Lattice SIM使用晶格點陣模式,而非傳統(tǒng)SIM中的柵格線來照射樣品區(qū)域。這樣,成像速度便得到了大幅提高。此外,晶格模式還提供更高對比度,從而實現(xiàn)更可靠的圖像重構。由于晶格模式照明的采樣效率是傳統(tǒng)SIM的2倍,因此樣品照明所需的激光能量更少。這種晶格照明使SIM成為了理想的活細胞成像技術。晶格照明的光子效率得到了大幅提升,使您能夠在提高成像速度的同時獲得更高對比度和更低光漂白。
SIM2是一種突破性新型圖像重構算法,可提高結構光照明顯微成像數(shù)據(jù)的分辨率和光學切片質量。SIM2兼容Elyra 7的所有SIM成像模式,并集成在ZEN軟件中。
與傳統(tǒng)重構算法不同,SIM2是一種兩步圖像重構算法。第一步,進行衍射級次合并、去噪和頻率抑制濾波。所有這些數(shù)字圖像操作所產生的效果都轉化為數(shù)字SIM點擴散函數(shù)(PSF)。后續(xù)的迭代去卷積使用的正是該PSF。與使用實驗性PSF對基于硬件的顯微數(shù)據(jù)去卷積的優(yōu)勢類似,SIM2算法在分辨率、光學切片和穩(wěn)定性方面優(yōu)于傳統(tǒng)的單步圖像重構法。
Lattice SIM2可以讓您對常規(guī)染色樣品進行精細至60 nm分辨率的多色成像。由于聯(lián)會復合體尺寸較小,以往只有通過復雜的方法(如對擴大三倍的樣品進行超分辨率成像)才能對其進行三色成像。相比之下,Lattice SIM2無需對樣品進行特殊處理或染色,便可以分辨出遠低于100 nm距離的SYCP3(側生組分)和SYCP1-C(橫向細絲的C-末端)兩條線狀。更重要的是,三色圖像提供了關于SYCP3蛋白和SYCP1蛋白之間距離的結構信息。即使在SYCP1蛋白中,N-和C-末端兩個標記之間的分辨率不足50 nm,也可以清楚分離。
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