對照孔(最大活性 vs. 零活性)歸一化后作抑制曲線
⑦ Bridge-It® S-腺苷蛋氨酸(SAM)/ L-氨酸 / L-甲氨酸 熒光檢測試劑盒
? 產(chǎn)品定位
這一類面向的是代謝物與小分子定量,而非蛋白質(zhì)。SAM(S-adenosyl methionine)是甲基供體代謝中的核心分子;L-氨酸與 L-甲氨酸則是氨基酸代謝與微生物發(fā)酵監(jiān)控中的常用指標(biāo)。
? 產(chǎn)品特點(diǎn)
• 均相熒光法,避免了傳統(tǒng)的衍生化 HPLC 或 LC-MS 的儀器門檻(在不追求同位素級區(qū)分的前提下)
• 適合對多個(gè)樣本做快速批量篩查
• 可選 96 孔 / 384 孔格式
? 存儲(chǔ)條件
所有標(biāo)準(zhǔn)品粉末/儲(chǔ)備液嚴(yán)格按說明書溫區(qū)儲(chǔ)存(常涉及 -20°C 冷凍分裝);代謝物標(biāo)準(zhǔn)品易氧化或吸濕,開瓶后操作宜在干燥環(huán)境快速完成并密封歸位。
? 工作原理
這幾款試劑盒的操作邏輯是:代謝物的存在調(diào)節(jié)一個(gè)酶耦聯(lián)反應(yīng)或結(jié)合事件的平衡,該平衡與一個(gè) DNA 半位點(diǎn)組裝狀態(tài)掛扣,最終變?yōu)闊晒庑盘柕目闪炕?。換言之,它不是讓你去"看見 SAM 的分子結(jié)構(gòu)",而是讓 SAM 的濃度變成一個(gè)可被熒光讀數(shù)儀線性響應(yīng)的數(shù)字。
? 使用方法概要
1. 標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶定容 → 系列稀釋曲線
2. 樣本如為發(fā)酵液或組織提取液,需先去除顆粒(離心/濾膜)并確保 pH 落在兼容區(qū)間
3. 加樣本/標(biāo)準(zhǔn)品 → 加預(yù)混試劑 → 混勻
4. 孵育(通常 30 分鐘內(nèi)可讀數(shù),依具體代謝物版本確認(rèn))
5. 讀熒光值 → 由標(biāo)準(zhǔn)曲線反算濃度 → 必要時(shí)按稀釋因子校正
? 這些產(chǎn)品能解決實(shí)驗(yàn)中的哪些實(shí)際問題?
? 替代 ELISA 時(shí)的"人力瓶頸"
當(dāng)你的項(xiàng)目階段從論證可行性推進(jìn)到每周固定跑幾十塊板的時(shí)候,ELISA 的洗滌-封閉-再洗滌循環(huán)會(huì)變成人員排班問題。Mediomics 的均相檢測把操作壓縮為加樣+混合+孵育+讀數(shù),這意味著:同一個(gè)人可以在同一時(shí)段照看更多板,或者把節(jié)省出來的時(shí)間放回實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)本身。
? 洗板誤差與邊緣效應(yīng)的隱性干擾
任何做過大規(guī)模 ELISA 的人都知道:洗板機(jī)針堵、液面殘留不均、邊緣孔蒸發(fā)快,這些都會(huì)變成數(shù)據(jù)里的"板效應(yīng)"。均相檢測沒有洗板這一步,物理吸附相關(guān)的板間偏差來源被消去,數(shù)據(jù)質(zhì)量的控制重心從"洗得干不干凈"轉(zhuǎn)向"加得準(zhǔn)不準(zhǔn)"(這恰好是移液系統(tǒng)和人員培訓(xùn)能更穩(wěn)定管理的部分)。
? 復(fù)雜基質(zhì)的背景熒光問題
培養(yǎng)上清里有酚紅,血清樣本帶紅素與血紅蛋白,植物提取液有葉綠素碎片——這些東西在普通熒光檢測中會(huì)"自己發(fā)光",抬高基線、壓低動(dòng)態(tài)范圍。TRF-PINCER 系列通過延時(shí)讀取把短壽命背景濾掉,讓信號更多來自鑭系標(biāo)記物本身。這對直接從生物反應(yīng)體系取樣的工作尤其有意義。
? GPCR 篩選中 cAMP 檢測的周轉(zhuǎn)速度
傳統(tǒng) cAMP 檢測如果走 ELISA 或放射免疫法(后者在很多單位已被限制),要么步驟多、要么審批煩。Bridge-It cAMP 提供了一個(gè)在 微孔板熒光讀數(shù)儀上就能完成的均相替代路徑,使得你在做化合物初篩時(shí)可以把"每輪周轉(zhuǎn)"從兩天壓到一個(gè)下午。
? 雜交瘤上清 / 瞬轉(zhuǎn)上清的抗體滴度快速摸底
單抗項(xiàng)目中,建完融合后往往要面對上百個(gè)孔的條件培養(yǎng)基,需要判斷哪些孔在產(chǎn) IgG、產(chǎn)多少。用 TRF-PINCER IgG 定量做一輪初篩,比把每塊 96 孔板都鋪 ELISA 包被板要省力得多——而且因?yàn)槭蔷?,你可以把樣本直接從上清轉(zhuǎn)移過來稀釋后加試劑就行。
? 代謝物批量樣本不想排隊(duì)等儀器
如果手頭有一批微生物培養(yǎng)取樣或組織提取液想看 SAM / 氨酸走向,但又不一定需要每次都上 LC-MS,熒光均相試劑盒給你一個(gè)中間精度的快速通道:先篩趨勢、挑關(guān)鍵時(shí)間點(diǎn)、再對重點(diǎn)樣本補(bǔ)儀器確認(rèn)——整體工作量反而更合理。
? 購買與使用——常見問題解答(FAQ)
Q1:Mediomics 的試劑盒能代替我正在用的 ELISA 嗎?是不是"一樣的東西只是換個(gè)名字"?
