圖 | 抗原-抗體表位定位（氫氘交換質(zhì)譜法）技術(shù)流程

技術(shù)原理：

抗原-抗體表位定位（氫氘交換質(zhì)譜法）服務(wù)基于氫氘交換質(zhì)譜（HDX-MS）技術(shù)，其原理如下：

溶液中蛋白質(zhì)動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)的氫氘交換特性：蛋白質(zhì)表面氨基酸殘基（尤其是 主鏈酰胺氫）與氘代溶劑（D2O）中的氘發(fā)生動(dòng)態(tài)交換，其中柔性或未折疊區(qū)域因暴露于溶劑環(huán)境而交換 速率較快，而穩(wěn)定結(jié)構(gòu)域因氫鍵網(wǎng)絡(luò)保護(hù)交換速率顯著減緩。

通過精確控制氘代反應(yīng)時(shí)間，并利用快速酸淬滅終止反應(yīng)，可捕獲不同時(shí)間點(diǎn)的氘代水平差異；隨后通 過高分辨率質(zhì)譜檢測酶切肽段的質(zhì)量偏移，結(jié)合序列覆蓋分析精確定位構(gòu)象變化或相互作用區(qū)域。最終 ，基于氘代動(dòng)力學(xué)曲線建立時(shí)間分辨模型，解析蛋白質(zhì)的構(gòu)象動(dòng)態(tài)、量化穩(wěn)定性差異或揭示功能相關(guān)的 動(dòng)態(tài)行為。

應(yīng)用場景：

1. 疫苗設(shè)計(jì)

· 抗原表位篩選：快速鑒定中和抗體的靶向表位，指導(dǎo)疫苗抗原設(shè)計(jì)。

· 免疫原性優(yōu)化：通過表位動(dòng)態(tài)分析，增強(qiáng)疫苗的免疫應(yīng)答特異性。

2. 診斷與治療性抗體開發(fā)

· 抗體表位表征：驗(yàn)證候選抗體的結(jié)合位點(diǎn)，確保靶向特異性。

· 抗體工程優(yōu)化：指導(dǎo)抗體親和力成熟或人源化改造。

3. 疾病機(jī)制研究

· 病原體-宿主互作：解析病毒/細(xì)菌抗原與宿主抗體的結(jié)合機(jī)制。

· 自身免疫疾?。貉芯孔陨砜贵w異常靶向的病理表位。

技術(shù)優(yōu)勢：

高分辨率：肽段級(jí)別分辨率（5-10個(gè)氨基酸），可精確定位關(guān)鍵殘基。

高靈敏性：僅需微克級(jí)樣品，可檢測細(xì)微構(gòu)象變化。

動(dòng)態(tài)信息：捕捉藥物結(jié)合引起的瞬時(shí)構(gòu)象變化，揭示變構(gòu)效應(yīng)。

無需結(jié)晶：適用于膜蛋白、柔性區(qū)域或低親和力（KD ≥ μM級(jí)）藥物分析。

交付數(shù)據(jù)：

送樣要求：推薦濃度≥1mg/ml，總量≥50ug（單次實(shí)驗(yàn)）。

交付周期：標(biāo)準(zhǔn)服務(wù)周期為20個(gè)工作日（高級(jí)服務(wù)延長至30個(gè)工作日）。