發(fā)表時(shí)間：2026 年 3 月 3 日

DOI：10.1182/blood.2025029516

文章發(fā)表于血液學(xué)頂刊《Blood》，研究缺血性卒中免疫血栓機(jī)制，為卒中精準(zhǔn)治療開(kāi)辟新方向，有望推動(dòng)新一代抗血栓、溶栓藥物的研發(fā)。該文章研究中采用LMD (Laser Microdissection, 激光顯微切割) 的技術(shù)手段，用于精準(zhǔn)分離血栓中的中性粒細(xì)胞，開(kāi)展空間蛋白質(zhì)組學(xué)分析，保留細(xì)胞原位空間信息、實(shí)現(xiàn)高純度目標(biāo)細(xì)胞捕獲，為發(fā)現(xiàn)關(guān)鍵分子 SERPINB3 提供技術(shù)基礎(chǔ)。

臨床轉(zhuǎn)化價(jià)值

1、新型預(yù)后生物標(biāo)志物：SERPINB3 可作為血栓微環(huán)境標(biāo)志物，精準(zhǔn)預(yù)測(cè)卒中患者溶栓效果與長(zhǎng)期預(yù)后American Society of Hematology。

2、全新治療靶點(diǎn)：靶向抑制 SERPINB3 可軟化血栓、增強(qiáng)溶栓敏感性、延長(zhǎng)有效治療時(shí)間窗，為克服溶栓抵抗、挽救缺血半暗帶提供全新策略。

3、方法學(xué)創(chuàng)新：建立血栓三維成像 + 空間蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)平臺(tái)，為血栓微環(huán)境研究提供標(biāo)準(zhǔn)化方法。

該研究揭示SERPINB3 陽(yáng)性中性粒細(xì)胞是驅(qū)動(dòng)急性缺血性卒中（AIS）血栓進(jìn)行性硬化、導(dǎo)致溶栓抵抗與預(yù)后不良的關(guān)鍵致病細(xì)胞。34 例急性缺血性卒中患者取栓血栓進(jìn)行三維成像、多重染色與激光顯微切割蛋白質(zhì)組學(xué)分析American Society of Hematology。確認(rèn)中性粒細(xì)胞是血栓中最主要的免疫細(xì)胞群體，其浸潤(rùn)密度與血栓硬度、膠原含量呈正相關(guān)，且與患者 90 天不良預(yù)后（mRS 2-6 分）顯著關(guān)聯(lián)。蛋白質(zhì)組學(xué)篩選出SERPINB3（絲氨酸蛋白酶抑制劑 B3） 為預(yù)后不良組血栓中性粒細(xì)胞中上調(diào)的蛋白，其表達(dá)水平可獨(dú)立預(yù)測(cè)不良預(yù)后（AUC=0.806）。

機(jī)制：中性粒細(xì)胞分泌的 SERPINB3 通過(guò)激活TGFβ1-SERPINB3-NETs-COL1A1信號(hào)軸，促進(jìn)膠原（COL1A1）大量沉積與中性粒細(xì)胞胞外陷阱（NETs）形成，使血栓結(jié)構(gòu)更致密、硬度顯著增加American Society of Hematology。血栓硬化后會(huì)抵抗 rt-PA 等溶栓藥物的降解，導(dǎo)致血管再通困難、缺血半暗帶無(wú)法及時(shí)挽救，加重腦損傷。

作者與團(tuán)隊(duì)介紹

1、逯丹（Dan Lu）暨南大學(xué)附屬第一醫(yī)院，卒中與血栓領(lǐng)域青年研究者，本研究核心負(fù)責(zé)人，聚焦缺血性卒中免疫血栓機(jī)制與轉(zhuǎn)化研究。

2、徐安定（Anding Xu）暨南大學(xué)附屬第一醫(yī)院，著名腦血管病專(zhuān)家，教授、主任醫(yī)師，暨南大學(xué)附屬第一醫(yī)院原院長(zhǎng)，長(zhǎng)期從事缺血性卒中基礎(chǔ)與臨床研究，為團(tuán)隊(duì)學(xué)術(shù)帶頭人。

3、麥鴻成（Hongcheng Mai）中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院血栓與蛋白質(zhì)組學(xué)專(zhuān)家，參與本研究機(jī)制與蛋白質(zhì)組學(xué)核心分析。

LMD 在文中的具體應(yīng)用與作用

01. 精準(zhǔn)捕獲目標(biāo)細(xì)胞（MPO?中性粒細(xì)胞）

• 結(jié)合免疫熒光染色（標(biāo)記MPO，中性粒細(xì)胞特異性標(biāo)志物），在組織切片上可視化定位血栓內(nèi)的中性粒細(xì)胞。

• 用激光顯微切割精確切取、分離單個(gè)或一群 MPO 陽(yáng)性中性粒細(xì)胞，排除紅細(xì)胞、血小板、纖維蛋白等雜質(zhì)，獲得高純度中性粒細(xì)胞樣本。

02. 保留空間位置信息（關(guān)鍵優(yōu)勢(shì)）

• 傳統(tǒng) “勻漿" 蛋白質(zhì)組會(huì)破壞組織空間結(jié)構(gòu)，混合所有細(xì)胞成分。

• LMD 能原位分離特定區(qū)域、特定類(lèi)型的細(xì)胞，確保后續(xù)分析結(jié)果嚴(yán)格對(duì)應(yīng)血栓內(nèi)中性粒細(xì)胞的真實(shí)分子狀態(tài)。

03. 支撐空間蛋白質(zhì)組學(xué)

• 對(duì) 34 例患者血栓中LMD 分離的中性粒細(xì)胞進(jìn)行蛋白質(zhì)組測(cè)序。

• 對(duì)比預(yù)后良好 / 不良組，篩選出顯著上調(diào)的蛋白：SERPINB3。

• 證明 SERPINB3 是血栓中性粒細(xì)胞特異性高表達(dá)、并與血栓硬化、溶栓抵抗、預(yù)后差強(qiáng)相關(guān)的關(guān)鍵分子。

04. 方法學(xué)創(chuàng)新

• 建立 “三維成像 + 多重染色 + LMD 空間蛋白質(zhì)組" 一體化血栓研究平臺(tái)。在人缺血性卒中血栓中實(shí)現(xiàn)原位免疫細(xì)胞的空間分子圖譜解析。

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