A:不全一樣,也不聲稱在所有場景下都能一對一替換。核心區(qū)別在于:Mediomics 的 PINCER / Bridge-It 系列是均相(溶液相)檢測,不需要固相包被和洗板;而 ELISA 依賴固相捕獲。如果你的實(shí)驗(yàn)痛點(diǎn)正好是洗板步驟帶來的變異、或者通量瓶頸、或者你本來就需要更短的周轉(zhuǎn)時(shí)間,那么切換到均相檢測通常會(huì)帶來操作流程上的實(shí)質(zhì)簡化。但如果你當(dāng)前的 ELISA 已經(jīng)建立了多年、驗(yàn)證文件齊全、且檢測限與基質(zhì)兼容性都已調(diào)通,那更合理的做法是把 Mediomics 的試劑盒當(dāng)作補(bǔ)充工具(例如用于初篩/大批量掃描),而非盲目一刀切替換。
Q2:我沒有 TRF 讀數(shù)儀,只有普通熒光酶標(biāo)儀,能用嗎?
A:FRET-PINCER 系列設(shè)計(jì)用于普通熒光讀數(shù)儀的合適通道(供體/受體通道或 FRET 比值模式,依具體試劑盒的標(biāo)記對而定)。但 TRF-PINCER 系列需要儀器支持時(shí)間分辨熒光采集模式(延時(shí)讀取、門控檢測),如果你只有普通寬場熒光通道,不建議強(qiáng)行替代——基線噪聲會(huì)吃掉動(dòng)態(tài)范圍。選型時(shí)請先確認(rèn)你們平臺(tái)儀器的檢測模式清單。
Q3:樣本可以直接用血清/血漿/細(xì)胞上清原液嗎?需要預(yù)處理嗎?
A:取決于具體試劑盒的基質(zhì)驗(yàn)證范圍。一般來說:
• 血清和血漿可能需要在說明書給出的稀釋倍數(shù)下運(yùn)行(既為了落進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)曲線線性區(qū),也為了減少基質(zhì)抑制/增強(qiáng)效應(yīng));
• 細(xì)胞上清通常可以直接取樣或輕度稀釋,但建議先做回收率/線性驗(yàn)證(加標(biāo)回收 spike-and-recover)確認(rèn)基質(zhì)效應(yīng)在可接受范圍內(nèi);
• 組織勻漿或發(fā)酵液通常需要離心澄清甚至濾膜過柱后再評估。
用隨盒說明書中的"允許基質(zhì)類型與最大耐受稀釋度"為準(zhǔn),不要僅憑經(jīng)驗(yàn)推定。
Q4:試劑到貨后怎么儲(chǔ)存才能保證效期?
A:幾條通用原則(具體以說明書為準(zhǔn)):
• 未開封試劑盒主體儲(chǔ)存于 2–8°C,避光;
• 熒光標(biāo)記組分取出后立即回冷,不要放在臺(tái)面上"等所有人一起做完";
• 標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶后如說明書允許分裝凍存,就用低吸附管分裝、標(biāo)注日期、避免反復(fù)凍融;
• 一旦開封,部分試劑的有效期會(huì)從"保質(zhì)期至某年某月"變?yōu)?開封后 X 周內(nèi)使用完畢"——這個(gè)區(qū)別很多實(shí)驗(yàn)室容易忽略。
Q5:標(biāo)準(zhǔn)曲線做不平、R2偏低,常見原因有哪些?
A:均相檢測雖簡化了步驟,但對以下幾項(xiàng)仍然敏感:
• 標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶不準(zhǔn)確(稱量/定容/pipette 校準(zhǔn))——這是最常見根因;
• 孵育溫度不一致(板的一部分靠近空調(diào)出風(fēng)口 vs. 中心區(qū)域);
• 熒光讀數(shù)儀預(yù)熱不穩(wěn)定或增益設(shè)置每次漂移(建議每次跑板時(shí)都重做標(biāo)準(zhǔn)曲線,而非跨天復(fù)用舊曲線參數(shù));
• 試劑混合后氣泡(氣泡在熒光讀取中產(chǎn)生局部光學(xué)畸變)。
排查順序通常是:先復(fù)核標(biāo)準(zhǔn)品配制→再查溫度均一性→再查儀器設(shè)置→最后才懷疑試劑本身。
Q6:384 孔版的加樣精度要求是不是很高?我們用 8 道/12 道手動(dòng)移液會(huì)不會(huì)出問題?
