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當(dāng)前位置:上海聯(lián)碩生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>基質(zhì)膠的正確使用指南
核心作用:幫細胞附著、生長、分化,讓體外培養(yǎng)的細胞更接近體內(nèi)真實狀態(tài),解決二維培養(yǎng)細胞失活、實驗結(jié)果不準的問題。
常見類型:
1、標準型(含/不含酚紅):適合常規(guī)2D、3D細胞培養(yǎng)、血管生成、細胞侵襲等基礎(chǔ)實驗,不含酚紅款適配熒光檢測。
2、低生長因子型(GFR):適合對基質(zhì)成分要求嚴格的實驗,如細胞信號通路研究、類器官培養(yǎng),減少背景干擾。
3、高濃度型:蛋白濃度高,剛度強,適合體內(nèi)成瘤實驗、血管生成研究。
4、專用型:干細胞用、類器官用,針對性適配特殊細胞培養(yǎng)需求。
基質(zhì)膠的正確操作步驟:
1、解凍:將基質(zhì)膠置于冰中,4℃冰箱避光過夜融化(蛋白濃度高時需延長時間),切勿放冰箱門或頻繁開啟的區(qū)域。
2、分裝:解凍后渦旋混勻,用預(yù)冷移液管按單次用量分裝,立即置于-20℃以下避光保存,避免反復(fù)凍融。
3、稀釋:根據(jù)實驗需求稀釋基質(zhì)膠(茹成管實驗稀釋至6-8mg/ml),全程冰浴操作。
4、鋪膠:培養(yǎng)板置于冰上,按50μl/cm2的量加入基質(zhì)膠,均勻鋪展。
5、孵育:37℃培養(yǎng)箱中孵育30分鐘,待基質(zhì)膠凝固后即可接種細胞。
基質(zhì)膠使用注意事項:
保存與運輸注意事項:
1、保存溫度:-20℃或以下避光保存,有效期兩年,不可存放于無霜冰箱(自動除霜影響溫度)·
2、運輸要求:運輸要求:干冰運輸,到貨后若無干冰且基質(zhì)膠呈凝膠狀,及時聯(lián)系商家。
3、 解凍后保存:4℃避光可保持30天左右液態(tài),建議盡快分裝或使用。
操作過程注意事項:
1、全程低溫:所有接觸基質(zhì)膠的耗材、試劑均需4℃預(yù)冷,操作全程冰浴,避免體溫導(dǎo)致提前凝固。
2、無菌操作:解凍后在無菌區(qū)域操作,瓶身噴灑70%乙醇消毒風(fēng)干,避免污染。
3、用量控制:根據(jù)瓶身標示的蛋白濃度(批次有差異),優(yōu)化用量以保證實驗一致性。
4、顏色變化:凍融過程中可能出現(xiàn)顏色變化,屬正?,F(xiàn)象,不影響使用。
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