A:384 孔對移液精度確實(shí)比 96 孔更苛刻。如果你們的日常操作還是手動(dòng) 8 道,建議先用 96 孔格式跑通方法驗(yàn)證(標(biāo)準(zhǔn)曲線、加標(biāo)回收、批內(nèi) CV),確認(rèn)數(shù)據(jù)質(zhì)量穩(wěn)定后,再評估是否有必要升級到單道可調(diào)體積移液器 + 吸頭校正、或引入自動(dòng)分液器。Mediomics 的 384 孔產(chǎn)品本身沒問題,但"試劑盒能跑 384"和"你的操作臺(tái)能穩(wěn)定跑 384"是兩件事。
Q7:這些產(chǎn)品能用于臨床樣本的診斷報(bào)告嗎?
A:不能。Mediomics 產(chǎn)品明確標(biāo)注為實(shí)驗(yàn)室 R&D 用途,不用于人類或動(dòng)物疾病的臨床診斷或治療決策。即便檢測對象是血清白蛋白或胰島素這類臨床上也有參考意義的分子,試劑盒的驗(yàn)證層級、標(biāo)簽宣稱和使用許可都不覆蓋診斷用途。請嚴(yán)格按產(chǎn)品聲明范圍使用。
Q8:如果我的目標(biāo)分子不在上面列出的熱門品名里,Mediomics 能做定制或擴(kuò)展嗎?
A:Mediomics 的平臺(tái)技術(shù)本身是可擴(kuò)展架構(gòu)(其公開資料中也提到可根據(jù)需要協(xié)助調(diào)整檢測上限或開發(fā)新的適配方向),但具體能否承接、周期與低訂量需直接與渠道方溝通確認(rèn)。實(shí)踐中建議先把你待檢測的靶分子類型(蛋白/代謝物/小分子)、基質(zhì)(血清/上清/緩沖)、所需檢測限、樣本通量四項(xiàng)信息整理好,再發(fā)起技術(shù)咨詢效率高。
? 如何采購——中國區(qū)渠道
Mediomics 產(chǎn)品在中國的供應(yīng)與技術(shù)對接,可通過其授權(quán)代理商 上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司 進(jìn)行咨詢、報(bào)價(jià)與訂購。作為授權(quán)渠道,上海起發(fā)可提供:
• 產(chǎn)品選型建議(匹配你的檢測目標(biāo)、樣本基質(zhì)與儀器配置)
• 貨期與運(yùn)輸溫控方案確認(rèn)(涉及冷鏈熒光試劑時(shí)尤為關(guān)鍵)
• 批次文件與質(zhì)量文檔的索取協(xié)助
• 售后使用中的技術(shù)疑問轉(zhuǎn)接
如需進(jìn)一步了解某一款具體試劑盒在你的實(shí)驗(yàn)條件下是否適用,建議準(zhǔn)備以下信息后聯(lián)系:
① 待檢靶分子名稱 → ② 樣本類型(血清/上清/裂解液/緩沖等) → ③ 每批大概樣本量(決定 96 孔還是 384 孔) → ④ 所用讀數(shù)儀品牌與檢測模式(普通熒光 / TRF / FRET 比值)
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更多產(chǎn)品信息,請聯(lián)系Mediomics授權(quán)代理商:上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
(注:本文內(nèi)容基于品牌公開資料及行業(yè)常規(guī)信息整理,具體以品牌信息文檔為準(zhǔn)。)
??熱賣產(chǎn)品
貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 品牌 |
1-1-1004A | Bridge-It SAM 100 | 100well | Mediomics |
1-1-1004B | Bridge-It SAM 384 | 384well | Mediomics |
1-1-1003b | Bridge-It SAM 96 *(TRF-1-1-1003B) | 96well | Mediomics |
1-1-1006B | Bridge-It L-MET 384 | 384well | Mediomics |
1-1-1001B | Bridge-It L-Tryptophan 96 | 96well | Mediomics |
1-1-1003A | Bridge-It SAM 50 | 50well | Mediomics |
1-1-1006B-100-trialsize | Bridge-It L-MET Fluorescence Assay kit | 100-trial size | Mediomics |
122935 | Bridge-It cAMP 96 | 96well | Mediomics |
TRF-1-1-1004B | TR-FRET Bridge-It® SAM 384 | 384well | Mediomics |
TRF-1-1-1005B | TR-FRET Bridge-It® L-MET 96 | 96well | Mediomics |
TRF-1-1-1006B | TR-FRET Bridge-It® L-MET 384 | 384well | Mediomics |



